活性酵母

活性酵母（精选八篇）

活性酵母 篇1

1 材料

1.1 试验时间与地点

试验于2014年8月1日—2014年12月20日在通辽市三元养殖有限公司进行。

1.2 试验材料

1.2.1 试验动物

选择分娩时间在15 d以内的60头健康妊娠母猪及其所产仔猪, 由通辽市三元养殖有限公司提供。

1.2.2 活性干酵母

酵母活细胞数≥200亿个/g, 由安琪酵母股份有限公司提供。

2 方法

2.1 试验设计

将分娩时间在15 d以内的60头妊娠母猪根据妊娠时间随机分为3组, 即试验1组、试验2组和对照组, 每组2个重复, 每个重复10头, 饲养至142天哺乳期结束, 仔猪在第28天断奶。对照组饲喂基础日粮, 试验1组和试验2组在基础日粮中分别添加500 g/t和800 g/t的活性干酵母。试验1组初生仔猪206头, 试验2组初生仔猪207头, 对照组初生仔猪204头。试验结束后试验1组断奶仔猪192头, 试验2组断奶仔猪196头, 对照组断奶仔猪189头。

2.2 日粮组成及营养水平 (见表1)

2.3 饲养管理

妊娠前期 (1~21 d) 日喂料量1.8~2.1 kg/头;妊娠中期 (22~86 d) 日喂料量2.1~2.4 kg/头;妊娠后期 (87~107 d) 日喂料量2.5~3.5 kg/头;产前1周减料, 日喂料量2.3~2.4 kg/头。妊娠期日喂2次, 上午、下午各1次。分娩当天不喂料, 产后3~5 d日喂料量逐渐达到5.0 kg/头以上。哺乳期日喂4次, 分别为6:00、11:00、18:00、22:00, 自由饮水并保证饮水清洁。

2.4 数据记录及统计

观察妊娠、哺乳母猪粪便情况, 每天记录便秘母猪数量、哺乳母猪采食量, 测定仔猪初生重及断奶重。

2.5 数据处理

采用Excel 2007进行数据整理, SPSS 13.0单因素方差分析程序 (ANOVA) 进行方差分析, 综合Duncan’s法多重比较, P<0.05表示差异显著, P<0.01表示差异极显著, 数据以“平均数±标准差”表示。

3 结果 (见表2、表3) 与分析

由表2可知:妊娠母猪、哺乳母猪平均每天便秘数量试验1组、试验2组与对照组相比均极显著降低 (P<0.01) ;试验2组与试验1组相比显著降低 (P<0.05) 。

由表3可知:试验1组、试验2组哺乳母猪每天采食量均较对照组显著提高 (P<0.05) ;而试验2组与试验1组相比, 哺乳母猪采食量略有提高, 差异不显著 (P>0.05) 。仔猪平均初生重试验1组、试验2组、对照组之间差异不显著 (P>0.05) 。仔猪平均断奶重试验1组、试验2组与对照组相比均显著提高 (P<0.05) ;试验2组仔猪平均断奶重与试验1组相比, 显著提高 (P<0.05) 。

头

注:同行数据肩标大写字母不同表示差异极显著 (P<0.01) , 小写字母不同表示差异显著 (P<0.05) 。

kg·头-1

注:同行数据肩标小写字母不同表示差异显著 (P<0.05) , 相同或无肩标表示差异不显著 (P>0.05) 。

4 讨论与结论

本试验结果显示, 在母猪妊娠期和哺乳期日粮中添加不同比例的活性干酵母, 均极显著降低妊娠母猪和哺乳母猪的便秘数量 (P<0.01) , 显著提高哺乳母猪采食量和仔猪断奶重 (P<0.05) 。王学东等[1]试验表明, 泌乳母猪日粮中添加活性干酵母1 kg/t能够提高母猪的采食量, 较对照组平均日采食量提高了900 g/d;同时, 仔猪的平均日增重和断奶重也显著增加, 分别较对照组提高了46.3 g/d和1.13 kg。

酵母菌为兼性厌氧菌, 能通过调节母猪消化道菌群平衡有效地缓解母猪便秘。一方面, 酵母菌在生长繁殖过程中产生大量的B族维生素, 促进消化液分泌, 维持和促进肠道蠕动, 有利于排便;另一方面, 酵母菌能够促进后肠发酵, 使肠蠕动加快, 有利于粪便排出。同时, 由于解决了母猪便秘问题, 哺乳母猪采食量增加, 提高了母猪的泌乳力, 从而使仔猪的断奶重增加。

在妊娠母猪和哺乳母猪日粮中添加活性干酵母能有效缓解母猪便秘, 降低便秘数量, 同时提高哺乳母猪采食量, 提高仔猪的断奶重, 且在基础日粮中添加活性干酵母800 g/t组的效果优于添加500 g/t组。

参考文献

活性酵母 篇2

酵母融合菌-活性污泥曝气处理含镍废水研究

利用酵母融合菌RJ与活性污泥曝气处理含镍废水.实验结果表明,融合菌对废水中的镍具有很强的富集性能,投加10g/L菌体,处理20 mg/L含镍废水,去除率可达70.10%;同时投加6g/L活性污泥,去除率上升到80.73%,出水固液分离效果得到改善;且融合菌的`pH值适用范围较广,当pH=3～9时,去除率均在75%以上;溶解氧是影响曝气生物吸附的重要因素,在缺氧或富氧环境下,生物吸附会受到抑制,DO为2.5～4.5 mg/L时吸附效果较好;融合菌-活性污泥曝气处理不同浓度Ni2+的吸附等温线符合Freundlich模型,相关系数为0.997 5.

作 者：何宝燕 尹华 彭辉 叶锦韶 卢显妍 杨峰 张娜 HE Bao-yan YIN Hua PENG Hui YE Jin-shao LU Xian-yan YANG Feng ZHANG Na 作者单位：暨南大学环境工程系,广州,510632刊 名：安全与环境学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF SAFETY AND ENVIRONMENT年，卷(期)：5(4)分类号：X703.1关键词：环境工程 酵母融合菌 活性污泥 镍 曝气 生物吸附

活性酵母 篇3

关键词：桑树；东莨菪素；假丝酵母菌；生长速率法

中图分类号：S888.2 文献标识码：A文章编号：1674-0432（2011）-11-0075-2

基金项目：教育部新教师基金项目(20090182120018)、国家现代农业(蚕桑)产业技术体系项目(nycytx-27-gw504)。

0 引言

桑属植物临床应用广泛，药理活性多样，含多种生物活性成分[1]。香豆素类化合物为其中之一，具有抗炎、抗菌、扩张血管、抗凝血、抗血栓、退热、镇静等广泛的药理活性[2]。东莨菪素又名东莨菪内酯，属于简单香豆素类化合物，其化学名为6-羟基-7-甲氧基香豆素，是桑树体内主要的香豆素类化合物[3、4]。

