人的体外胚胎

人的体外胚胎（精选九篇）

人的体外胚胎 篇1

(一) 有关体外胚胎的案例回顾

有资料表明, 二十世纪九十年代初期, 我国的不孕不育率仅为3%, 与其他国家相比, 比例很低。但是, 以后的不孕不育不减反增, 已经达到了12.5%—15%, 与发达国家的距离拉近了许多, 并且逐渐呈年轻化趋势。人工辅助生育技术已成为不孕夫妇求子的最大希望, 此技术的应用日益普遍, 按照技术操作惯例, 选择体外受精的夫妇除了植入体内的胚胎, 还会有备用的胚胎交付医院保管, 在某些特殊情况下, 由这些备用胚胎处理引发产生的新型纠纷并非罕见。下面讲述几个真实案例。

案例一:一对大龄青年本想通过试管婴儿的方式生育宝宝, 可是事与愿违, 在宝宝到来之前夫妻二人产生了离婚纠纷, 双方在法院主持下调解离婚, 但是裁判生效后, 妻子表示还想进行移植, 圆自己做妈妈的梦, 法院以生育权的行使须双方合意为由拒绝了女方的请求。普通的离婚案件只涉及感情破裂的认定、财产分割、子女抚养问题, 而本案则牵扯到夫妻离婚后备用胚胎的处置问题。

案例二:一对夫妻为了生育后代, 便想利用试管婴儿技术培育体外胚胎, 首次胚胎移植手术失败, 此时, 更为不幸的是, 丈夫因车祸死亡, 妻子为了给丈夫留下血脉, 便要求继续进行胚胎移植, 但是, 医院拒绝了她的请求, 因为, 她现在不再属于已婚女性, 不能进行胚胎移植手术。该案被上报到了卫生部, 卫生部认为胚胎移植仍然属于整个辅助生育治疗过程的一部分, 支持了妻子的要求。

两个案例有某些相似之处, 但是案件的结果却相差很大, 不免让人疑惑。

(二) 提出的法律新命题

不仅在我国出现了有关体外胚胎的案例, 国外许多国家也发生过许多此类案件, 比如, 美国Davis诉Davis案中, 夫妻二人婚姻关系结束后, 对7枚冷冻胚胎的控制权产生争议;比如, 美国夫妇在澳大利亚进行体外受精后, 遭遇空难双双死亡, 遗留胚胎如何处理以及是否拥有继承权的问题等等。这一系列的案件向我们提出了许多法律新命题。

1. 人的体外胚胎的“特殊”之处在哪?

冷冻胚胎继承权纠纷案一审法院, 之所以驳回当事人的诉讼请求, 判决理由是:“以冷冻胚胎具有发展为生命的潜能, 是含有未来生命特征的特殊之物, 不能像一般之物一样任意转让或继承”, 这不禁会让我们产生疑问———冷冻胚胎“特殊”在哪?

试管婴儿是在体外受精, 形成体外胚胎, 然后移植入母体的过程, 为了保证手术的成功, 往往要形成多个体外胚胎, 但是法律规定了每次移植的胚胎数量, 所以会有剩余胚胎的存在, 医院要对其进行冷冻储存。从生物上来说, 冷冻胚胎与体内胚胎没有什么区别, 只不过他离开了人的身体, 这时, 我们又会疑问———现有的物的外延真的无法将其包含在内吗?

2.“无主”体外胚胎何去何从?

治疗不孕不育的方法是试管婴儿技术, 该技术只是完成了体外受精, 胚胎的孕育还需要借助母体, 如果母体死亡, 体外胚胎只能被销毁;如果在移植胚胎之前, 夫妻感情破裂并且离婚, 夫妻对胚胎是否继续移植产生分歧, 胚胎面临的命运也只能是被销毁。

生育权不能被放弃、转让、继承, 它与权力主体不可分离, 权力主体死亡, 权利消灭;夫妻双方对胚胎共同享有权利, 权利的行使必须经双方的同意, 夫妻对胚胎的处置发生分歧, 只能在对双方利益进行衡量后才能做出决定。

二、人的体外胚胎的法律属性

(一) 各种学说

第一, “主体说” (将体外胚胎视为非物) 。持此观点的学者认为, 体外胚胎是人体的一部分, 就如同人的肢体、器官等, 对体外胚胎的保护就是对人体的保护, 对体外胚胎的侵害就是对人体的侵害。当然, 学者认为体外胚胎与一般的自然人相比, 具有一定的局限性, 所以体外胚胎可被视为“有限的人”。

