活性氧清除物质（精选八篇）
活性氧清除物质 篇1
1 实验部分
1. 1 主要仪器和试剂
仪器: ZN-400A型高速万能粉碎机,吉首市中诚制药机械厂; RE52AA旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂; SHZ-III循环水真空泵,上海亚荣生化仪器厂; 微型喷雾干燥实验装置,天津大学北洋化工实验设备有限公司; V-630 紫外-可见分光光度计,日本JASCO公司; LD5-10 型京立离心机,北京京立离心机有限公司; DF-1 型集热式磁力搅拌器,江苏金坛市金城国胜实验仪器厂; AUY120 分析天平,日本岛津公司; SX2-5-12 电阻炉,上海意中电炉有限公司; 20 ~ 5000 μL系列大龙移液器,杭州陆恒生物科技有限公司。
试剂: 无水乙醇,70% 乙醇,30% 乙醇; 5% 苯酚溶液( 滴加Na OH至苯酚刚好溶解) ; 浓硫酸; 1. 000 mg/m L葡萄糖溶液; 1. 000 mg/m L牛血清蛋白( BSA) 储备液和0. 100 mg/m L的BSA工作液; 0. 10 mg / m L. 考马斯亮蓝G - 250 溶液( 50. 0 mg考马斯亮蓝G-250 于小烧杯中,加入25 m L 95% 乙醇和60 m L85% 的磷酸溶解,用水稀释至500 m L,混匀) ; 0. 500 mg / m L芦丁70% 乙醇溶液; 5% Na NO2溶液; 10% Al( NO3)3溶液( 含0. 1 mol / L HNO3) ; 2% Na OH溶液; 0. 5000 mg/m L抗坏血酸( Vc) 溶液; 40 μg/m L 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼( DPPH) 乙醇溶液。实验用水为超纯水,实验试剂为分析纯。
马甲子果: 1#、2#是2014. 10 采自乐山土主镇不同果园围墙铁篱笆的果实,3#是2013. 10 采自乐山土主镇果园围墙铁篱笆的果实。除去树叶残肢等杂物,自然阴干后装袋储存。用时用ZN-400A型高速万能粉碎机粉碎成粉直接使用。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 马甲子果水提物的提取
分别称取1#、2#和3# 马甲子果粉末250 g于三个大烧杯中,分别加水1000 m L,在DF-1 型集热式磁力搅拌器80 ℃ 恒温提取2 h,共提三次。用纱布过滤,滤液用LD5-10 型京立离心机5000 r/min离心15 min,合并三次离心液,离心液经RE52AA旋转蒸发器减压浓缩至800 m L左右。用微型喷雾干燥装置干燥浓缩液得马甲子果水提物。条件设定为电流10 A,温度200 ℃ ,喷嘴压力0. 15 MPa,空气流量15 m3/ h,蠕动泵进料量33 r/min。
1. 2. 2 多糖含量的测定
硫酸-苯酚法测定多糖: 参考文献[10]作适当改进制作糖的标准曲线。分别量取0. 10 m L、0. 20 m L、0. 40 m L、0. 60 m L、0. 80 m L、1. 00 m L 1. 000 mg / m L葡萄糖溶液于10 m L比色管中,用水定容至刻度,混匀。得葡糖糖标准工作液的浓度分别为0. 010 mg/m L、0. 020 mg/m L、0. 04 mg/m L、0. 060 mg/m L、0. 080 mg / m L、0. 100 mg / m L。分别量取葡萄糖标准工作液和浓度为0. 100 mg/m L样品工作液2. 00 m L于10 m L比色管中,加入1. 00 m L 5% 苯酚溶液和5. 00 m L浓硫酸。沸水浴15 min,冷却,测定490 nm处的吸光度A490绘制糖的标准曲线和测定样品中多糖含量。标准曲线的参比溶液用2. 00 m L水代替标准工作液,样品测定的参比溶液用1. 00 m L水代替苯酚,其它试剂一样。
1. 2. 3 蛋白质含量的测定
考马斯亮蓝G-250 染色法测定蛋白质含量: 标准曲线的制作参考文献[11]。移取0. 100 mg/m L的BSA标准工作液0 m L、0. 10 m L、0. 20 m L、0. 40 m L、0. 60 m L、0. 80 m L、1. 00 m L于10 m L的比色管中,分别补水1. 00 m L、0. 90 m L、0. 80 m L、0. 60 m L、0. 40 m L、0. 20 m L、0 m L,使每支管中溶液体积为1. 00 m L,再分别加入5. 00 m L的考马斯亮蓝G-250 溶液,混匀。放置20 min后在595 nm处测定吸光度A595。样品测定量取1. 00 m L 0. 500 mg/m L的样品溶液,其余于标准曲线制作相同。绘制蛋白质染色的标准曲线和测定样品中蛋白质的含量。
1. 2. 4 总黄酮含量的测定
用Na NO2-Al( NO3)3-Na OH分光光度法测定总黄酮: 参考文献[12]作适当改进制作黄酮芦丁的标准曲线。分别量取0. 20 m L、0. 50 m L、1. 00 m L、1. 50 m L、2. 00 m L、2. 50 m L、3. 00 m L、4. 00 m L的0. 500 mg / m L的芦丁溶液于10 m L的比色管中,用30% 的乙醇定容至刻度,混匀得芦丁标准工作液的浓度分别为0. 010 mg/m L、0. 025 mg/m L、0. 050 mg/m L、0. 075 mg/m L、0. 100 mg / m L、0. 125 mg / m L、0. 150 mg / m L、0. 200 mg /m L。样品溶液用30% 乙醇配制为0. 500 mg / m L溶液。分别量取2. 00 m L的标准工作液和样品溶液于10 m L比色管中,加入1. 00 m L 5% Na NO2溶液,振荡,放置5 min后加入0. 50 m L10% Al( NO3)3溶液,振荡,放置5 min后加入2. 50 m L 2%Na OH溶液和2. 00 m L 30% 乙醇溶液,振荡混匀。制作标准曲线的参比溶液用水代替标准溶液,样品测定的参比溶液用水代替Na NO2,其它与标准曲线的制作相同。放置20 min测定495 nm处吸光度A495绘制黄酮标准曲线和测定样品中总黄酮的含量。
1. 2. 5 灰分含量的测定
炽烧残渣法测定灰分含量: 参考文献[13]作适当改进。准确称取0. 2 ~ 0. 3 g的样品于750 ℃ 电阻炉灼烧至恒重的瓷坩埚中,加5 滴浓硫酸润湿,在小电炉上灰化完全除尽硫酸蒸气后,再移入750 ℃ 的电阻炉灼烧至恒重。根据样品质量、空坩埚和灰分及坩埚质量计算灰分的含量。
1. 2. 6 清除DPPH·自由基试验
参考文献[14]作适当改进测定清除DPPH·自由基能力。分别量取500 μg/m L的抗坏血酸和样品溶液0. 05 m L、0. 10 m L、0. 20 m L、0. 40 m L、0. 60 m L、0. 80 m L、1. 00 m L、2. 00 m L和4. 00 m L于10 m L的比色管中, 加水定容, 得浓度分别为2. 5 μg / m L、5. 0 μg / m L、10. 0 μg / m L、20. 0 μg / m L、30. 0 μg / m L、40. 0 μg / m L、50. 0 μg / m L、100. 0 μg / m L、200. 0 μg / m L 9 个浓度梯度的溶液。样品组: 抗坏血酸或样品溶液3. 00 m L+DPPH溶液3. 00 m L; 空白组: 抗坏血酸或样品溶液3. 00 m L+乙醇3. 00 m L; 对照组: 水3. 00 m L+DPPH溶液3. 00 m L。放置30 min后在525 nm处测定吸光度A525。
式中: A———样品组吸光值
Ai———空白组吸光值
A0———对照组吸光值
2 结果与讨论
2. 1 波长的选择
“1. 2. 2”节苯酚-硫酸显色法测定多糖含量, “1. 2. 3”节考马斯亮蓝G-250 染色法测定蛋白质, “1. 2. 4”节Na NO2-Al( NO3)3-Na OH络合法测定总黄酮,“1. 2. 6” 节DPPH·自由基的清除率均采用可见分光光度法测定。分别扫描各自溶液的吸收曲线,选择各自溶液的最大吸收波长作为测定波长。多糖显色、蛋白质染色、黄酮显色和DPPH溶液的最大吸收波长分别为490 nm、595 nm、495 nm和525 nm。
2. 2 马甲子果水提物的得率
按 “1. 2. 1”节实验方法,1#、2#和3#马甲子果粉经水提,喷雾干燥得到水提物的粉末在10 g ~ 13 g,得率为4. 0% ~5. 2% ( 喷雾干燥时有部分产物附在喷雾桶的壁上无法扫下,提取率比得率大些) 。
2. 3 含量测定
按 “1. 2. 2”节、“1. 2. 3”节和 “1. 2. 4”节实验方法分别绘制的多糖、蛋白质和黄酮的标准曲线见表1。从表1 可知多糖、蛋白质和黄酮在其线性范围内吸光度与浓度或质量之间有良好的线性关系。
从表2 看出,不同年份、不同采摘地点的马甲子果水提物的多糖、蛋白质、黄酮和灰分的含量有一定的差异。引起这种差异的原因是多方面的,除与生长的土壤环境、采光、生长时间等客观原因有关外,还与提取率、测定误差等主观原因有关。
2. 4 清除DPPH·自由基分析结果
从图1 可知,随着抗坏血酸和样品浓度的增加,对DPPH·自由基的清除率逐渐增大,当对DPPH·自由基清除率为50%时,抗坏血酸和1#、2#及3#的浓度IC50分别为2. 84 μg /m L、15. 8 μg / m L、18. 9 μg / m L和20. 8 μg / m L。在一定的浓度范围内,对DPPH·自由基的清除率P与浓度c具有良好的线性关系。线性关系见表3。
3 结论
活性氧清除物质 篇2
外源硅对盐胁迫下黄瓜幼苗叶绿体活性氧清除系统的影响
以黄瓜为材料,研究了外源硅(K2SiO3 1.0 mmol/L)对NaCl(50 mmol/L)胁迫下黄瓜幼苗叶绿体中Na+、K+向叶绿体分配及活性氧清除系统的影响.结果表明:盐胁迫下硅处理使叶绿体在K+与Na+之间选择性吸收K+,从而降低了叶绿体内Na+的含量;同时Si处理可以显著降低盐胁迫下叶绿体中过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的活性及抗坏血酸(AsA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量.说明Si不仅能降低叶绿体对Na+的选择吸收,还能增强叶绿体活性氧清除系统清除活性氧的.能力,缓解盐胁迫对叶绿体膜的伤害.