1992年Kashman等[4]首次分离出的香豆素具有抑制HIV逆转录酶活性，同时能够保护人类T淋巴细胞不受攻击。1993年，Ptail等在藤黄科植物Calophyllum inophyllum中发现inophyllums B和inophyHums P，可抑制HIV逆转录酶，IC50分别为38μmol/L和130μmol/L，这两个化合物抑制MOLT-4细胞中HIV复制的IC50分别为1.4μmol/L和1.6μmol/L，治疗指数(TI)分别为39和16。Spino等[6]从藤黄科植物的种子中得到具有强烈抗HIV逆转录酶作用的香豆素化合物costatolide和inophyllums[4-6]。

多种植物在受到微生物侵染或激发子诱导时能够合成香豆素类化合物，因此，在农业上香豆素类化合物东莨菪苷经常作为植保素。早在1960年就发现土豆被感染后会有东莨菪苷的积累。1970s发现被TMV侵染的烟草中也有东莨菪苷的合成和积累。东莨菪内酯2mM能抑制荷兰榆树病菌芽孢的发芽，剂量达4mM时能不可逆地抑制菌丝体的生长[7,8]。沈泳坚等人[9]报道，东莨菪素可以用于剖宫产，不仅对母亲有镇痛作用，而且对婴儿安全有利。张维芳等人[10]证明，东莨菪素在佐治婴幼儿肺炎方面，具有加快血液循环，催进肺部啰音消失等优点，而且其副作用小，安全度大。郭宁等人[11]报道，东莨菪素联合卡马西平治疗难治性癫痫，有一定效果且安全性好。目前，东莨菪素有很好的医药价值，随着对东莨菪素更深入研究，其将得到更广阔的开发和应用。[12]

本实验利用生长速率法，以假丝酵母菌（Candida albicans）为供试菌种，对桑品种嘉陵20号的桑枝中分离提取的东莨菪素的体外抗真菌活性进行了初步检测，这将可能为东莨菪素的进一步研究及其在农业中的利用奠定一定的理论实验基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

东莨菪素（scopoletin），从嘉陵20号桑枝中提取。

1.2 试验方法

1.2.1 药液的准备 配制4、2、1、0.5、0.25 mg/ml五个浓度梯度的东莨菪素溶液。配制0.25mg/ml的酮康唑溶液作为阳性对照，灭菌水为阴性对照。

1.2.2 菌种的准备 将假丝酵母菌接种于液体PDA培养基中27℃150r/min振荡培养24h，取菌液并稀释至105-106cfu/ml，取100μl，均匀涂布在固体PDA培养基上，27℃培养7天，获得菌落。

1.2.3 体外抗菌实验 将东莨菪素溶液与培养基混合，使培养基中东莨菪素的终浓度分别是1000、500、250、125和62.5μg/ml，制成平板，阴性和阳性对照分别用无菌水与62.5μg/ml的氟康唑替代东莨菪素，每个处理设两个重复。无菌条件下，在1.2.2中的菌落中取长势良好且均匀的直径6mm菌饼，将其倒贴在含药培养基中心。27 ℃下培养。每间隔24h，便用十字交叉法精确测量菌落直径三次，取平均值，按照抑制率公式：

抑制率=（阴性对照组-给药组）/阴性对照组×100%计算抑制率

运用SPSS11.5统计软件[13]对数据进行Duncan、LSD多重比较检验和方差分析，标记字母法表示不同浓度的东莨菪素抑菌活性的差异显著性。

1.2.4 MIC的测定 假丝酵母用改良PDA液体培养基培养至对数生长期，然后用相应培养基稀释至A620为0.001；在预先经灭菌处理的96孔板中每个孔加入90μL菌液。东莨菪素用最高浓度为1000μg/ml的溶液倍比稀释，最低浓度为3.91μg/ml，以纯水作为阴性对照，将各浓度的东莨菪素溶液加入96孔板中，10μL/孔，每个处理设置3个重复。并以经灭菌处理的锡箔纸覆盖96孔板。将96孔板在振荡器上轻柔振荡使样品和菌液充分混合，置于摇床(转速为 200 r/min) 30℃培养48h。采用酶标仪测定每个孔的OD值以衡量东莨菪素对假丝酵母生长的抑制作用，东莨菪素对假丝酵母的最低抑制浓度 (MIC) 用[a]–[b]表示，其中[a]代表假丝酵母继续生长的最大浓度，而[b]代表假丝酵母完全被杀灭的最低浓度。

2 结果与分析

每间隔24h，精确测量菌落直径，测三次，取平均值，计算东莨菪素体外对假丝酵母的抑制率随时间的变化，其结果如表1所示。

从表1中数据得知东莨菪素对假丝酵母的抑制率作用随着浓度的增加而增大，其抑制率低于氟康唑阳性对照组，最小抑制浓度在0μg/ml-62.5μg/ml之间且在48-72h左右达到最佳抑制效果。

针对时间和浓度两个变量因素，运用SPSS11.5统计软件对表1中的数据进行方差分析，结果如表2所示。校正模型的平方和与自由度是“时间”、“浓度”两个主效应值之和。F=113.685，P=0.000<0.001，表明该统计分析模型有统计学意义。

同时，时间和浓度的F值分别为13.064、194.182时，P值皆为0，差异极显著，表明药物浓度和培养时间对假丝酵母的抑制率均存在极显著性影响，因此，运用Duncan法，在0.05和0.01两个显著性水平上分别对培养时间和浓度两个因素进行多重比较，采用标记字母法对其进行差异性标示，结果如表3、表4。

从表3中可以看出，48h和72h之间、72h和96h之间无显著差异，但是48h和96h之间存在显著差异，这说明在24h的间隔内，其抗菌效果无差异性，而在间隔48h后才存在显著性差异，因此，在保证抗菌效果的前提下，合适的使用时间在48h-72h为宜。

表4显示出，除了500和250μg/ml之间不存在显著差异外，其他浓度相互之间均存在极显著差异，这说明较高浓度和较低浓度时，浓度的变化都能引起抑制性的显著性变化，因此，根据需要可以选择较高浓度（大于500μg/ml）或者较低浓度（小于250μg/ml）的某一浓度，一般选择使用浓度在500μg/ml-1000μg/ml为宜。

2.2 东莨菪素抗假丝酵母的MIC测定

MIC是描述药物作用的一个重要因子，可为药物的进一步研究及应用提供参考，经过酶标仪测定，东莨菪素抗假丝酵母的MIC=7.81。这与上边的十字交叉法测定平板抑菌圈的方法所得到的数据精确得多。