第二, “客体说” (将体外胚胎视为物) 。持观点的学者认为, 胚胎在母体内时是人体的一部分, 但是一旦他脱离了母体, 就属于普通的“物”, 权力主体可以对其享有所有权, 体外胚胎可以被继承、转让等。

第三, “折中说” (将体外胚胎视为非人非物) 。学者们认为, 体外胚胎既不属于主体———人, 又不属于客体———物, 他是介于主体与客体之间的中介, 我们应当给予尊重, 在解决相关问题时, 应当设计出适用于此中介的法律制度。

(二) 认定人的体外胚胎为伦理物的正确性

1. 三大观点的不足

首先, “主体说”的观点具有明显的缺点。要成为主体必须具有独立的人格和自我意识, 而体外胚胎不具备此特征;如果将体外胚胎视为主体, 将严重阻碍科学发展;从我国的国情出发, 我国人口数量大, 计划生育还是我国的基本国策, 堕胎行为屡见不鲜, 如果贸然将胚胎定性为“主体”, 计划生育政策将如何实施?

其次, “客体说”的观点也不可取。如果将体外胚胎简单的视为“物”, 可以被继承、转让, 那么, 体外胚胎将会被作为商品进行买卖, 这是对生命的不尊重, 也可能会引起遗传的混乱, 践踏伦理道德。

最后, “折中说”将体外胚胎视为介于主体与客体之间的中介, 同时提倡建立新的法律制度, 这未免太过复杂, 体外胚胎的出现, 还不足以形成冲击人与物民法基本格局的力量, 它还没有强大到足以形成市民社会第三物质构成要素、成为民法新的基本范畴的程度。

2.“具有人格属性的伦理物说”的合理性

第一, 体外胚胎具有物的属性, 并且具有特殊性。体外胚胎离开人体之后, 不再是人体的一部分, 从外形上看, 与普通的物没有区别, 同时试管婴儿技术的产物, 相关主体可以对其进行支配, 所以体外胚胎具有物的相关属性。但是, 与普通物相比较, 体外胚胎具有其特殊性, 它内涵遗传物质, 经过相关技术可以发育为自然人, 有的学者将其称为人格物并非没有道理。此外, 体外胚胎具有人格权客体属性———生育自主决定的人格利益, 自主决定系人格权的主要内容, 可以归入到其他人格中。

第二, 体外胚胎是伦理物。主张“主体说”的学者, 主要是想用“主体”的相关制度对体外胚胎进行保护, 充分尊重具有潜在生命特性的“有限的人”, 但是有违民法逻辑思维, 而将体外胚胎视为伦理物, 同样可以起到特殊保护的作用, 并且又不失对体外胚胎的尊重。

三、人的体外胚胎的法律构建

(一) 国外有关体外胚胎的法律规定及司法实践

体外胚胎涉不仅及到遗传信息, 也涉及到生命、价值等, 具有极大的敏感性和复杂性, 所以各国对其的认定和保护程度不一。有的国家已纳入正式立法, 还有许多国家立法并未体现, 对其性质的界定及处置规则多见于司法例, 比如, 在阿根廷、意大利等少数国家, 其民法典支持“有限人”说, 此说反对以胚胎为实验对象的科学研究, 在处理涉及胚胎的新技术应用的法律事务方面难免会出现无法适用的问题;“夫妻私人生活利益说”由美国法学学者提出, 被美国个别判例所承认。

比如, 美国体外胚胎第一案的田纳西州戴维斯VS戴维斯案, 一审法官采纳“财产说”, 州最高法院法官则持“夫妻私人生活利益”说兼采“中介说”。英国2009年4月通过的《人类受精和胚胎学法》扩大了胚胎研究的范围, 在实施生殖医学服务时, 实际上将胚胎的法律属性定位为具有生命潜能的“准物”。英国在处理胚胎争夺案中一般不支持一方处置的诉求。爱尔兰作为天主教传统浓厚的国家, 堕胎被认为是非法的, 其宪法第8修正案确认未出生者具有生命权, 但在司法实践中, 否认胚胎属于“未出生的生命”, 曾引起较大争议, 法官们也承认关于生命权从什么时候开始这个话题有很多争议, 他们也无法解决。相反的判例则出现在以色列, 在Nachmani VS Nachmani一案中, 妻子请求使用与分居丈夫共有的冷冻胚胎, 中审法官支持妻子对于胚胎享有所有权。