作 者：钱琼秋 宰文珊 朱祝军 喻景权 QIAN Qiong-Qiu ZAI Wen-San ZHU Zhu-Jun YU Jing-Quan 作者单位：浙江大学园艺系,农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室,杭州,310029刊 名：植物生理与分子生物学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF PLANT PHYSIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY年，卷(期)：32(1)分类号：Q945关键词：硅 黄瓜 盐胁迫 叶绿体 活性氧清除系统
活性氧清除物质 篇3
中药材传统的干燥方法有自然晒干、自然阴干、烘干等[15]。传统方法干燥连翘叶大都采用潮湿的滤纸擦拭表面后恒温鼓风干燥,但热风干燥过程中会导致连翘叶中的某些活性成分损失。合适的干燥方法既能保持连翘叶的活性成分,又能保证连翘叶的药用效果。目前对于连翘叶的干燥方法的研究较少,限制了连翘叶资源更深层次的开发利用。有研究表明连翘叶蒸晒品中连翘酯苷含量比生晒品含量高[16]。本研究对连翘叶采取不同干燥方式处理,评价其清除ABTS、DPPH自由基的活性,并采用分光光度法测定其总黄酮、总酚酸的含量,高效液相色谱法测定不同干燥方法得到的连翘叶中绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷的含量,探讨干燥方法对连翘叶清除自由基活性和总黄酮、总酚酸及绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷含量的影响,为选择合理的连翘叶干燥方法提供实验依据,同时为连翘叶资源的进一步开发利用提供一定的科学指导。
1 材料
连翘叶:2014年9月采自山西省陵川县连翘种植基地,经浙江中医药大学药学院张如松教授鉴定为木犀科植物连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)的叶;芦丁、绿原酸、连翘苷、连翘酯苷:购自美国Sigma公司。Folin-Ciocalteu试剂:购自德国Merck公司;DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼):购自日本化成工业株式会社;ABTS[2,2-联氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐]:购自阿拉丁试剂公司;乙腈(色谱纯):购自Fisher Chemical;娃哈哈纯净水:购自杭州娃哈哈集团有限公司;其他试剂均为市售分析纯。
Waters 2695液相色谱仪(由高精度2695四元梯度泵、全自动进样器、Waters 2996二极管阵列检测器及Waters Chemstation色谱管理软件组成);50 g中药材粉碎机:浙江武义县屹立工具有限公司;HH-2数显恒温水浴锅:国华电器有限公司;TB-215D微量分析天平:德国赛多利斯股份有限公司;722E型紫外可见分光光度计:上海光谱仪器有限公司;101-0AB数显鼓风干燥箱:天津泰斯特仪器有限公司。
2 方法
2.1 连翘叶的干燥方法
1)晒干:将连翘叶平铺于苇席上,置于太阳下晒干。2)阴干:将连翘叶平铺于苇席上,放在室内通风阴凉干燥处阴干。3)烘干:将连翘叶用滤纸擦拭表面,均匀摊放在电热鼓风干燥箱中,40℃下鼓风干燥。4)蒸后阴干:鲜叶蒸5 min,与阴干同等条件下干燥样品。5)煮后阴干:鲜叶煮5 min,与阴干同等条件下干燥样品。
连翘叶干燥后,用中药打粉机粉碎,过筛(40目)后,置于真空干燥器中备用。
2.2 连翘叶提取液的制备
称取不同干燥方法得到的连翘叶样品各1.000 g,加10m L体积分数80%乙醇研磨提取,转入25 m L容量瓶中,超声提取30 min后,离心(4000 r/min,5 min),将上清液用80%乙醇定容,置于-4℃冰箱中保存备用。
2.3 清除自由基活性测定
2.3.1 清除DPPH·活性测定
测定方法参考文献[17]。精密称取DPPH自由基2.5 mg于100 m L容量瓶中,用甲醇定容,配制为25 mg·L-1的DP-PH·甲醇溶液,放置于避光处(需现用现配)。取上述25 mg·L-1的DPPH·甲醇溶液3.9 m L于比色管中,向比色管中加入0.1 m L不同浓度的被测溶液,涡漩混匀,在黑暗避光处30℃水浴反应40 min,于515 nm测定吸光度值A,,同时以0.1 m L甲醇代替被测溶液做空白试验,每个样品做3个重复。根据下列公式计算DPPH·的清除率:DPPH·清除率(%)=[1-A/A0]×100,其中:A为样品溶液吸光度值,A0为空白溶液吸光度值。分别以各样品的不同浓度与其对应的DPPH·自由基清除率作图。
2.3.2 清除ABTS+·活性测定
按照文献[18]配制7 mmol·L-1的ABTS自由基储备液(以甲醇溶),取5 m L上述ABTS储备液,将其与88μL 140mmol·L-1的过硫酸钾溶液超声混匀,在室温、黑暗避光处放置12~16 h,形成ABTS+·储备液。临用前将生成的ABTS+·自由基储备液用甲醇稀释,于734 nm下测定其吸光值,使稀释液的吸光度为(0.70±0.02),得到ABTS+·工作液,将其保存于避光黑暗处。
取ABTS+·工作液4 m L加入比色管中,向其中加入0.04 m L不同浓度的样品甲醇溶液,漩涡混匀,30℃水浴避光反应15 min[19],于734 nm下测定其吸光度值A,同时以0.04 m L甲醇代替样品甲醇溶液做空白试验每个样品平行3份。根据下列公式计算ABTS+·的清除率:ABTS+·清除率(%)=[1-A/A0]×100,其中:A为样品溶液吸光度值,A0为空白溶液吸光度值。分别以各样品的不同浓度与其对应的ABTS+·自由基清除率作图。
2.4 活性成分测定
2.4.1 总黄酮含量测定
标准曲线的绘制:采用硝酸铝-亚硝酸钠显色法绘制标准曲线[20]。分别精密量取1 g·L-1芦丁溶液(甲醇制)0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 m L,置于10 m L容量瓶中,加入10%Na NO2溶液0.3 m L,摇匀后静置6 min,加入10%Al(NO3)3溶液0.3 m L,摇匀,放置6 min后加入4%Na OH溶液4.0m L,再用甲醇稀释定容至10 m L,摇匀,放置15 min,以试剂空白为对照,在510 nm处测定各自吸光度值,再以吸光度(A)为纵坐标,以芦丁的不同质量浓度(g·L-1)为横坐标,绘制标准曲线,所得回归方程为Y=12.46X-0.0214(r=0.9993),线性范围为0.01~0.05 g·L-1。
总黄酮含量测定:分别精密移取不同干燥方法得到的提取液1 m L于10 m L容量瓶中,按照上述方法在510 nm处测其吸光度值,以相应试剂为空白调零,用回归方程计算出不同干燥方法得到的连翘叶提取物中总黄酮的含量。
2.4.2 总酚酸含量测定
标准曲线的绘制:分别精密吸取1 mmol·L-1没食子酸对照液(甲醇制)45、60、75、90、105、120μL,置于5 m L具塞试管中,加甲醇补足至0.5 m L,加入Folin-Ciocalteu试剂1m L,摇匀,放置3 min后加入7.5%Na2CO3溶液1 m L,混匀,室温避光静置2 h后,离心(8000 r/min,10 min),于750 nm处测定各自吸光度值,以吸光度值为纵坐标,没食子酸的不同质量浓度为横坐标绘制标准曲线,得回归方程Y=41.56X+0.05(r=0.9996)。
总酚酸含量测定:定量移取0.1 m L上述提取液于5 m L具塞试管中,按照上述方法在750 nm处测定吸光值,以相应试剂为空白调零,用回归方程计算出不同干燥方法得到的连翘叶提取物中总酚酸的含量。
2.4.3 绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷含量测定
提取方法同2.2,取上清液过0.45μm滤膜,待进HPLC分析。采用HPLC法检测绿原酸、芦丁、连翘苷和连翘酯苷的含量。色谱柱:Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈,B为0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱程序为:0~8 min,8%~10%A;8~24 min,10%~15%A;24~30 min,15%~17%A;30~40 min,17%~30%A;40~50 min,30%~50%A;柱温:25℃;流速:1.0 m L·min-1;检测波长:280 nm;进样量:10μL。
绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷标准曲线的建立:配制绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷浓度均为2.0 g·L-1的混合标准储备液,精密吸取储备液,分别稀释成1 000、500、250、100、50、10 mg·L-1的混合标准溶液,按照上述色谱条件进行HPLC测定,以进样浓度(X,mg·L-1)为横坐标,以峰面积(Y,mv·s)为纵坐标,求出直线回归方程,绘制标准曲线。