3 讨论

目前国内外关于东莨菪素抗菌试验的研究比较少，而关于香豆素类化合物的研究较多，其中大多数是关于中草药的研究。郑罡等[14]研究了茶树油对白假丝酵母菌抑菌效果，结果表明，茶树油在较低浓度条件下具有明显抑制和杀灭作用，茶树油有干扰菌体蛋白质、胆固醇及甘油三脂的合成，从而产生抗菌作用。孙文霞等人[15]研究发现, 血水草生物碱（Eomecon chionantha Alkaloids,ECA）及其血根碱（Sanguinarine,SAN）对假丝酵母菌也具有一定的抑制效果，但效果比本文所得实验结果差。李英华等人[16]研究发现，蜂胶也对假丝酵母菌也具有一定的抑制效果，但效果比本文所得实验结果差。马廉兰等人[17]探讨了6种中草药提取物对白色念珠菌的抑制作用，发现其MIC最低的可达5.0，但未见对该中草药中的抗菌生物活性物质进行研究的后续报道。

据查阅文献，目前还没有桑树东莨菪素抗菌的研究，本试验运用生长速率测定了桑树东莨菪素对假丝酵母的体外抑菌效果，为桑树东莨菪素的进一步开发利用奠定一定的试验理论基础。

在本试验中的东莨菪素溶液浓度梯度较大，所得结果只是一个大致范围。若要测得更精确的结果，则需在所得试验结果范围内利用酶标仪进行定量分析，确定其抗菌的临界值、IC50、ID50。

在本试验中，只初步测定了东莨菪素对假丝酵母的体外抗菌活性，结果表明东莨菪素对假丝酵母菌有一定的抑制作用，为深入探讨东莨菪素的抗菌活性，还需利用其他更多的病菌对其抗菌活性进行测定。此外，香豆素还具有平喘、降压、抗凝血、抗HIV的生物活性，还可进一步验证东莨菪素在这些方面的活性。

参考文献

[1] 潘一乐,刘利,张林,等.我国桑树种质资源及育种研究.广东蚕业,2006,40(1):22-22.

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[3] 刘芳,兰支利,邓芳,等.香豆素及其衍生物研究进展.精细化工中间体,2006,36(4):7-11.

[4] Kashman Y,et al.The Calanolides,a novel HIV inhibitory class of coumarin derivatives from the tropical rainforest tree Calophylum laniqeruun.J.Med.Chem,1992,35(15):27-35.

[5] 徐淑永,曾和平,魏传晚等.生物活性香豆素的研究进展.合成化学,2004,12(4):340-347.

[6] Spino C,Dodier M,Sotheeswaran S.Anti-HIV coumarins from Calophyllum seed oil[J].Bioorg Med Chen Lett,1998,8(24):3475-3478.

[7] 朱述钧,王春梅,沈寿国,等.香豆素类化合物在农业上的应用.江西农业学报,2006,18(2):97-100.

[8] 李颖仪,蔡先东.香豆素的药理研究进展.中药材,2005,27(3):218-222.

[9] 沈泳坚,章利,蒋淼,等.吗啡和东莨菪碱用于剖宫产术后硬膜外镇痛对新生儿的影响.实用疼痛学杂志,2007,3(2).

[10] 张维芳,王芳仪.东莨菪碱佐治婴幼儿肺炎疗效观察.临床和实验医学杂志,2007,6(2):107.

[11] 郭宁，蔡雅，文明.卡马西平联合东莨菪碱治疗难治性癫痫的研究.现代中西医结合杂志, 2007,16(6):733-734.

[12] 张紫佳,张勉,朱恩圆,等.丁公藤类药材及其混用品中总东莨菪内酯的含量测定.中国药学杂志,2004,39(12):56-58.

[13] 杜荣骞.生物统计学[M].北京:高等教育出版社,2003:139.

[14] 郑罡,曹煜,魏羽佳.茶树油对白假丝酵母菌抑菌效果.中国消毒学杂志,2007, 24(5):834-837.

[15] 孙文霞,袁仕善,黄琼瑶等.血水草生物碱及其血根碱抑菌作用的研究[J].实用预防医学,2010,9:1864-1866.

[16] 李英华,朱威,胡福良.蜂胶的生物学活性及其在医学上的应用前景(下).蜜蜂杂志,2004,03:72.

[17] 马廉兰,钟有添.六种中草药对深部感染真菌的体外抑菌效果[J].赣南医学院学报,2001,1:1-3.

作者简介：夏玉玲（1975-），女，重庆潼南人，成都中医药大学峨眉学院讲师，研究方向：生物化学，微生物学。

活性酵母 篇4

1 对瘤胃发育初期的影响

在犊牛出生时, 瘤胃并无细菌存在, 但很快被复杂而大量的微生物菌群占据。实际上, 犊牛母体和其他动物分泌的唾液、粪便以及被污染的植物提供给瘤胃发育所需的接种体, 这对犊牛瘤胃的发育至关重要。在小型或是放牧式的奶牛场, 犊牛往往能够因为与母体长时间接触, 瘤胃得到良好的发育;而在大型或集约化饲养管理的奶牛场, 由于犊牛单独在犊牛舍成长, 不接触瘤胃并不能得到快速发育。除此之外, 犊牛瘤胃往往没有完成微生物菌群的接种及经历断奶后饲喂固体饲料的过渡期[1]。这种情况的发生往往会导致瘤胃菌体成分的不平衡发展, 进而导致消化紊乱以及增加微生物传染病的风险。最近的试验证实, 给断奶犊牛饲喂干酵母能够增加谷物饲料的摄取量以及提高日增重, 添加干酵母的试验组犊牛腹泻率显著低于对照组[2]。这表明, 含有啤酒酵母的活性干酵母对于瘤胃早期发育菌群的建立以及机体健康和生产性能具有积极的影响。

2 活性干酵母对瘤胃酸中毒的缓解作用

随着动物进食大量的可发酵碳水化合物, 会引起进食后pH值显著下降。微生物的快速发酵会导致瘤胃挥发性脂肪酸浓度的增加, 这直接导致了瘤胃pH值的降低。随着pH值的下降, 生产乳酸的细菌品种如牛链球菌会超出乳酸利用菌的数量, 从而引起瘤胃内乳酸的积累。如果瘤胃pH值持续降低, 瘤胃乳酸杆菌会慢慢取代牛链球菌, 随着乳酸的大量积累引起代谢性瘤胃酸中毒。

最近的一些研究表明, 活性干酵母对于改善瘤胃pH值的稳定性有很好的效果。Chaucheyras-Durand F等[3]在瘘管羊体内进行的试验结果表明, 添加活性干酵母的高精饲料日粮试验组中, 瘤胃内pH值能够稳定在瘤胃正常发酵pH值范围内, 同时试验组瘤胃纤维素酶活性高于对照组纤维素酶活性, 乳酸浓度较低, 瘤胃pH值能够稳定在较高的水平[4]。除此之外, 添加活性干酵母能够增加乳酸代谢菌 (埃氏巨球形菌和反刍动物月形单胞菌) 数量以及增强菌群代谢能力, 同时, 添加活性酵母菌能够提供给乳酸代谢菌足够的氨基酸、肽、维生素和有机酸。这表明活性酵母菌有降低瘤胃pH值和减少乳酸积累的潜力。