(二) 对我国人的体外胚胎的立法建议

目前, 我国关于胚胎的规范性文件效力位阶较低, 内容简单, 远远满足不了实践的需求。比如《人类辅助生殖技术规范》第3条规定“禁止实施胚胎赠送、买卖”, 给规定禁止的行为主体是技术人员, 并没有禁止其他人员, 在司法实践中, 法官不能很好的运用这些规定来审理案件, 如果运用极其容易引起争议, 也不能很好的解决纠纷, 实现正义。因此, 有关体外胚胎的法律体系急需完善, 相关的配套措施也需要及时设计出台, 满足实践需求。

首先, 要对体外胚胎的法律属性进行合理定位, 这是解决所以问题的前提。既不能将体外胚胎简单的视为主体, 也不能简单视为客体, 而应视为一种具有人格属性的伦理物, 可以成为继承、捐赠、收养、使用的对象。

其次, 对体外胚胎的相关权利内容做出详细规定, 这是解决问题的具体方法。包括:夫妻双方死亡后, 遗留的体外胚胎处理规则, 继承人对胚胎享有受限制的继承权、基于身份关系而享有的人格利益、受限制的处分权;夫妻双方有关体外胚胎的权利归属及权利行使规则, 权利的行使要衡量双方的利益, 根据双方的合意。

再次, 规定体外胚胎的去向内容, 比如:捐赠制度、收养制度、使用制度、销毁制度等, 对于移植后剩余的胚胎或者夫妻死亡后的遗留胚胎, 权利人可以无偿的捐赠给其他不孕夫妻或者科研机构, 不孕夫妻可以根据收养制度进行收养, 科研机构应当以科学研究和医学为目的使用胚胎, 对于剩余的体外胚胎在符合法定条件下, 根据法律程序实施销毁。

最后, 设立专门的机构对胚胎的存储、捐赠、收养、使用、销毁等进行监管, 保障相关制度的落实。

参考文献

[1]杨立新.冷冻胚胎是具有人格属性的伦理物[N].法律生活检察日报, 2014-7 (003) .

[2]李燕, 金根林.冷冻胚胎的权利归属及权利行使规则研究[J].人民司法, 2014 (13) .

[3]张善斌, 李雅男.人类胚胎的法律地位及胚胎立法的制度构建[J].科学与法律, 2014 (2) .

[4]杨立新.人的冷冻胚胎的法律属性及其继承问题[J].人民司法, 2014 (13) .

[5]李燕.生命科技背景下的人体与民法上的物[J].政法论丛, 2009 (03) .

[6]刘颖, 杨健.胚胎的法律属性及其处置规则刍议[J].中国卫生法制, 2014 (128) .

[7]杨立新.一份标志人伦与情理胜诉的民事判决——人的体外胚胎权属争议案二审判决释评[J].法律适用, 2014 (11) .

[8]郑智.冷冻胚胎继承纠纷提出哪些法律新命题[N].检察日报, 2014-5-26 (1) .

[9]吴文珍.美国的胚胎收养实践与立法及其对我国的启示[J].社会科学, 2011 (06) .

体外受精与早期胚胎培养教学设计 篇2

1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。

2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。

3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。

二、教学建议

1.课时数:本节教学建议用2课时。

2.课时侧重点:

(1)体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。

(2)哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。

3.教学策略

教学过程一定要根据学生的具体情况、教材的内容、教学的条件综合考虑进行。本节教材是在哺乳动物体内受精和胚胎发育的理论基础上,着重简述哺乳动物体外受精和胚胎早期培养的技术方法。本节内容简单,学生通过阅读基本能明白。另外,由于所讲内容技术性较强,与学生的生活相距较远,不易引起学习兴趣,所以教师可采用探究式的学习方法,以“试管牛”为例,创设出一种新的学习情景,在教师的带领下,让学生以胚胎工程学家的身份出现,亲历其境地去思考和探究“体外受精和早期胚胎培养”的过程,领悟其探究的方法,以达到激发兴趣、培养能力、获取知识的目的。对具体的教学方法建议如下。