3 结果
3.1 不同干燥方法对连翘叶清除自由基活性的影响
3.1.1 不同干燥方法对连翘叶清除DPPH·自由基活性的影响
不同干燥方法得到的连翘叶清除DPPH·自由基的结果如图1所示,由图1可以看出,连翘叶提取液具有一定的清除DPPH·的作用,并且随着提取液浓度的增加,清除DP-PH·自由基的活性也随之增强,增加幅度基本相同。其中蒸后阴干的连翘叶提取液清除DPPH·的能力最强,煮后阴干、烘干、阴干的稍次之,而晒干的连翘叶提取液清除DPPH·的能力最差。
3.1.2 不同干燥方法对连翘叶清除ABTS自由基活性的影响
不同干燥方式处理的连翘叶提取物对ABTS自由基的清除作用如图2所示,由图2可以看出,随着浓度的增加,各提取液清除ABTS自由基活性也随之增加,但是增加幅度不尽相同。蒸后阴干、煮后阴干和烘干连翘叶提取液的清除ABTS自由基活性基本相同,其次为阴干,而晒干连翘叶提取液清除ABTS自由基活性最弱。对比图1和图2可以看出,不同干燥方式处理的连翘叶提取物清除DPPH·与ABTS自由基活性呈现出基本相同的趋势,在同等浓度下,清除ABTS自由基活性更强。
3.2 不同干燥方法对连翘叶活性成分的影响
3.2.1 不同干燥方法对总黄酮和总酚酸含量的影响
按2.4.1和2.4.2所述方法,对不同干燥处理得到的连翘叶中总黄酮和总多酚的含量进行测定,结果如表1所示。由表1可以看出,不同干燥方法得到的连翘叶中总黄酮含量差异不大;而总酚酸含量差异较大,这可能与连翘叶中所含活性成分的化学结构有关,不同的化合物对温度、氧气等敏感程度不同。就总酚酸含量而言,蒸后阴干得到的连翘叶中总酚酸含量最高,达到40 mg·g-1,而晒干的连翘叶总酚酸含量最低,仅为蒸后阴干的60%左右,这可能是由于连翘叶处于高温环境且暴露于空气中,一些结构不稳定的酚酸类化合物被氧化所导致的。
3.2.2 不同干燥方法对绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷含量的影响
经不同方法干燥得到的连翘叶,采用2.4.3所述方法测定其主要活性成分,4种成分及烘干连翘叶的色谱图如图3所示,由图3可以看出,在此色谱分离条件下,样品中的4种成分与其他成分达到良好的分离,峰形对称不拖尾。不同方法干燥的连翘叶中4种成分的含量如表2所示,由表2可以看出,经不同方法干燥的连翘叶,其主要成分基本一致,4种成分均有检出,但其各成分含量都有一定变化,不同干燥方法对4种成分的影响趋势趋于一致。从各成分含量来看,晒干得到的连翘叶中各成分含量均较低,蒸后阴干各成分含量均较高。
1.绿原酸;2.连翘酯苷;3.芦丁;4.连翘苷
4 讨论
通过选取清除ABTS、DPPH自由基及连翘叶中总黄酮、总酚酸和绿原酸、芦丁、连翘苷、连翘酯苷4种主要活性成分作为评价指标,首次摸清了晒干、阴干、烘干、蒸后阴干、煮后阴干5种不同干燥方法对清除自由基活性及活性成分含量的影响。本研究发现不同干燥方法处理的连翘叶,其清除自由基活性及活性成分的含量均有一定差别,蒸后阴干的连翘叶清除自由基活性及活性成分的含量均呈现较高水平,而晒干的连翘叶均最低,蒸后阴干是连翘叶的最佳干燥方法,与王秀文[21]等的研究结果一致。
绿原酸是一种具有邻位酚羟基结构的酚酸类化合物,在多酚氧化酶的催化作用下,可氧化缩合。在烘干过程中,鼓风干燥箱将水分带走,干燥速度较快,使得连翘叶中绿原酸含量较高。阴干时靠自然的空气对流干燥,干燥速度较慢,而且绿原酸暴露在空气中,极易被氧化。晒干时,中午温度较高,且连翘叶直接暴露在空气中,绿原酸也很容易被氧化。而蒸煮处理后使部分多酚氧化酶失活,绿原酸含量较高,含量测定结果表明其高于烘干处理。
芦丁又名槲皮素-3-O-芸香糖苷,为黄酮类物质,结构相对稳定,因此不同干燥处理对其影响不大。
连翘苷极易氧化,而温度对其稳定性影响不大[22],蒸煮处理后干燥得到的连翘叶中连翘苷含量较直接烘干、晒干、阴干含量高。
连翘酯苷是一种结构较为复杂的酚类化合物,遇酸、碱或高温等不稳定[23],会导致其分解为小分子化合物,晒干的连翘叶中连翘酯苷含量较低,蒸煮处理后阴干可显著提高连翘叶中连翘酯苷的含量。
几种常见蔬菜清除自由基活性的研究 篇4
关键词：羟基自由基,清除率,辣椒,萝卜,生菜,油菜
自由基是生物机体在生命活动中通过生物化学反应所产生的中间产物。在正常的生理情况下, 机体内的自由基的产生和消除处于一个动态平衡之中, 其浓度也维持在较低水平, 此时自由基不仅不会损伤机体, 还可显示出独特的生理作用;而在某些病理情况下, 机体自由基的产生和消除功能将失去平衡, 由于自由基具有很高的反应活性, 因此它将在分子、细胞乃至器官水平给机体造成损伤, 从而加快机体的衰老过程, 并可诱导癌症心血管疾病等诸多疾病的发生。[1,2]生物体内氧化代谢产生的羟基自由基 (·OH) 具有强反应活性, 它能与蛋白质、糖类等物质发生链反应, 导致细胞损伤甚至疾病。具有清除自由基活性的物质, 即自由基清除剂。由于自由基清除剂具有广泛的生物活性, 因而有关研究受到世界各国的普遍重视。目前已发现的天然自由基清除剂主要包括酶和非酶两大类。酶类如:超氧化物歧化酶 (SOD) 、过氧化氢酶 (CAT) 、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX) 等。非酶类有:肽和非酶蛋白类、生物碱及含氮杂环类、抗坏血酸、生育酚、胡萝卜素类、多酚类、黄酮及类黄酮、苯丙素类等。我们日常食用的蔬菜、水果和中药中往往含有大量的自由基清除剂。本文选取常见蔬菜作为研究对象, 其中含有的维生素C、维生素E、胡萝卜素、生物碱、柠檬酸等都具有一定的自由基清除能力[3], 其乙醇提取液的自由基清除率是多种自由基清除剂共同作用的结果。
1 试验部分
1.1 仪器、试剂与样品
自动分析天平, TU-1810紫外可见分光光度计, 超声波清洗器。
水杨酸 (AR) , H2O2 (30%) , FeSO4·7H2O (AR) , 乙醇 (AR) 。
选取市售新鲜成熟生菜、油菜、青辣椒、柿子椒、胡萝卜、青萝卜。
1.2 实验方法
1.2.1·OH的产生及测定原理
·OH-自由基产生体系模型:H2O2+Fe2+→OH+Fe3+。在反应体系中加入水杨酸, 能有效捕捉·OH并产生有色产物。该产物在510nm处有强吸收, 若加入有清除·OH功能的被测物, 便会与水杨酸竞争·OH, 使有色产物的生成量减少, 采用固定反应时间法, 在510nm处测量含被测物的反应液的吸光度, 与空白液比较, 便能测定被测物对·OH的清除作用[4]。
1.2.2 样品液的提取
以生菜的乙醇提取液为例, 将生菜洗净干燥, 准确称取50g生菜, 捣碎, 加入100mL的乙醇, 室温下用超声波清洗器震荡三小时, 得样品粗提取液。
1.2.3·OH的制备
在50mL容量瓶中加入2.5mL H2O2 (0.088mol/L) , 2.5mL Fe2+ (9.0mmol/L) 和0.5mL水杨酸 (9.1mmol/L) 。
1.2.4 空白试液吸光度的测定
将配制好的自由基试液定容至50ml, 取2ml在510nm处测其吸光度记为A0。
1.2.5 提取液吸光度的测定
将配制好的自由基试液中加入样品提取液, 定容至50ml, 摇匀固定反应时间为3min, 测其吸光度, 记为As。每个样品平行测定三次, 取平均值进行计算:消除率 (%) =A0-AsA0×100%
2 结果与讨论
2.1 柿子椒和红辣椒对·OH的清除作用及清除能力的比较
向·OH产生体系中分别加入柿子椒和红辣椒的提取液, 测定吸光度。两种提取液对·OH的清除率均随提取液的浓度升高而升高。红辣椒较柿子椒强, 但差异不明显, 见图1。分析原因是红辣椒虽比柿子椒中胡萝卜素、抗坏血酸的含量高, 但维生素E的含量后者较高[5]。
2.2 胡萝卜和青萝卜对·OH的清除作用及清除能力的比较
向·OH产生体系中分别加入胡萝卜和青萝卜的提取液, 测定吸光度。两种提取液对·OH的清除率均随提取液的浓度升高而升高。胡萝卜较青萝卜强, 见图2。分析原因是胡萝卜中维生素C的含量与青萝卜中维生素C的含量几乎一样;胡萝卜中维生素E的含量大约是青萝卜中维生素E的含量的2倍;胡萝卜中胡萝卜素的含量远远超过青萝卜中胡萝卜素的含量, 大约是青萝卜的70倍[5]。
2.3 生菜对·OH的清除作用
向·OH产生体系中加入生菜的提取液, 测定吸光度。提取液对·OH的清除率随提取液的浓度升高而升高, 见图3。分析原因是生菜中含维生素C、维生素E、胡萝卜素和抗坏血酸。这些成分是清除自由基的有效成分。
2.4 油菜对·OH的清除作用
向·OH产生体系中加入油菜的提取液, 测定吸光度。提取液对·OH的清除率随提取液的浓度升高而升高, 见图4。分析原因是生菜中含维生素C、维生素E、胡萝卜素和抗坏血酸。这些成分是清除自由基的有效成分。
2.5 结论
以上结果表明生菜、油菜、胡萝卜、青萝卜、柿子椒和红辣椒的乙醇提取液对自由基都有一定的清除作用。通过比较表明:红辣椒较柿子椒的清除自由基作用高但差异不显著, 胡萝卜较青萝卜的清除自由基作用高, 差异显著。生菜和油菜都有清除自由基的作用。因此, 如果我们在日常的饮食生活中有针对性的选择蔬菜, 同样可以很好地清除自由基, 达到预防疾病和保健驻颜得的目的。
参考文献
[1]郑荣梁, 黄中洋.自由基医学与农学基础[M].北京:高等教育出版社, 施普林格出版社, 2001.