3 活性干酵母对纤维消化的影响

反刍动物日粮纤维素与半纤维素水平大约占日粮干物质的30%, 那些植物细胞壁通常结构复杂、不可溶解, 所以造成纤维素与半纤维素降解率较低。另外, 瘤胃主要降解酶不能够水解富含纤维素与半纤维素的植物细胞。有些情况下, 活性酵母菌能够影响纤维降解微生物的数量和活性。体外试验结果表明, 瘤胃内厌氧真菌游离芽孢的数量会随着活性酵母菌的添加而显著增长, 酵母对纤维降解菌有同样的刺激作用。Mosoni利用荧光定量PCR测定添加活性酵母的高精料水平日粮绵羊瘤胃纤维降解菌数量时发现, 3种主要降解菌 (产琥珀酸丝状杆菌、白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌) 相对于总16SrDNA的数量有不同程度的增加, 并推断酵母有增强纤维菌活性和数量的潜力。但是, 酵母这种增强瘤胃纤维菌数量的原因并不确定。但酵母能够提高干物质采食量可能是由于酵母缩短了纤维在瘤胃中的消化时间。活性酵母改善瘤胃纤维消化率以及增强瘤胃纤维菌数量的原因可能是酵母细胞有助于瘤胃排除多余氧气。实际上, 虽然瘤胃是一个严格的厌氧环境, 但随着进食、饮水, 反刍和唾液分泌, 绵羊瘤胃每天仍然会有超过16L的氧气进入, 因此排除多余氧气有利于瘤胃细菌的繁殖[3]。

4 活性干酵母对奶牛围产期及热应激的影响

活性干酵母对奶牛生产性能的改善作用往往被认为是它能够增加奶牛干物质采食量、提高中型洗涤纤维的消化率和纤维降解率以及减少瘤胃乳酸的积累。奶牛分娩所造成的干物质采食量下降的时期被认为是活性干酵母的最佳添加时期, WohltJE等对围产期荷斯坦奶牛添加活性干酵母的试验结果表明, 在奶牛产奶前30d和产奶后18周添加活性干酵母, 奶牛干物质采食量和牛奶产量显著高于对照组。但也有部分研究表明, 添加活性酵母并不影响牛奶产量和乳成分。有试验结果表明, 由于添加啤酒酵母能够增加纤维的消化率, 因此乳中乳脂含量也随之增加。

当围产期的奶牛置身于室温比较高的环境时, 通常干物质采食量和泌乳量会有不同程度的下降。Huber的试验证明, 日粮中添加活性酵母能够减少荷斯坦奶牛的热应激、直肠温度、呼吸率以及增强产奶量。最近的试验结果表明, 在夏季高温条件下, 对泌乳中期的奶牛添加酿酒酵母对干物质采食量没有影响, 但能改善产奶效率, 这也表明活性酵母能够减少奶牛热应激。

5 小结

活性酵母属于天然真菌类物质, 作为反刍动物饲料添加剂符合动物产品消费者的要求。活性干酵母所含营养物质如B族维生素以及微量元素对于纤维降解菌特别是真菌有积极的影响。同时, 活性干酵母能够有效减少乳酸代谢菌的增殖, 对缓解瘤胃酸中毒具有良好的效果, 可以作为天然瘤胃pH值缓冲剂来使用。但到目前为止, 国内外对活性酵母营养价值的评定及营养学机制的研究还极其有限, 未来需要对活性酵母的营养机理作进一步深入的研究, 以优化活性酵母在反刍动物生产中的添加水平和添加时期。

参考文献

[1]FONTY G, SENAUD J, JOUANY J P, et al.Establishment of themicroflora and anaerobic fungi in the rumen of lambs[J].J Gen Mi-crobiol, 1987, 133:1835-1843.

[2]GALVAO K N, SANTOS J E, COSCIONI A, et al.Effect of feed-ing live yeast products to calves with failure of passive transfer onperformance and patterns of antibiotic resistance in fecalEscherichiacoli[J].Reprod Nutr Dev, 2005, 45:427-440.

[3]CHAUCHEYRAS-DURAND F, FONTY G.Effects and modes ofaction of live yeasts in the rumen[J].Biologia (Bratislava) , 2006, 61 (6) :741-750.

活性酵母 篇5

重组阿拉伯糖苷酶在毕赤酵母中的分泌表达及其活性分析

假密环菌是一种果树腐病菌,具有较强的分解代谢纤维素的能力.根据已克隆出的阿拉伯糖苷酶基因序列(Accession Number AJ620046)设计引物从假密环菌的mRNA中克隆出阿拉伯糖苷酶的ORF片段,构建重组质粒pPIC9-AF,与组氨酸标签融合,电转化毕赤酵母菌GS115并进行诱导表达.所得到的.重组阿拉伯糖苷酶在30～35℃时有较高的酶活,最适反应活性pH值在6.0～8.0之间,而在pH4.O～8.0范围内酶活基本保持在80%以上,比大多已报道的阿拉伯糖苷酶最适pH范围宽.对于高效表达重组阿拉伯糖苷酶以及对其进一步的酶学性质研究提供了良好的基础.

作 者：姚冬生 谭慧媚 黄辉 刘大岭 谢春芳 YAO Dong-sheng TAN Hui-mei HUANG Hui LIU Da-ling XIE Chun-fang 作者单位：暨南大学,生命科学与技术学院,生物技术室,广州,510632刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY年，卷(期)：26(4)分类号：Q814关键词：假密环菌 阿拉伯糖苷酶 毕赤酵母 分泌表达

活性酵母 篇6

1 材料及仪器

酵母:安琪葡萄酒高活性干酵母 (发酵活性强, 耗糖快, 迅速进入主发酵;后发酵期酵母死亡率低, 发酵彻底;生长繁殖迅速, 杂菌污染少) ;Y1;Y2;Y3 (南充华风酒厂提供)

新鲜桑果:采摘于四川省蚕研所果桑园

辅料:白砂糖、柠檬酸

试剂:亚硫酸、壳聚糖均为分析纯

仪器:酸度计, 榨汁机、发酵瓶、酒度计、电子天平、手持测糖仪、温度计、分光光度计、高速离心机

2 实验方法

2.1 桑果酒的酿制流程

桑果→清洗→榨汁→原汁→成分调整→主发酵→换桶→后发酵→澄清→过滤→陈酿→桑果酒2.2 操作要点

1) 桑椹原汁制备。选用完全成熟, 颜色紫红, 无霉烂, 以保证成品的风味和色泽。对桑果进行轻微破碎, 破碎后的果实立即送入压榨取汁, 经过滤后得到桑果原汁。

2) 活性干酵母活化。称取4种不同的活性干酵母菌种0.1 kg, 分别用2 L 40 ℃含量5%的糖水, 搅拌溶解, 15～30 min后冷却至28～30 ℃备用。

安琪有葡萄酒活性干酵母特性见表1。[1]