教师课前搜集有关“试管牛”技术及其发展的资料,并制作“利用屠宰厂牛卵巢收集卵母细胞,并工厂化生产试管胚胎”的计算机辅助教学软件(或投影片)。同时,教师布置学生搜集有关“试管牛”的资料。

人的体外胚胎 篇3

【关键词】体外受精-胚胎移植；心理护理；健康教育【中图分类号】R541.4 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2015）03-0370-01

近年我国不孕症呈上升趋势 ， 发病率约 7% ～10%[1]，受不孕症困扰的夫妇越来越多。虽然人类辅助生殖技术在我国已日臻完善，但是不孕症夫妇的求子之路却还是充满了辛酸，他们依然承受着来自家庭、社会、医院等方面的压力。有文献报道，约有 72% 实施辅助生殖技术的不孕症患者存在焦虑情绪等不良心理，甚至对临床妊娠产生了不良的影响[2] 。因此心理护理已经被认为是人类辅助生殖技术护理中不可缺少的一部分。 英国早在2001年已将心理干预作为不孕症治疗的正规流程之一[3]。 即便是成功妊娠，心理护理也不可缺少。

1.体外受精-胚胎移植成功妊娠患者常见心理问题及分析

1.1抑郁心理。不孕不育患者一般都有一定程度的内疚和自卑。女性，尤其是文化程度低，缺乏对妊娠甚至传统生理知识认识的患者，这种情况更加严重。而家人往往责怪女性没有怀孕，让她们长期处于孤独，自责，内疚的状态。而这种错误的认知也更容易导致男性抱怨女性。如果夫妻双方缺乏沟通和交流，不能够在心理上支持对方，就容易产出抑郁心理，即使在成功怀孕之后，抑郁心理仍然会对夫妻双方的精神状态造成较大干扰。

1.2兴奋心理。长期的治疗，患者需要顶住反复治疗的痛苦，一旦怀孕，喜悦之情溢于言表。这种突然地快乐容易造成过度紧张，如果妊娠患者的心理极度紧张，情绪上也会不稳定，易怒，大脑皮层会出现不正常的生物钟的高度兴奋，混乱，这都会影响胎儿的健康发育。甚至会使子宫敏感性增加，交感神经活动引发宫缩，导致流产或早产。

1.3忧患心理。辅助生殖技术的成功率目前还不能达到100%，那些负面信息将导致一个成功的怀孕患者仍然缺乏信心。加上缺乏相关知识，治疗过程的高成本，这样他们潜伏一些消极的心理，内心可能一种潜藏着忧患之心。担心不正常的胎儿发育，担心治疗后的并发症。

1.4渴望关注心理。体外受精-胚胎移植成功妊娠患者较自然妊娠的女性更加关注自己的妊娠。这是因为她们的成功怀孕确实不易，她们往往担心自己能不能平安渡过妊娠期及分娩期[4]。因此，对医护人员往往寄予厚望，渴望得到医护人员更多的指点和特殊的重视。为了确保能够安全的怀孕，他们拼命寻找相关医学知识并严格按照医生的指导或建议，他们的神经过于敏感，甚至对医护人员的任何细小行为或不经意的状态都耿怀于心。

2.心理护理对策

2.1 精神上对患者要理解、支持和关怀 。医护人员以热情诚恳的态度与试管婴儿孕妇进行心理交流。鼓励这些患者敞开心扉叙述自身的感受，将恐惧、担心、焦虑以及悲观失望的情绪宣泄出来。通过健康教育使其认识自身的社会价值及未来的责任，树立信心。讲解有关妊娠的知识，介绍试管婴儿成功分娩的病例，消除孕妇焦虑，恐惧的心理，使其保持良好的心理状态，愉快的心情，有利于安全度过妊娠期。

2.2建立密切护患关系使孕产妇保持健康心理 。孕产妇对医护人员的依赖性很强，医护人员应耐心地与其进行友好、深入的交谈。要让他们倾诉压力所在，并为患者保守秘密，尽可能创造条件与其单独交谈，涉及个人隐私时，应请他人回避。掌握患者心理状态，有针对性地进行心理护理，在交谈中，了解患者的心理状态及对辅助生殖技术认识程度，耐心细致地解释患者提出的疑问，消除患者的思想顾虑，给予心理支持，发现患者忧虑和担心的问题，进而实施耐心细致的心理疏导。引导孕妇面对现实，积极治疗，摆脱消极的心境，增加积极的情绪体验，多与人沟通，回忆美好的往事，展望明天，加强意志锻炼，指导孕妇学会自制、自我安慰、自我解脱，通过意志来控制不稳定的情绪，有利于孕妇接受分娩后的事实。同时，做好家屬的思想工作，使他们意识到给予理解和关心是及其的重要。