[2]赵保路.氧自由基与天然抗氧化剂[M].北京:科学出版社, 2001.
[3]陆瑞利, 胡丰林, 丁晓娟, 等.黄山栾树叶中具有清除自由基活性物质的分离和制备[M].安徽农业大学学报, 2002 (04) .
[4]丁利军, 钟金玲.几种水果蔬菜对羟自由基清除作用的研究.广州食品工业科技, 2002 (04) .
淫羊藿的自由基清除与抗氧化活性 篇5
1 材料与仪器
1.1 植物材料
本文中淫羊藿(E.brevicornum Maxim)购买自山西大同市。经作者鉴定为淫羊藿(E.brevicornum Maxim)。标本保留于中国药科大学天然药物化学教研室。
1.2 试剂与仪器
1.2.1 试剂
2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基(DPPH),吐温20,β-胡萝卜素,亚油酸均购值Sigma公司;氯仿,正己烷,乙酸乙酯,甲醇和无水乙醇上述试剂均购于南化分析纯;蒸馏水。
1.2.2 仪器
Perkin Elmer Lambda 40 UV/VIS紫外分光光度计,恒温水浴锅,旋转蒸发仪(布氏)。
2 方法与结果
2.1 提取物的制备
样品200 g以95%乙醇提取,用减压蒸馏的方法除去乙醇得浸膏30 g。之后用甲醇水溶解(甲醇:水=1∶9),依次用正己烷,氯仿,乙酸乙酯萃取,获得不同部位浸膏。
2.2 DPPH抗自由基活性
DPPH是一种稳定自由基,在有机溶剂中呈现紫色,在517nm附近有强吸收。加入抗氧化剂后,一部分自由基被清除,使吸收减弱。所以自由基清除活性可通过DPPH实验评价。参照Wang等人所用方法[2,3],首先,将所得不同部位浸膏用甲醇配制为1 mg/ml;0.5 mg/ml;0.25 mg/ml;0.1 mg/ml;0.05 mg/ml;0.025 mg/ml;0.01 mg/ml;0.005 mg/ml样品。每毫升样品分别加DPPH自由基1 ml(1.0×10-4M)摇匀,置于避光处30 min。以未加DPPH甲醇为空白校正,以未加样品的DPPH溶剂为空白对照,以抗坏血酸为阳性对照,分别测517 nm处紫外吸收度。吸收度的减少反应抗自由基活性。每组实验平行进行三次。DPPH试验中淫羊藿自由基清除活性见图1。
2.3 β-胡萝卜素漂白体系实验
β-胡萝卜素漂白体系实验抗氧化活性参照Conforti等的方法[3,5]。在1 ml(0.2 mg/ml)的β-胡萝卜素氯仿溶液中加入0.02 ml亚油酸和0.2 ml吐温20。旋转蒸发至氯仿完全挥干后加100 ml水超声溶解。分别取5 ml超声后乳状液加入装有不同浓度0.2 ml样品的试管。以相同浓度丙基没食子酸做阳性对照。以5 ml乳状液加入0.2 ml甲醇为空白对照。以5 ml未加β-胡萝卜素乳状液加入0.2 ml甲醇为空白校正。混摇均匀后置于45℃水浴锅中。1 h内每隔30 min于470 nm处测一次紫外吸收度(t=0,t=30 min,t=60 min)。每组实验平行三次。β-胡萝卜素漂白体系中淫凌晨藿抗氧化活性,抗氧化活性(AA)用以下方程计算:
(A0和A0o为开始时(t=0 min)样品/阳性对照和空白对照的紫外吸收度;At和Ato为30 min和60 min的样品/阳性对照和空白对照的紫外吸收度)
3 讨论
以上淫羊藿不同部位抗氧化与抗自由基活性实验研究显示,乙酸乙酯提取部分在DPPH自由基清除体系和β-胡萝卜素漂白体系中活性最强,但低于对照组。因为其为天然产物,所以有进一步研究价值。这也说明淫羊藿乙酸乙酯提取部位含有较多抗氧化成分,可为日后淫羊藿抗氧化提取物在药品领域的开发提供依据,而且在提取部位的使用上起到指导作用。
参考文献
[1]中国药典委员会.中国药典(一部).化学工业出版社,2005:229.
[2]Wang M,Li J,Rangarajan M,et al.Antioxidative phenolic com-pounds from sage(Salvia officinalis).Journal Agricaltural Food Chemistry,1998,46(12):4869-4873.
[3]Conforti F,Marrelli M,Statti G,et al.Antioxidant and cytotoxic ac-tivities of methanolic extract and fractions from senecio gibbosus subsp.gibbosus(GUSS)DC.Natural Product Research,2006,20(9):805-812.
[4]Locatelli M,Gindro,R,Travaglia F,et al.Study of the DPPH-scav-enging activity:Development of a free software for the correct in-terpretation of data.Food Chemistry,2009,114,(3):889-897.