3) 成分调整。①糖度调整:桑椹原汁的糖含量偏低, 为7.6%, 为了得到一定酒精含量的桑椹酒, 需要进行糖度调整, 糖度的调整需要以糖与酒精的转化率为计算依据, 采用添加浓缩汁或加糖调整, 用白糖将桑椹汁糖度调为20%;②酸度调整:为了保证桑椹酒的风味和发酵过程的顺利进行, 需要对桑椹汁的酸度进行调整。本研究用柠檬酸将酸含量调整为6.57 g/L, pH值为3.4～3.6;③SO2的添加:添加偏重亚硫酸钾 (0.1 g/kg) , 使果汁中含有质量75 mg/kg的SO2, 达到加入SO2的目的。

4) 主发酵。将4种活化好的酵母菌液, 按照原汁的0.1%的接种量, 接入调配好的桑果原汁种, 在25～30 ℃的温度下进行主发酵。

5) 换桶、后发酵。主发酵完成后, 原酒中有少量的糖分, 出酒后遇到空气使酵母菌重新复活, 要装入容器中进行后发酵, 后发酵期为一个月左右, 温度以20 ℃为宜。当后发酵结束时, 糖分降到0.1%左右。

6) 澄清、过滤。发酵好的桑果酒是浑浊的, 应加入澄清剂进行澄清, 使果酒中悬浮的胶体、蛋白质生成絮状沉淀。用1%的柠檬酸将壳聚糖配成5%的溶液, 加热煮沸至全部溶解, 向原酒种加入0.03%的壳聚糖, 搅拌均匀后静置24 h取其上清液。

7) 陈酿。陈酿目的在于使原酒进行缓慢的氧化还原作用, 促使醇酸酯化, 使酒的口味变得更柔和, 风味更趋完善。成熟期间, 温度控制在12～15 ℃, 根据酒底沉淀状况倒灌1～2次。

3 试验结果

通过四种活性干酵母的酿酒试验, 成品原酒的品评和理化指标如表2。[2]

4 小结与讨论

1) 利用安琪葡萄酒高活性干酵母发酵桑果原汁生产而成的桑果酒, 质量稳定、酒色紫红;酒体澄清透亮、无浑浊状;果香纯正、口感柔顺;相对其他活性干酵母发酵桑果酒有一定的优势。

2) 经过多次的倒桶陈酿发现, 未发酵完全的酵母易造成果酒出现二次沉淀, 并伴随有酵母味。下一步研究将筛选出更适澄清剂, 解决桑果酒易出现二次沉淀的现象。

3) 最后成品酒实际酒精度与理论产酒精度有一定的差距, 主要是发酵不完全, 导致糖不能完全发酵。下一步试验将系统研究不同环境条件下对发酵的影响, 确定最佳发酵环境, 使原料能充分发酵, 解决酒精度低的问题。

参考文献

[1]李志军, 刘小民, 刘代武, 等.安琪超级酿酒干酵母在酒精浓醪发酵中的应用[J].酿酒科技, 2005 (9) :101-106.

活性酵母 篇7

1 材料和方法

1.1 试剂与仪器

链脲佐菌素, 美国Sigma公司提供, 批号为S-0130;富铬酵母 (含铬量为1.00 mg/kg) , 由北京奥特奇生物制品有限公司提供, 批号为24500;盐酸二甲双胍片, 由北京市永康药业有限公司提供, 批号为05080178;生理盐水、柠檬酸钠、柠檬酸、苦味酸、乌拉坦、纯化水, 均为市售产品;己糖激酶 (HK) 试剂盒及苹果酸脱氢酶 (MDH) 试剂盒, 购自南京建成生物工程研究所。

TP-5000A电子天平 (分度值0.5 g, 湘仪天平仪器厂提供) 、GT-1640京都血糖仪 (SUPER GLUCOCARDⅡ) 及试纸 (日本ARKRAY. Inct 提供) 、可见-紫外分光光度计 (日本岛津公司生产) 、SHA-B-电热恒温水浴箱 (常州国华电器有限公司生产) 。

1.2 试验动物

雄性清洁级昆明小鼠70只[体重 (22.00±2.00) g], 河北省实验动物中心提供, 合格证编号为DK0503-0044。

1.3 方法

1.3.1 动物模型的建立

随机选取10只小鼠作为正常对照组, 常规饲料喂养;复制模型的60只小鼠禁食16 h后, 一次性腹腔注射链脲佐菌素150 mg/kg。注射之后各组小鼠正常进食、饮水。给药3 d后, 空腹尾静脉采血并用血糖仪测定小鼠血糖, 血糖值大于11.1 mmol/L的小鼠为试验所需的糖尿病模型[3]。

1.3.2 试验动物的分组与处理

将60只糖尿病模型小鼠按血糖值编号后随机分为5组, 每组12只, 分别为糖尿病对照组、二甲双胍阳性对照组、富铬酵母低剂量组、富铬酵母中剂量组和富铬酵母高剂量组。正常对照组和糖尿病对照组小鼠分别灌服生理盐水;阳性对照组小鼠灌服二甲双胍 (每天每10 g体重2.127 3 mg) ;富铬酵母组灌服富铬酵母水溶液, 其铬含量分别为高剂量组500 μg/ (kg·d) , 中剂量组250 μg/ (kg·d) , 低剂量组125 μg/ (kg·d) 。每周称重1次。

1.3.3 样本的采集与处理

在每周末的同一时间, 各组小鼠均空腹16 h, 第2天采尾静脉血, 用血糖仪测定血糖;4周试验结束后, 各组小鼠断头处死, 迅速剥离后腿股四头肌和肝脏组织, 称重后放入-70 ℃冰箱中待检。肌肉组织己糖激酶、肝脏组织苹果酸脱氢酶活性的测定参照试剂盒说明书。

1.4 数据处理

数据用undefined表示, 均数间采用LSD法进行多重比较。

2 结果

2.1 给药后小鼠体重的变化 (见表1)

注:数据肩标a表示与试验前比较差异显著 ( P<0.05) 。

由表1可以看出:正常对照组从给药第1周开始体重显著高于给药前 (P<0.05) , 阳性对照组 (二甲双胍组) 在给药第4周、富铬酵母中剂量组在给药第3, 4周体重显著高于给药前 (P<0.05) ;富铬酵母低剂量组和富铬酵母高剂量组小鼠的体重也稍高于糖尿病对照组 (P<0.05) , 但是没有统计学差异。

2.2 给药后小鼠血糖的变化 (见表2)

注:与给药前比较, 数据肩标a 表示差异显著 (P<0.05) , b表示差异极显著 (P<0.01) ;与糖尿病对照组比较, c表示差异极显著 (P<0.01) 。

由表2可以看出:试验前糖尿病对照组小鼠的血糖值明显高于正常对照组 (P<0.01) , 这说明造模成功;试验后糖尿病对照组小鼠的血糖值基本不变;试验后药物治疗组与糖尿病对照组相比较, 阳性对照组 (二甲双胍组) 、富铬酵母低剂量组和富铬酵母高剂量组小鼠血糖均极显著下降 (P<0.01) , 富铬酵母中剂量组小鼠虽然也有降低趋势, 但不具有统计学意义。

2.3 给药后小鼠酶活性的变化 (见表3)

由表3可以看出, 与糖尿病对照组相比, 日粮中添加中剂量富铬酵母[250 μg/ (kg·d) ]时己糖激酶、和苹果酸脱氢酶均呈差异极显著 (P<0.01) , 富铬酵母高剂量组[500 μg/ (kg·d) ]差异显著 (P<0.05) , 富铬酵母低剂量组[125 μg/ (kg·d) ]两种酶活性虽有上升趋势, 但无明显差异;西药对照组和富铬酵母组酶的活性均极显著低于正常组 (P<0.01) 。

注:与糖尿病对照组比较, 数据肩标a表示差异显著 (P<0.05) , b表示差异极显著 (P<0.01) ;与对照组比较, c表示差异显著 (P<0.05) , d表示差异极显著 (P<0.01) 。

3 讨论

铬 (Cr3+) 作为葡萄糖耐量因子的活性成分, 可以明显改善动物的糖代谢 [2,3]。有试验结果表明, 试验性糖尿病小鼠日粮中添加铬可以增加肝糖原含量[4], 提示铬通过增加糖尿病动物肝糖原合成, 使糖异生降低从而改善糖代谢。己糖激酶和苹果酸脱氢酶是线粒体标志酶, 是三羧酸循环的关键酶, 其活性的高低在糖分解过程中起着重要作用。

富铬酵母可以明显改善试验性糖尿病动物的血糖[5,6], 本试验利用廉价的富铬酵母作为有机铬的来源, 可以增加己糖激酶和苹果酸脱氢酶的活性, 表明有机铬改善糖尿病动物糖代谢的一条途径是通过激活三羧酸循环中的己糖激酶、苹果酸脱氢酶活性, 从而增加糖的利用;糖尿病小鼠日粮中添加250 μg/ (kg·d) 时这种作用最好。

需要说明的是, 在本试验中, 虽然试验性糖尿病小鼠日粮中添加一定剂量的富铬酵母可以增加己糖激酶和苹果酸脱氢酶的活性, 但是仍然不能达到正常小鼠的水平, 加之考虑其安全性, 所以笔者认为富铬酵母可以作为治疗糖尿病的辅助保健用品。

参考文献

[1]张秋燕, 刘秀萍, 赵燕燕, 等.柿叶提取物对链脲佐菌素糖尿病小鼠血糖血脂的影响[J].第三军医大学学报, 2005, 27 (14) :1449-1450.

[2]杜立红.糖尿病患者血液流变学及血脂指标变化的分析[J].浙江临床医学, 2005, 7 (9) :935.

[3]陈群力, 黄诚, 马灵筠, 等.益气养阴活血复方对糖尿病性肢端坏疽大鼠作用的实验研究[J].中华实用中西医杂志, 2004, 4 (17) :367-370.

[4]李正刚, 李俊艳, 刘安军.无机铬复合物对实验性糖尿病小鼠血糖和肝糖原水平的影响[J].微量元素与健康研究, 2003, 20 (5) :143-145.

[5]张敏, 李明, 费聿荣, 等.口服富铬啤酒酵母对链脲佐霉素诱导糖尿病大鼠的生物效应[J].中国科学院研究生院学报, 2007, 24 (2) :224-228.

活性酵母 篇8

尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus),是联合国粮农组织向世界各国推荐的养殖鱼类之一,2012年中国罗非鱼产量145×104t,居世界首位[8,9],而有关罗非鱼饲料中海洋红酵母的适宜添加量以及作用效果的研究尚未见报道。该实验通过在饲料中添加不同水平的海洋红酵母,研究其对罗非鱼幼鱼生长性能、消化酶活性以及相关免疫酶活性的影响,探讨罗非鱼幼鱼饲料中海洋红酵母的最适添加量,为海洋红酵母在罗非鱼幼鱼饲料中的应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验饲料

海洋红酵母由广州市欣海利生生物科技有限公司提供。海洋红酵母营养成分组成为:水分81.17%、粗蛋白9.27%、总糖4.2%、β-葡聚糖1.3%、β-胡萝卜素1.4 mg·kg-1、虾青素1.0 mg·kg-1和维生素E 172 mg·kg-1。

采用鱼粉、豆粕和花生粕为主要蛋白源,配制粗蛋白水平为31.2%的6组饲料(表1)。分别为对照组(不添加)、添加1 g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1的海洋红酵母组。所有原料粉碎过40目筛后混合均匀,制成直径为1.5mm和2.0 mm的沉性颗粒饲料(F-26(Ⅲ)型双螺旋杆挤条机),将饲料放置在空调房内抽干,置于-20℃冰箱中保存备用。

%

注:1.多维(g·kg-1):VD30.1;VE 80;VK315;烟酸121;核黄素22;VB610;VB110;VB1210;泛酸钙10;生物素0.06;叶酸0.82;肌醇450;微晶纤维素9 271.02;2.多矿(g·kg-1):Fe SO4·6H2O 85;Mg SO4·7H2O 500;Na H2PO44 000;Na Cl 1 740;Cu SO4·5H2O 3.4;Zn SO4·H2O 30;Co Cl2·6H2O 40;Mn SO4·H2O 7;沸石粉3 337.1Note:1.Vitamin premix(g·kg-1):VD30.1;VE 80;VK315;VB3121;VB222;VB610;VB110;VB1210;Calcium pantothenate 10;Biotin 0.06;Folic acid 0.82;Inositol 450;Cellulose 9 271.02;2.Mineral premix(g·kg-1):Fe SO4·6H2O 85;Mg SO4·7H2O 500;Na H2PO44 000;Na Cl 1 740;Cu SO4·5H2O 3.4;Zn SO4·H2O 30;Co Cl2·6H2O 40;MnSO4·H2O 7;Zeolite 3 337.1

1.2 实验对象及实验管理

实验在中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地室内养殖系统进行。选择当年鱼种进行实验,经2周暂养,商品料驯化后,随机选择体质健康、平均体质量为(5.22±0.01)g的尼罗罗非鱼作为实验对象,在500 L自动充气玻璃纤维桶淡水养殖系统中进行养殖实验。实验分为6个处理,每个处理3个重复,每个重复20尾鱼。每天投喂2次,投喂时间分别为08:30和17:30,投饲量以体质量的2%~5%为准,以实时摄食量适当调节。温度25.7~30.2℃,溶氧5 g·L-1以上,流水速度4 m L·s-1。正式养殖56 d后结束,称质量、测量体长和采样等。