活性氧清除物质 篇6
1 实验材料与方法
1.1 实验材料
原料:大蒜 (鲜) 购自张掖南关菜市场
试剂:亚硝酸钠甲基紫柠檬三钠盐酸水杨酸硫酸亚铁双氧水均为分析纯及以上, 实验用水为二次蒸馏水。
1.2 仪器
WFJ2100分光光度计, 上海尤尼柯仪器有限公司;LD4-2A型台式离心机, 北京医疗器械厂;数显电子恒温水浴锅, 北京医疗器械厂;FA1004电子天平, 上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂;组织捣碎机。
1.3 实验方法
1.3.1 标准曲线的建立
用文献[2]的方法测定亚硝酸根含量, 准确量取0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0, 4.5 ml的5mg/LNa NO2于9个25ml容量瓶中, 各加入5mlp H=2的柠檬酸三钠-盐酸缓冲液, 1.5ml5×10-4mol/L的甲基紫, 定容后静置10分钟, 于560nm处测吸光度。用最小二乘法得△A与亚硝酸钠浓度的回归方程为:
1.3.2 样品处理
取鲜大蒜10g经组织捣碎机捣碎, 加水100ml在45℃浸提10min.过滤, 渣弃去, 离心, 得上清液备用。
1.3.3·NO2清除率的测定
取1.5ml甲基紫, 10ml p H=2的缓冲液, 定容于25ml容量瓶中, 摇匀, 静置10min, 在560nm处测定其吸光度为A1。
取1.00ml上清夜, 4.00ml5mg/LNa NO2溶液室温下反应10min, 10ml p H=2的缓冲液, 加1.5ml甲基紫, 定容于25ml容量瓶中, 摇匀, 静置10min, 在560nm处测定其吸光度为A2。
取4.00ml 5mg/LNa NO2溶液, 10.0ml p H=2的缓冲液, 加1.5ml甲基紫, 定容于25ml容量瓶中, 摇匀, 静置10min, 在560nm处测定其吸光度为A3。
·NO2清除率= (A1-A3) - (A1-A2) / (A1-A3) ×100%
1.3.4 对·OH自由基的清除作用[3,4,5]
在25ml容量瓶中分别加入2mmol/LFe SO4溶液5ml, 6mmol/L H2O2溶液5ml混匀, 用6mmol/L水杨酸钠定容, 在36℃的水浴锅中反应15min冷却后, 在510nm处测定吸光度A1;在上述体系中加入一定量提取液在36℃的水浴锅中, 恒温反应15min在510nm处测其吸光度为A2; (同时做试样空白, A2为扣除试样空白后的吸光值)
清除率= (A1-A2) /A1×100%
2 结果与讨论
2.1 大蒜对·NO2最佳清除条件试验
2.1.1 浸提温度的确定
取鲜大蒜10g经组织捣碎机捣碎的大蒜分别加水100ml, 在不同温度下浸提10min.过滤, 离心, 得上清液。按1.3.3测定方法, 测得结果见表1:
由表1数据可知, 随温度升高, 清除率增加, 45℃的浸提液清除率最好;继续增大浸提温度, 清除率反而下降。
2.1.2 反应时间的确定
样品处理按1.3.2。按1.3.3测定方法, 在室温下不同反应时间测得结果见表2:
由表2可得, 反应时间达25min是即可达最佳。
2.1.3 试样用量的确定:
取鲜大蒜10g经组织捣碎机捣碎的大蒜分别加水100ml, 在45℃下浸提10min.过滤, 离心, 得上清液。按1.3.3测定方法, 取不同用量上请液测得清除率见表3:
表3可得, 试样用量为4ml是清除率最佳, 即试样浓度为0.016g/ml清除率即可达最佳。
2.1.4 Vc对·NO2的清除率
准确量取一定体积0.2%的Vc于容量瓶中, 加入5ug/ml的亚硝酸钠4ml, 静置10分钟, 再加入5ml PH=2的柠檬酸三钠-盐酸缓冲液, 1.5ml5 10~4mol/L的甲基紫, 定容后静置10分钟, 于560nm处测吸光度.结果见表4:
表4得, 抗坏血酸用量为4ml时清除率很高, 即抗坏血酸浓度达清除率最大。
2.2 对·OH自由基的清除作用
2.2.1 大蒜对·OH自由基的清除作用
在Fenlon体系中加入一定浓度的提取液在36℃的水浴锅中, 恒温反应15min在510nm处测其吸光度, 结果见表5:
表5可知:用试样用量为5ml时, 清除率最大, 即试样浓度为0.02g/ml时清除率最大。
2.2.2 抗坏血酸对·OH自由基的清除作用
在Fenlon体系中加入一定量0.2%的VC在36℃-37℃恒温水浴反应15分钟, 510处测吸光度, 结果如下:
表6可知:抗坏血酸用量为4ml时, 清除率达100%, 即抗坏血酸浓度达0.032g/ml时清除率最大。
3 结束语
(1) 大蒜对·NO2有一定的清除能力, 0.8ug/ml·NO2的清除率达98.3%需要大约0.5g的大蒜。
(2) 大蒜对·NO2的最佳清除条件为料液比为1:1045℃水浴10min, 浓度在0.016g/ml时, 室温反应20~25min, 清除率可达100%。
(3) 大蒜提取液对·OH也有很强的清除作用;0.1g的大蒜提取液对·OH的清除率与0.032g/ml的抗坏血酸一样达100%。
参考文献
[1]钱明赛.蔬果中的抗氧化物质[J] (.台) 食品工业, 1998, 30 (8) :21.
[2]王亚林, 高锦章.甲基紫用作光度法测定亚硝酸根[J].分析化学, 1998, 26 (11) :13841387.
[3]贾长虹, 常丽新, 赵京, 李月.月季果中黄酮的提取及其对自由基清除作用的研究[J].食品工业科技, 2010, 31 (1) :168170.
[4]林敏, 安红钢, 白俊杰, 李丽, 闫宇翎.苦苣菜提取液对亚硝基及.OH清除活性的研究[J].中国野生植物资源, 2008, 27 (8) :5354.
大豆中的生物活性物质 篇7
大豆的营养成分非常丰富, 其蛋白质含量高达40%, 含油20%, 除此之外还含有大豆异黄酮、大豆低聚糖、大豆皂苷、大豆磷脂等保健功能成份, 另含有钙、磷、铁和维生素E、B1、B2等人体必需的营养物质, 可以增强体质和机体的抗病能力, 具有预防和治疗人类的心脑血管疾病、癌症、糖尿病和延年益寿、降压降脂、益智健脑及减肥的功效, 还有预防老年耳聋等保健作用[1]。
大豆中营养素以外的保健功能成分统称“非营养素植物化学物”。最具代表性的是异黄酮, 它可存在于用水提取的分离大豆蛋白中。因其结构与雌激素相似, 所以也称“植物雌激素”, 有降血脂、抗动脉硬化、抗肿瘤、抗骨质疏松等保健作用。
一、大豆异黄酮
大豆异黄酮是大豆中含有黄铜类化合物的总称。大豆异黄酮是以大豆为原料提取制成的植物性雌激素, 结构与雌激素相似, 具有类雌激素和抗雌激素双重作用[2], 能够减轻女性更年期综合征症状、延迟女性细胞衰老、使皮肤保持弹性、养颜、减少骨丢失, 促进骨生成、降血脂等。临床已经证实大豆异黄酮能够降低血液中的胆固醇, 提高雌激素、防止机体衰老、调整机体内分泌平衡、提高机体的免疫力。大豆异黄酮具有很强的抗氧化作用, 能够有效地消除人体内的过氧化自由基[3]。大豆异黄酮在预防心脑血管疾病、延缓衰老方面有良好的作用, 也是目前用于替代治疗更年期综合症和中老年骨质疏松症所用雌激素的最理想的药物。大豆异黄酮能预防、治疗乳腺癌、乳腺癌、直肠癌、结肠癌等, 具有抗癌功效。另外, 大豆异黄酮不仅可抑制骨骼再吸收, 促进骨骼健康, 而且对防治更年期妇女骨质疏松症具有显著作用, 美国最新研究表明, 在6个月内每天摄56~90毫克异黄酮, 可以使骨密度明显增加, 防止骨质疏松症的发生。
二、大豆皂苷
大豆皂苷 (soyasaponins) , 又称大豆皂甙或皂素, 是由大豆及其它豆类植物种子中提取出来的, 由低聚糖及齐墩果烯三萜缩合形成的一类化合物[4]。豆类植物种子中大豆皂苷的含量一般在0.62%~6.16%之间[5,6]。人们对大豆的认识和利用有很久远的历史, 但对大豆皂苷的研究起步较晚, 直到20世纪90年代中期DDMP大豆皂苷的发现, 才引起人们的重视。大豆皂甙是具有重要研究价值和广泛应用价值的皂甙之一。大豆皂苷是一种具有药疗食养双重效果的天然生物活性物质, 具有对人体有益的多种功能和良好药理作用。除用作药物外, 大豆皂苷还可以作为高级化妆品、食品添加剂和表面活性剂应用于化学工业, 揭示了大豆皂苷广阔的市场开发潜力和社会应用价值[7]。目前已应用于食品、药品、化妆品等领域, 具有广阔的市场前景。
国内外的研究已经证明, 大豆皂苷具有抗脂质氧化、抗自由基、增强免疫调节、抗肿瘤、抗病毒等多种生理功能。大豆皂苷在降低血液中胆固醇、甘油三脂、抗氧化及抑制肿瘤细胞生长、提高机体免疫力、抗病毒 (包括艾滋病毒) 方面的研究都获得可喜的成果[8]。科学家经过深入研究发现, 大豆皂甙具有显著降低血及肝中过氧脂质及心肌中脂褐素的作用。并有抑制脑中单胺氧化酶及皮肤中羟脯氨酸含量的作用 (防止老年斑形成的因素) , 具有延缓细胞衰老过程、延长生命的作用, 大豆皂苷可延长细胞寿命的原因是可使细胞增殖力下降速度减慢。按照自由基学说分析, 大豆皂苷在清除过氧化物方面的作用, 完全可作为是一种抗衰老作用较好的活性因子。大豆皂苷通过增加SOD的含量, 清除自由基, 具有抗氧化和降低过氧化脂质的作用。大豆皂甙可以抑制血栓的形成、血清中脂类的氧化和过氧化脂质生成, 可在肠道中诱使大豆纤维素吸附胆汁酸排出体外, 损失的胆汁酸再经肝脏中的胆固醇转变来相抵, 降低人体血浆中胆固醇的含量, 减少血液凝固。大豆皂甙能促进脂肪代谢, 减少过氧化脂质的产生, 可以预防动脉硬化, 防止血小板凝聚形成血栓等。因此, 经常食用大豆可使患心血管疾病的危险性降低18%~28%。大豆皂苷具有抑制肿瘤细胞生长的作用, 其抑制癌机理可能是:直接对毒细胞作用, 免疫调节作用, 破坏肿瘤细胞膜的结构或抑制DNA的合成。大豆皂苷可抑制血小板减少和凝血酶引起的血栓纤维蛋白形成, 具有抗血栓作用。大豆皂苷还对人类艾滋病病毒的感染有一定的抑制作用, 同时还表现出对被病毒感染的细胞有很强的保护作用。
三、植物固醇
动物性食物中含胆固醇, 植物性食物中含植物固醇。大豆中所含的植物固醇抑制了人体对胆固醇的吸收, 减少了胆血脂、高血压等疾病。人体摄人胆固醇后分解的主要产物是胆汁酸, 有害健康。植物固醇进入人体后, 在肠道同胆固醇竞争中能较多地被肠道吸收, 从而使人体胆固醇降低, 这样不仅可抑制结肠癌, 而且对防治心脏病也有好处。
四、蛋白酶抑制素
豆类、谷类与马铃薯这些农作物中, 含有一种被称为“蛋白酶抑制素”的物质, 如果当饲料被动物生吃, 会影响蛋白质消化。美国纽约大学一位学者通过实验, 发现大豆中的蛋白酶抑制素可以抑制皮肤癌、膀胱癌, 对乳腺癌的抑制效果更明显, 可达50%。另有报告指出, 蛋白酶抑制素对结肠癌、肺癌、胰腺癌、口腔癌亦能发挥抑制功效。大豆中含有一种抑制胰酶的物质, 对糖尿病有治疗作用。
参考文献
[1]刘志泉.食品营养学[M].北京:中国轻工业出版社, 1993.