1.3 采样与处理

饲养实验结束后禁食24 h,每桶随机取5尾鱼放置在-20℃冰箱中保存用于体成分测定。每桶随机选取3尾鱼,每组9尾罗非鱼,用丁香酚(1∶10 000)(上海医疗器械股份有限公司)麻醉[10],依次给每尾鱼称质量和量体长。然后立即剖开腹部,剥离出肝脏并称质量。同时采取胃、肠道和肝脏,-80℃冻存备用。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 生长和形体指标

分别按下式计算增重率(weight gain,WG)、特定生长率(specific growth rate,SGR)、饲料系数(feed conversion ratio,FCR)、肝体比(hepatosomatic index,HSI):

其中Wt为实验结束时罗非鱼平均体质量(g),W0为实验开始时罗非鱼平均体质量(g),t为养殖时间(d),FI为实验期间罗非鱼摄食饲料的干物质质量(g),Wh为所取肝脏的质量(g),W为所取肝脏的罗非鱼体质量(g)。

1.4.2 鱼体营养成分分析

粗蛋白采用凯氏定氮法测定(Foss,2300),粗脂肪采用索氏抽提法测定(Foss,2050),水分采用105℃烘干法测定,粗灰分采用550℃马弗炉灼烧法测定(YATNATO,FO610C)。

1.4.3 酶活性测定

胃蛋白酶采用比色法测定;胰蛋白酶采用紫外比色法测定;淀粉酶采用淀粉-碘比色法测定;脂肪酶采用比色法测定。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。肝脏溶菌酶(lysozyme,LYZ)活力利用溶壁微球菌使用自身对照法测定;一氧化氮合成酶(Nitric Oxide Synthase,NOS)采用比色法测定。

1.5 数据处理

采用Excel 2010和SPSS 19.0软件对数据进行统计分析,先对数据进行单因素方差分析(ANO-VA),处理若有显著差异,再进行Duncan's多重比较,P<0.05表示差异显著,所有数值用平均数±标准差(±SD)表示。

2 结果与分析

2.1 对罗非鱼生长的影响

由表2可知,实验组的末均质量、增重率和特定生长率随饲料中海洋红酵母添加量的增加呈先增加后降低的趋势,饲料系数则与之相反,呈先降低后增加的趋势(P>0.05)。实验组的末均质量、增重率和特定生长率均优于照组,但差异不显著(P>0.05)。2 g·kg-1和4 g·kg-1组的饲料系数显著低于对照组(P<0.05),但1 g·kg-1、3 g·kg-1和5g·kg-1组则与对照组没有显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,1 g·kg-1组的肝体比有增加的趋势,其余各组有降低的趋势,但是差异都不显著(P>0.05);4 g·kg-1组的肝体比显著低于1 g·kg-1组(P<0.05)。

2.2 对罗非鱼体成分的影响

由表3可知,各处理组鱼体的水分和粗脂肪含量没有显著性差异(P>0.05)。鱼体粗蛋白含量呈先增加后降低的趋势(表3)。5 g·kg-1组鱼体粗蛋白含量显著低于1 g·kg-1和2 g·kg-1组(P<0.05)。其他各组之间鱼体粗蛋白含量差异不显著(P>0.05)。1 g·kg-1、3 g·kg-1和5 g·kg-1组鱼体粗灰分含量显著低于对照组(P<0.05),2 g·kg-1组和4 g·kg-1组间的粗灰分含量有降低的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。

注:同一行数值不同上标字母表示差异显著(P<0.05)。Note:Values in the same column with different letter are significantly different from each other(P<0.05).

%

注:同一列数值不同上标字母表示差异显著(P<0.05),后表同此。Note:Values in the same column with different letter are significantly different from each other(P<0.05).The same case in the following table.

2.3 对尼罗罗非鱼消化酶活性的影响

2.3.1 对尼罗罗非鱼蛋白酶活性的影响

随着饲料中海洋红酵母添加量的增加,罗非鱼胃、肝脏和肠道(前、中、后肠)的蛋白酶活性呈先升高后降低的趋势(图1和图2)。1 g·kg-1组胃蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05),3 g·kg-1、4g·kg-1和5 g·kg-1组胃蛋白酶活性都显著低于对照组(P<0.05),2 g·kg-1组有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。1 g·kg-1组肝脏蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05),2 g·kg-1、3g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1组肝脏蛋白酶活性显著低于对照组(P<0.05)。1 g·kg-1组前肠蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05),3 g·kg-1~5g·kg-1组前肠蛋白酶活性显著低于对照组(P<0.05),2 g·kg-1组有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。1 g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1和4g·kg-1组中肠蛋白酶活性均显著高于对照组(P<0.05),5 g·kg-1组中肠蛋白酶活性则与之相反,显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,3g·kg-1组后肠蛋白酶活性显著升高(P<0.05),5g·kg-1组后肠蛋白酶活性显著降低(P<0.05),其他各组后肠蛋白酶活性与对照组之间没有显著差异(P>0.05)。

2.3.2 对尼罗罗非鱼淀粉酶活性的影响

随饲料中海洋红酵母添加量的增加,罗非鱼胃、肝脏和肠道(前、中、后肠)的淀粉酶活性呈升高的趋势(图3)。2 g·kg-1、3 g·kg-1和4 g·kg-1组胃淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),1 g·kg-1和5 g·kg-1组胃淀粉酶活性有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。2 g·kg-1组肝脏淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),1 g·kg-1、3 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1组肝脏淀粉酶活性有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。1g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1组前肠淀粉酶活性均显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,1 g·kg-1、2 g·kg-1和3 g·kg-1组中肠淀粉酶活性显著升高(P<0.05),4 g·kg-1组中肠淀粉酶活性有增加的趋势,5 g·kg-1组中肠淀粉酶活性有降低的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。5 g·kg-1组后肠淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.05),1 g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1和4 g·kg-1组后肠淀粉酶活性有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。

2.3.3 对尼罗罗非鱼脂肪酶活性的影响

由图4可知,各组之间的罗非鱼胃脂肪酶活性没有显著差异(P>0.05)。5 g·kg-1组肝脏脂肪酶活性显著高于对照组(P<0.05),1 g·kg-1、3 g·kg-1和4 g·kg-1组肝脏脂肪酶活性有降低的趋势,2 g·kg-1组肝脏脂肪酶活性有增加的趋势,但是差异都不显著(P>0.05)。2 g·kg-1、3 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1组前肠脂肪酶活性均显著高于对照组(P<0.05),1 g·kg-1组前肠脂肪酶活性有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。1g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1和5 g·kg-1组中肠脂肪酶活性均显著高于对照组(P<0.05),4 g·kg-1组中肠脂肪酶活性有降低的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。1 g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1组后肠脂肪酶活性显著高于对照组(P<0.05),4 g·kg-1和5 g·kg-1组后肠脂肪酶活性有降低的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。

2.4 对尼罗罗非鱼肝脏免疫酶活性的影响

随饲料中海洋红酵母添加量的增加,罗非鱼肝脏溶菌酶和一氧化氮合酶活性都呈先升高后降低的趋势(表4)。2 g·kg-1和3 g·kg-1组肝脏溶菌酶活性均显著高于对照组(P<0.05),1 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1组肝脏溶菌酶活性有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。类似地,与对照组相比,2 g·kg-1和3 g·kg-1组肝脏一氧化氮合酶活性均显著升高(P<0.05),1 g·kg-1、4 g·kg-1和5g·kg-1组肝脏一氧化氮合酶活性有增加的趋势,但是差异不显著(P>0.05)。

U·m L-1

3 讨论

海洋红酵母及其产生的生长因子和消化酶类能有效促进水产动物对营养素的消化吸收,提高其生长速度和对饲料的利用率[10]。海洋红酵母含有的营养因子能够帮助有益菌的生长,饲料中添加海洋红酵母(Rhodotorula benthica),能够促进哺乳母猪采食性能的提高[11]。饲料中添加1 g·kg-1海洋红酵母(R.benthica)对大菱鲆的体成分和形体指标的影响不显著,但能显著提高大菱鲆对红鱼粉替代白鱼粉饲料的摄食率、蛋白效率和生长性能,使得红鱼粉替代组的饲料性能达到白鱼粉组的生长水平[4]。在海洋红酵母(R.benthica)和微生态饲料添加剂的对照实验中,发现海洋红酵母显著增加了对虾的末均质量[1]。在饲料中添加一定量的海洋红酵母(R.benthica)后,能提高日本对虾(Penaeus japonicus)幼虾的成活率,促进其生长[12]。海洋红酵母也显著提高了凡纳滨对虾的增重率和特定生长率[13]。添加海洋红酵母(R.mucilaginosa)的实验鱼的末均质量、增重率和特定生长率随饲料中海洋红酵母添加量的增加均优于照组,但差异不显著。在对大菱鲆4周养殖实验中,也发现其摄食率、相对增重率、特定生长率和饵料系数均没有显著差异,在白鱼粉为主的大菱鲆饲料中添加海洋红酵母(R.benthica)0.5~1.5 g·kg-1不能提高大菱鲆的摄食和生长性能[5]。笔者认为,导致以上研究结果不一致的原因可能与红酵母的种类、实验鱼的种类和规格以及养殖周期、饲料配方等有关。

鱼类消化酶对食物的催化作用易受饲料和外界环境因素的影响,饲料不仅影响消化酶活性和分布,而且还可影响酶的分泌,饲料中营养物质影响消化酶的活性,蛋白质含量影响各种消化酶的活性,脂肪含量影响消化道脂肪酶和淀粉酶活性[14,15]。养殖水体温度的变化对消化酶活性具有显著的影响[16,17]。饲料中添加沼泽生海洋红酵母(R.paludigenum)显著提高凡纳滨对虾肝胰腺中蛋白酶和脂肪酶活性,但是对肝胰腺中淀粉酶没有显著影响[18]。饲料中添加一定量的海洋红酵母能够显著提高罗非鱼消化道蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性,表明海洋红酵母能够提高罗非鱼消化酶的活性,增强其对营养物质的消化吸收能力,进而促进鱼体生长。

海洋红酵母含有丰富的类胡萝卜素、维生素E和β-葡聚糖。类胡萝卜素通过消除自由基维护细胞膜的稳定性[19],具有增强免疫功能的作用[20]。类胡萝卜素(从红假单胞菌中提取)可以显著提高罗非鱼的生长性能,增强其非特异性免疫因子血清溶菌酶的活性,通过调节免疫功能提高罗非鱼的生长性能[21]。饲料中添加适量的维生素E(300 mg·kg-1)可以促进尼罗罗非鱼的生长,提高其溶菌酶活力和巨噬细胞的吞噬活性,但过量的维生素E(>1 000 mg·kg-1)会抑制其生长[22]。该实验中由海洋红酵母提供的类胡萝卜素和维生素E含量都较低,对尼罗罗非鱼的生长和非特异性免疫可能起到辅助作用。

在饲料中添加β-葡聚糖和肽聚糖未能促进罗非鱼生长,而且复合肽聚糖还会抑制其生长[23]。多糖会抑制尼奥罗非鱼的生长,降低脂肪沉积率[24]。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)提取物甘露寡糖可以显著促进尼罗罗非鱼的生长,提高其抵抗病原菌的能力[25]。益生菌产物β-葡聚糖具有免疫调节作用[26,27]。异育银鲫(Carassius auratus gibelio)短时间(28 d)投喂酵母β-葡聚糖(200 mg·kg-1)饲料可以增强抵抗嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的能力,具有促生长作用[28];鲤(Cyprinus carpio)长时间(60 d)投喂β-葡聚糖饲料,虽然对生长性能没有显著影响并且降低其对嗜水气单胞菌的抵抗力,但可以提高其肝脏溶菌酶和酸性磷酸酶的活性[29]。该实验中,随着海洋红酵母添加量的增加,肝脏溶菌酶和一氧化氮合酶活性呈现先升高后降低的趋势,投喂1~2 g·kg-1的海洋红酵母依然可以提高尼罗罗非鱼的免疫酶活性;但是,高浓度海洋红酵母(3~5 g·kg-1组)会抑制罗非鱼的免疫能力,可能是因为长期投喂高浓度的β-葡聚糖导致的免疫疲劳。

4 结论

饲料中添加海洋红酵母可以促进罗非鱼的生长,提高其消化酶活性和增强其非特异性免疫能力。根据尼罗罗非鱼幼鱼的生长性能、消化酶及免疫酶活性等指标综合分析得出,海洋红酵母在罗非鱼饲料中的建议添加量为2~3 g·kg-1。

摘要：为了研究海洋红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼生长性能、消化酶及免疫酶活性的影响,配制6组饲料,分别为对照组、添加1 g·kg-1、2 g·kg-1、3 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1的海洋红酵母组,投喂初始均质量为(5.22±0.01)g的尼罗罗非鱼,实验56 d。结果显示,与对照组相比,2 g·kg-1和4 g·kg-1组的饲料系数显著降低(P<0.05),1 g·kg-1、3 g·kg-1和5 g·kg-1组则没有显著性差异(P>0.05)。5 g·kg-1组鱼体粗蛋白含量显著低于1 g·kg-1和2 g·kg-1组(P<0.05),1 g·kg-1、3 g·kg-1和5 g·kg-1组鱼体粗灰分含量显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,1 g·kg-1组胃蛋白酶活性显著升高(P<0.05),3 g·kg-1、4 g·kg-1和5 g·kg-1组胃蛋白酶活性显著降低(P<0.05)。2 g·kg-1和3 g·kg-1组前肠和中肠淀粉酶和脂肪酶,以及肝脏溶菌酶和一氧化氮合酶活性均显著高于对照组(P<0.05)。根据尼罗罗非鱼幼鱼的消化酶和免疫酶活性等指标综合分析得出,海洋红酵母在罗非鱼饲料中的建议添加量为23 g·kg-1。