[2]闫祥华.大豆异黄酮抗癌作用机理研究[J].生理学进展, 1997.28 (4) 362-364.
[3]蔡秋声.大豆异黄酮生理功能及其开发利用[J].粮食与油脂, 1999, 2:31-35.
[4]王储炎, 艾启俊, 阚建全.大豆皂苷的研究进展[J].粮食与食品工业, 2005, 12 (6) :31-35.
[5]沈玥.大豆皂苷的研究进展[J].食品研究与开发, 2006, 27 (10) :164-167.
[6]田晶, 翟滨, 等.两种大豆皂甙提取方法的比较[J].大连轻工业学院学报, 2002, 21 (3) :172-174.
[7]吴素萍, 田立强.大豆皂苷的生理功能及其提取纯化的研究现状[J].大豆科学, 2008, 27 (5) :883-889.
星虫动物门活性物质及药理作用研究 篇8
自20世纪80年代末以来,由于市场价格的刺激,方格星虫遭到掠夺式采掘,再加上海洋污染的加剧,其资源量急速下降,因此开始发展人工养殖。但由于方格星虫在稚虫时期遇到的虫害比较多,难以提高养殖的生产效益,从而浪费了许多生 产资源。近年来,星虫人工养殖已开始受到越来越多的重视,技术日益成熟,我国学者在这方面积累了一定的经验,也开始逐渐取得一定的成果[4]。
据《中华本草》记载,星虫肉质脆嫩,鲜美甘甜,东南沿海居民称其为“海洋冬虫夏草”,并将其作为一种海味珍品 和高级补 品[5,6]。现代研究 结果显示,星虫含有丰富的氨基酸、微量元素等营养物质以及一些特殊的活性成分,具有多种药理活性。自古星虫就有多种药食用法,比如晒干、水煎单用;去内脏,以好酒浸,具有活血强身之功效;去内脏,置于老鸭头部,加料、蒸烂、食之,达到治疗病后体弱的作用[2]。依据现代药理研究,海洋星虫多糖具有抗辐射、增强学习和记忆能力、抗疲劳、调节免疫功能、抗氧化及延缓衰老等作用,目前研发出的星虫多糖胶囊有开发成新药的前景[7]。有研究将星虫与麦冬、枸杞等数味中药组方,欲开发出一种具有滋补肝肾功效,能提高机体免疫能力,维护机体正常生理状态等作用的新药[8]。此外,一种从星虫中提取的纤溶酶被发现具有抑制血小板聚集、抗血液凝固、增强纤维蛋白溶解活性、清除氧自由基等作用,同时具备临床上治疗血栓性疾病的药物的多种作用。作为对抗世界第一大疾病的有效成分,开发成新药用于临床指日可待[9]。
由于星虫广泛分布的特点,国外在20世纪70、80年代时曾将星虫作为海域污染评估的重要指标,由于星虫在我国周边海域也有大量分布,近几年,国内学者也开始将星虫作为有机物污染及重金属等污染的指示生物。星虫对环境变化作出敏感反应具有重大的生态意义,将是未来相关领域研究的重点。
1 星虫动物门的由来、生物学特征及分类
星虫是一种古老的物种,大概出现于古生代中期甚至寒武纪[10]。星虫动物门一直以来被认为与环节动物门和软体动物门最为接近,但是又没有证据显示它们 相互接近。 所以自从 星虫被发 现到Linnaeus[11]于1766年提出方格星虫属 (Sipunculus)的概念,Sedgwick[12]于1898年第一次把星虫归入门,并命名为“星虫动物门(Sipunculoidea)”,直至Stephen[13]于1964年首次给 星虫动物 门取名为“Sipuncula”,对于星虫的分类和系统进化上的亲缘关系一直被争议了四个多世纪。
星虫属于海洋底栖动物,从极地海域到热带海区,从潮间带到深海区域均有分布,主要穴居于沙或泥质底、碎石丛中及岩石的裂缝、火山熔岩的空洞中[14]。星虫一般呈蠕虫状,不分节,体长从几厘米到十几厘米不等[15]。身体分为翻吻和躯干。翻吻的顶端开口,口周围环生带有纤毛的凹状触手或圆浅裂片,呈星状,故此而称为“星虫”;躯干部粗大,是虫体腔的主要部位所在,躯干部的尾端常呈盘状凹入形成尾器,其在幼体发育阶段具有附着和固定身体在基质上的作用[16]。体腔内部主要有螺旋环绕的肠从肛门至前端,束状翻吻收缩肌沿翻吻颈内插入体腔[15]。
星虫作为一个世界性的物种,全世界约有238种[15],采用Gibbs和Cutler于1987年提出的分类法将其分为2个纲、4个目、6个科和17个属[17],我国身处分布最 为集中的印度-西太平洋地区,约有39种[18],分隶于2纲,4目,6科,12属。
2 活性成分
2.1 基本营养活性成分
2.1.1 蛋白质及氨基酸类
星虫含有丰富的蛋白质、多肽及氨基酸,其含有的18种氨基酸占干物质的49%,其中8种必需氨基酸的含量 占33.14%,鲜味氨基 酸的含量 占47.51%,不但营养价值高,口味也很鲜美,是一种上等的保健食品[19]。
通过研究裸体方格星虫(Sipunculus nudus)的幼虫、稚虫及成虫三个不同生长阶段,发现其体内的粗蛋白质量分数随着生长发育的进行逐渐升高,体内的氨基酸的质量分数在一定的阶段内随着个体的生长发育也呈显著升高的趋势,3个生长阶段中甘氨酸(Gly)和组氨酸(His)的含量在幼虫到稚虫阶段均显著增加,成虫阶段Gly含量显著降低,His含量则保持相对恒定。3个生长阶段成虫必需氨基酸(EAA)/总氨基酸(TAA)最高,为32.61%;稚虫呈味氨基酸(DAA)/总氨基酸(TAA)最高,为58.76%[20]。
通过比较研究分别采自海南海口、浙江温岭及广西北海三个不同产地的裸体方格星虫体内蛋白质含量,发现三个 样品的蛋 白质含量 为646~799mg·g-1,氨基酸含量为571.2~729.2 mg·g-1,其中浙江温岭两者的含量均最低,广西北海的最高,表明裸体方格星虫的营养成分与其产地有密切关系[21]。
将革囊星虫属 (Phascolosoma)与方格星 虫属(Sipunculus)进行比较,结果发现前者鲜样中粗蛋白(15.5%)高于后者(11.2%),革囊星虫的氨基酸总量、必需氨基酸总量及鲜味氨基酸总量均高于方格星虫,必需氨基酸组成符合FAO/WHO对于膳食蛋白质营养评价理想模式。革囊星虫氨基酸种类组成合理,营养价值等同方格星虫[22]。
2.1.2 脂肪酸类和多糖
可口革囊星虫 (Phascolosoma esculenta)的脂肪主要由27种脂肪酸 组成,其中,饱和脂肪 酸(SFA)6种,不饱和脂肪酸(UFA)21种,在不饱和脂肪酸中有15种高度不饱和脂肪酸(HUFA),它们具有抗血栓、防止血小板聚集、舒张血管、降低胆固醇和甘油三酯、增高高密度蛋白胆固醇和降低低密度蛋白胆固醇的作用[23]。27种脂肪酸中十二碳二烯酸的含量最高。国际上公认的具有高度生物活性的ω-3系列高度不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的含量分别为3.9% 和0.12%[24]。另有报道,星虫高度不饱和脂肪酸中花生四烯酸(AA)含量最高,是人体前列腺素合成的重要前体,有广泛的生理作用[25]。
经胰蛋白酶水解、Sevage法除蛋白质及乙醇沉淀法从裸体方格星虫体壁和体腔液中分别得到体壁多糖(SWP)和体腔液多糖(SBP)。分别经紫外检测和Feling试剂检测,其不含蛋白和游离葡萄糖。经凝胶渗透色谱分析,SWP和SBP均为单一组分,相对分子质量分别为284 528和198 212。红外光谱分析表明,两种多糖结构相似,均含有以α-糖苷键或β-糖苷键连接的葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖,且SBP含有乙酰氨基,都是典型的酸性粘多糖[26]。
2.1.3 无机元素和维生素
星虫富含对人 体有益的 微量元素,营养元素Mg、Ca、Fe、Zn、Se等含量丰富[27]。通过对可口革囊星虫和裸体方格星虫中的矿物元素进行分析,发现可口革囊星虫和裸体方格星虫均含有K、Mg、Ca、Na、Fe、Mn、Zn、Cu、P、Se 10种矿物元素,且鲜样中可口革囊星虫矿物元素含量均高于裸体方格星虫,而按干重计可口革囊星虫K、Na、P、Se含量及钙磷比均低于裸体方格星虫。
方格星虫中还含有一定量的水溶性和脂溶性维生素,采用荧光分光光度法测定B族后发现VB2的含量较高,VB1和VB6含量属于中等水平;采用高效液相法测定VA和VE后发现两者含量极微。由于VB2是我国膳食结 构中比较 容易缺乏 的营养素 之一,而方格星虫中VB2含量丰富,因而具有较高的营养价值和较大的开发价值[28]。
2.2 自身生理活性成分
2.2.1 蚯蚓血红蛋白
蚯蚓血红蛋白是星虫体内一种重要的生理活性成分,是一种具有可逆性载氧功能的天然金属蛋白,由于其活性部位不含卟啉环,是非血红素蛋白动物等少数原 始海洋无 脊椎动物 中的一类 呼吸蛋白[29,30]。四条α-螺旋多肽链折叠形成一个楔形空腔,双核Fe配合物被多肽中特定的氨基酸以一定方式配位而束缚于此空腔中,由此形成的亚单位聚合形成单体、二聚体、三聚体、四聚体、八聚体等聚合物。大部分则以八聚体的形式存在于动物体内的红细胞中[31],分子量为108 000[32]。该蛋白质的等电点在pH 5.8~5.9[33],当pH小于5或大于9时,蛋白质慢慢失活并游离出铁离子。蚯蚓激酶中每2个铁原子结合1个氧原子,并且氰铁化物在大气和真空状态下都可以将氧从蚯蚓血红蛋白的溶液中释放出来[34]。星虫体壁收缩能力的肌肉和血管中还存在一种蚯蚓血红蛋白[35]。它是单体蛋白,尽管它和八聚体的氧合反应速率、脱氧反应速率、平衡常数有时略有不同,氧合蚯蚓血红蛋白较八聚体更稳定[31],但是总体上来讲,其结构及功能与八聚体亚单位相似。其后,分别有研究测定了星虫中蚯蚓血红蛋白的分子量[36],三、四维结构[32]和氨基酸序列[37]。
2.2.2 磷酸单酯酶
酸性磷酸酶和碱性磷酸酶是一类广泛存在于各种生物体内的活性酶,能够去除核苷酸类、蛋白质类、生物碱类的磷酸基团,起到将生物大分子去磷酸化的作用[38]。磷酸单酯酶主要参与磷酸酯的水解,与机体的消化代谢密切相关,具有离子分泌、机体防御和免疫调节等重要的生理作用,它们的活性在一定程度上能反映整个机体免疫机能的状态[39]。星虫的体壁、消化道、肾管均分布有该类酶,但星虫体腔液中的磷酸单酯酶活性较高[40]。星虫的一种红色小泡中含有3种磷酸酶类,分别在pH 3.8、6.0和9.2时活性最强,在体腔液中则以第三种含量最多[41]。这种磷酸酶对β-甘油磷酸盐的活性高于对α-甘油磷酸盐,与脊椎动物的碱性磷酸酶相反[42]。
2.2.3 章鱼碱脱氢酶
对于缺氧耐受的海洋无脊椎动物来说,章鱼碱脱氢酶能够在水底缺氧环境中对保持其体内ATP量稳定发挥重要作用,其广泛分布于贝类中,并且在功能上可替换乳酸脱氢酶[43]。包括章鱼碱脱氢酶在内的多种代谢酶如磷酸化酶、乳酸脱氢酶、磷酸果糖激酶等的最大活性与海洋无脊椎动物肌肉的碳水化合物的利用有密切的关系[44]。有报道采用硫酸铵从星虫肌肉中提取、分离纯化出这种酶,进一步研究发现对于含吡啶辅酶的脱氢酶而言,该种酶的分子量较小[45]。
2.2.4 胍基化合物
胍基是蛋白质中的精氨酸残基,在生理条件下完全质子化,因而它存在于许多酶的活性中心,对识别键合生物阴 离子和催 化生化反 应发挥重 要作用[46]。近年从海洋生物中分离得到的胍类化合物被证明具有超强的抗癌和抗病毒活性,这种物质在星虫的内脏中广泛分布,并且浓度很高。有研究从星虫的肌肉中经提取纯化得到脒基牛磺酸[47],除此以外,在星虫Phascolosoma vulgare和Phascolosoma elongatum体内也找到两种新的取代胍基化合物,分别是Hypo脒基牛磺酸和磷酸Hypo脒基牛磺酸[41]。
2.3 药理活性成分
2.3.1 纤维蛋白溶解酶
采用多步色谱分离技术相结合,分别从裸体方格星虫和可口革囊星虫中分离纯化得到两种纤溶酶。通过测定其相对分子质量分别为33.25×103和29.8×103。利用5种具有专一性的抑制剂作为其纤溶活性的抑制剂,确定前者属于丝氨酸蛋白酶,后者兼有可能 属于丝氨 酸蛋白酶 和金属酶[48,49]。药理活性测定结果表明,这两种纤溶酶不仅具有直接降解纤维蛋白的作用,还有激活纤溶酶原的激酶作用,对其潜在价值的开发和利用,将为治疗血栓疾病开拓新的思路。
2.3.2 血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽
将可口革囊星虫蛋白进行酶解并优化后对酶解物进行分离,并对ACE抑制活性较强的组分进行稳定性实验及抗消化实验,结果显示,ACE抑制率稍微下降,但仍具有较高的ACE抑制活性,在很大程度上可以 抵抗消化 酶的水解 作用。 对星虫中ACE抑制肽的进一步研究将有可能使其成为抗高血压药中肾素-血管紧张素抑制剂大类中的一种天然ACE抑制剂,具有很高的临床应用研究价值[50]。
2.3.3 胶原蛋白
采用一定的提取纯化方法,可以从星虫中提取得到一定量的胶原蛋白,经分析后发现主要为Ⅰ型酸溶性胶原蛋 白,分子类型 为 [α1(Ⅰ )]2α2(Ⅰ)型[51],还从星虫中提取的酸溶性胶原蛋白中发现了其他类型的胶原蛋白,但其具体类型还有待进一步实验验证[52]。胶原蛋白是一种功能性蛋白,近年来的研究表明,胶原蛋白具有促进皮肤代谢、促进骨和肌肉的形成、增强免疫、保护心脑血管等多项生理功能[53~56],被广泛地应用于医药、化妆品和食品等各个领域,成为近年来的一大研究热点[57]。
2.3.4 星虫抗氧化多肽
采用木瓜蛋白酶对方格星虫多肽进行酶解并对酶解条件进行优化,得到星虫抗氧化多肽[58]。由高效体积排阻色谱(HPSEC)法测得方格星虫多肽的分子量为5 868,测得其羟 自由基清 除率为95.42%[59]。这类安全性更高的天然抗氧化剂的发现将会对未来人类面临的衰老问题及其他疾病发挥重要作用。
2.4 其他成分
有研究从光裸星虫中分别分离得到胆甾-5烯-3β-醇、胆甾-5烯-7酮-3β-醇、9,12,15-十八碳三 烯酸、甘油亚麻酸一酯、7-烯-3β,5α,6β-胆甾三醇和正十六烷酸6种化合物[60]。胆甾醇、硬脂酸、环(丙氨酸-脯氨酸)、脱氧胸苷4个化合物[61]。但均未有对其药理活性研究的相关报道。
3 药理作用
3.1 抗自由基、抗氧化作用
星虫中的多种组分均具有抗自由基、抗氧化作用,且有理由说明星虫所具有的多种药理作用也与其相关。有研究采用可口革囊星虫多肽探讨其在大鼠运动模型中的抗氧化功效,结果表明,可口革囊星虫多肽可提高 大鼠血液 红细胞 (RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞比容(HCT)水平,同时提高血清超氧化物岐化酶 (SOD)、谷胱甘肽 过氧化物 酶 (GSHPx)活性,降低血清一氧化氮限速酶(NOS)活性,降低肝组织过氧化脂质(LPO)含量,因此星虫多肽有抗组织缺血、抗氧化等功效,是一种有效的抗氧化剂[62]。另有报道研究了星虫多糖对羟自由基清除率和超氧自由基抑制率的影响,两者的作用均与浓度呈正相关[63]。
3.2 抗疲劳作用
为探讨方格星虫多糖对小鼠的抗疲劳作用,以小鼠负重游泳建立模型,结果与对照组相比,星虫多糖各剂量组明显延长了小鼠的游泳时间,相应剂量给药小鼠血清尿 素氮 (BUN)明显降低,乳酸脱氢 酶(LDH)显著升高,肝糖原、肌糖原也呈上升趋势,低剂量用药能显著提高SOD活性和降低MDA含量,说明星虫多糖对小鼠有明显耐缺氧、抗疲劳效果[64]。
3.3 对学习和记忆的影响
有研究采用注射东莨菪碱获得小鼠学习记忆障碍模型来研究星 虫多糖对 学习记忆 的影响,通过Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力。结果显示,星虫多糖能显著缩短逃避潜伏期和找到平台的时间,显著增加穿越原平台次数;能显著提高血清SOD活力,降低血清MDA含量,说明方格星虫多糖能提高机体清除自由基、抗氧化能力,改善记忆障碍模型鼠的学习记忆能力[65]。
3.4 抗辐射、噪音、化学有害物等有害环境因素
有研究对Beagle犬采用2Gy的急性剂量γ 辐射来观察星虫多糖提取物的抗辐射保护作用,结果显示,给药组Beagle犬血液中白细胞(WBC)、中性粒细胞(NE)、血小板(PLT)及血红蛋白(Hb)持续减少、周期缩短、血像改善明显;骨髓中造血干细胞改善明显;一氧化氮(NO)水平显著降低,SOD活性显著上升[63]。有人采用比γ 辐射大5~20倍的中子辐射损伤大鼠模型来研究方格星虫多糖对其保护作用,结果在照射第35d,星虫多糖中剂量组外周血血小板显著 回升,在照射第38d,各剂量组 血清(GSH-Px)活力显著上升,血清丙二醛(MDA)含量显著下降,肝脏中胆 固醇7-α 羟化酶含 量显著回升[66]。还有研究将SD大鼠暴露于CO(230ppm)和苯(20ppm)混合气体后采用60Co放射源进行γ放射和252Cf放射源进行中子放射,与此同时进行噪声暴露造成电离辐射、一氧化碳、苯和噪声复合损伤大鼠模型来证明方格星虫多糖对有害环境因素复合损伤大鼠的保护作用[67],结果表明,星虫多糖提取物可以显著改善由γ、中子、化学有害物、噪声以及电离等辐射而损害的机体的外周血像、抗氧化能力,保护机体的免疫系统、造血系统。
3.5 对免疫功能的调节作用
方格星虫多糖能明显提高小鼠的细胞免疫和体液免疫功能,促进小鼠碳廓清速率和小鼠肝脏与脾脏对异物的吞噬 功能,提高小鼠 肺特异性 免疫功能[5]。也有研究表明,方格星虫中含量丰富的蛋白质、氨基酸类成分以及微量元素可能与机体的免疫力增强有关。海洋星虫提取物可显著增加小鼠胸腺指数和脾指数。提高脾脏T淋巴细胞的转化率,促进机体的免疫功能,这可能与其含有较高含量人体必需微量元素及牛磺酸、精氨酸和多种人体必需氨基酸有关[68],其作用机理尚需进一步探索。
3.6 抗乙型肝炎病毒的研究
HBV感染是一项全球性公共健康问题,我国感染率高达10%~20%。目前用于治疗HBV的干扰素和核苷类似物存在诸多缺点。有研究采用重庆麻鸭静脉注射HBV-DNA阳性鸭血清建立模型研究星虫多糖提取物对乙型肝炎病毒的抑制作用,结果显示,星虫多糖不同剂量对HBV-DNA的复制均有不同程度抑制,且大、中剂量组与阳性药阿昔洛韦组作用相似,但小剂量组反跳现象明显,说明星虫多糖在体内有一定的抑制HBV复制的作用[69]。
也有以HepG2.2.15细胞为研 究模型进 行体外细胞实验研究星虫多糖的抗乙肝病毒活性,结果发现,方格星虫多糖表现出剂量与时间依赖的抑制作用。方格星虫多糖对HBV-DNA抑制的半数抑制浓度为49.48mg·L-1,对HepG2.2.15细胞半数细胞毒性浓度为250mg·L-1,治疗指数为5.06,认为方格星虫多糖对HepG2.2.15细胞中的HBV呈剂量与时间依赖的抑制作用,具有较好的应用前景[70]。
3.7 延缓衰老作用
在方格星虫抗氧化及增强免疫的基础上,又有报道利用大鼠衰老模型和果蝇生存实验探讨了它的延缓衰老作用,结果显示,不同剂量的方格星虫提取物给药30d后,大鼠血清MDA含量显著降低,血清SOD活性显著增强;方格星虫提取物能显著延长雌雄Oregon K野生型黑腹果蝇的平均寿命,显著延长雄果蝇的最高寿命,表明方格星虫提取物具有明显的延缓衰老作用[71]。
3.8 溶解血栓活性
随着对星虫研究的不断深入,星虫具有的溶栓活性逐渐成为关注的热点。有研究通过对家兔体外血浆血小板聚集和凝血功能的影响、对大鼠动-静脉血流旁路血栓形成的影响、对DPPH自由基的清除作用及对纤维蛋白的溶解作用,综合评价星虫提取物对血栓形成的影响。结果发现,星虫提取物能明显抑制ADP诱导的家兔体外血小板6min聚集率和最大聚集率,明显延长家兔凝血酶原时间(PT)、活化部分凝 血活酶时 间 (APTT)和凝血酶 时间(TT),明显抑制大鼠动静脉旁路血栓形成,减轻血栓湿重和干重以及具有清除OH自由基和溶解纤维蛋白的作用[9]。也有研究采用盐析、离子交换、凝胶过滤等方法从星虫中分离纯化得到星虫纤溶酶。并采用纤维蛋白平板法检测星虫纤溶酶纤溶活性及激酶活性,发现在富含纤维蛋白原的不加热平板上和不含纤维酶原的加热平板上,星虫纤溶酶均有活性,而且具有一些激酶的活性[72]。以上研究表明,星虫兼有抗血小板聚集、溶解血栓和抗凝血三种目前临床上常见的治疗血栓药物的作用机理。
3.9 对肾小球病变的影响及防治肾间质纤维化的作用
有报道采用5/6肾切除大鼠来研究方格星虫粗提物对肾小球病变和肾间质纤维化的防治作用,结果随着时间 的延长,各组大鼠24 h的尿蛋白(UPQ)、血肌酐(Scr)均逐渐升高,同时治疗组大鼠的肾小球系膜增生程度、纤维连接蛋白(FN)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达均较模型组下降,表明方格星虫粗提物可减轻5/6肾切除大鼠肾小球系膜增生程度,其机制可能与下调FN、α-SMA的表达有关[73];治疗组大鼠肾小管-间质损伤指数及高剂量组肾小管间质FN表达较模型组下降,表明星虫多糖粗提物可能有改善肾小管-间质纤维化的作用,其机制可能是通过抑制肾小管-间质α-SMA、FN的表达,减少细胞外基质(ECM)成分在肾间质内过分沉积,从而减轻肾间质纤维化的进程[74]。
3.10 抗菌活性
有研究报道了星虫多糖的抗菌活性,并比较了水提和碱提方法的抗菌活性,结果显示,水提粗多糖对副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)不敏感,对枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)中度敏感,对其他细菌均为低敏感;碱提粗多 糖对大肠 杆菌 (Escherichia coli)、金黄色葡 萄球菌 (Staphylococcus aures)和鳗弧菌(Vibrio anguillarum)低敏感,对白葡萄球菌(Staphylococcus cremoris)和副溶血弧菌中度敏感,对枯草芽胞杆菌和藤黄八叠球菌(Sarcina lutea)高度敏感,碱提粗多糖的抗菌活性较水提粗多糖强[75],其结果也为星虫多糖的抗菌活性研究提供了思路。
4 讨 论
关于星虫,国外学者对其繁殖生物学、生理生态学、系统发生及形态学等的研究较多,而国内学者对星虫的研究重点则主要集中于星虫的生殖、人工繁殖和污染物监测等方面。
关于化学成分方面,国外的研究主要涉及到星虫体内一些有活性作用的蛋白和酶类,并且也多是研究其对自身生长的生理作用;国内则主要集中于星虫的营养成分,比如多糖类、蛋白质和多肽类、脂肪酸、维生素等,这些高含量的营养成分也说明星虫确是一种具有高营养价值的保健食品,值得进一步开发利用。但对于星虫中的一些小分子酶和多肽的研究则并不深入,且多是活性跟踪筛选而得到的成分,这类成分往往也是复杂的多组分成分,即使被证明具有较强的活性作用,对于体外合成和大批量制备必将受到限制。
一系列关于星虫的药理作用的研究报道了星虫具有多种药理活性,最终发现抗疲劳作用、对学习和记忆增强的作用、抗辐射和有害环境的作用、对免疫功能的调节作用、抗病毒和延缓衰老的作用等均与抗氧化功能的提高相关。并且其作用组分大多为多糖,实际上多糖是一种粗提物,其中含有大量的其他活性成分,所以对于星虫所具有的多种活性均归功于多糖这一说法值得进一步商榷。
对星虫的活性成分和药理作用的研究应该着眼于药理作用与活性成分相联系,对粗提物进一步纯化深入研究,探讨小分子物质的具体药理作用;对活性跟踪筛选得到的多组分成分,应该对其深入研究,弄清各组分在其中所起到的作用以及其中的相互关系。药理作用方面还应该把握星虫的清除自由基、抗氧化功能,深入研究机制作用。同时,对星虫能够对现在的人类所面临的包括心脑血管疾病、肾纤维化和肾小球病变以及HBV等各种流行病的治疗作用的治疗机理应该深入研究,争取开发出新药,从而真正解决人类几大类健康问题。
摘要：本文简要介绍了星虫动物门的由来、分类和星虫的一般生理生态活性特征,并对星虫动物门的资源利用现状进行了分析,肯定了我国在星虫人工养殖、新药开发和利用其作为污染物监测方面所取得的成就。重点介绍了星虫动物门已经发现的营养活性物质、自身生理活性物质和药理活性物质以及星虫所具有的药理活性并对其未来研究进行了展望,比较了国内外学者对星虫研究的区别,为更好地保护和研究星虫提出了一些思路。