2.3 正确对待辅助生殖技术、宣讲相关科学知识 。让患者正确的认识辅助生殖技术，熟悉这项技术的原则和实施过程，明白这技术是合理的和符合道德的。要对患者耐心介绍相关的技术指标、基本过程和治疗以及可能出现的并发症等，使病人有一定的思想准备，消除抑郁和恐惧，以取得合作。将日常监测结果及时告知患者，介绍一些孕期保健的相关知识。注意密切观察任何并发症，在发生先兆流产症状时，应积极配合医生处理，以确保患者情绪稳定。并呼吁社会歧视不能排除弱势群体，他们应该被广泛理解，支持，尊重，这是有利于社会稳定和国家计划生育政策的实施。

2.4医护及家属联合关注 。除了我们医护人员对妊娠患者要关心，同时也需要患者家庭的积极配合，尤其是丈夫的关心和照顾。它就像镇定剂，让他们得到安慰，消除不适，增强自信。研究表明，不孕患者在感到疼痛时主要依靠他们的配偶和家庭支持。家庭支持除了提供经济物质外，也需要其他的形式如直接提高生活的质量，更重要的是让病人相信她，是爱。这是因为保护她们的自尊是不孕症患者的家庭重要的使命。对患者的健康教育，要让家人在一起听，对患者和家属都要讲解相关知识。指导患者进行放松训练，让他们学会有意识地控制自己的心理活动和生活态度。为了提高身体机能，适当的让她们收听轻松的音乐来放松心情，使其在一个平和的心态下来对待怀孕，来引导他们的生活，学习和工作，就像正常的孕妇一样。

2.5提高护理人员的素质和伦理道德观念。对所有在我们医院接受体外受精孕产妇，搞好保密工作。医务人员不宣传、不泄露，以免损害女性的自尊。

3.讨论

体外受精-胚胎移植成功妊娠患者的心理问题多而复杂，原因与其所处地域的经济、文化、环境等有关。因此，护理人员应针对出现的心理问题，善于疏导，使其能顺利地度过孕产期。她们情绪焦虑、易激动，承受外界压力的能力降低，心理障碍严重。腹中的胎儿是她们日常生活的重点，担心胎儿的安危，担心胎儿的成长、发育等使她们承受超负荷的心理压力[5]。因此成功妊娠后的试管婴儿患者心理特征应引起临床医护人员的广泛重视，给予相应的帮助与支持，进行有效的心理疏导，使其心境平和，愉快地度过孕产期。

参考文献

[1]谢幸，苟文丽 .妇产科学 . 第 8 版 . 北京 ：人民卫生出版社 ， 2013年8月（369）.

[2] 陈向红 ， 陈惠仪 ， 等 .强化心理干预在辅助生殖技术中发生流产患者中应用的效果评价 .中国实用护理杂志 ， 2012，28（ 20） ： 77-78.

[3] Boi vi n J， Appl et onT C， Baet ens P， et al . Gui del i nes f orcounsel l i ng i n i nf ert i l i t y： out l i ne versi on. H um Re-prod， 2001， 16 （ 6） ： 130-1304

[4] 袁细妹，心理干预对实施辅助生殖技术不孕症患者的临床价值分析. 中国现代药物应用，2015，2，9（3）：164-165.

人的体外胚胎 篇4

关键词：胚胎移植,临床妊娠率,种植率,体外受精

临床中有80%的体外受精患者可达到胚胎移植阶段,但每周期仅有20%～40%的临床妊娠率。胚胎移植后的妊娠结局与诸多因素有关,包括胚胎质量、内膜接受性、移植技术等[1]。就胚胎移植技术本身而言,临床医生将移植管插入宫腔、推入胚胎并不困难,但胚胎移植的难易程度、胚胎放置宫腔的深度、移植管的类型等,均直接影响胚胎的种植率和妊娠率[2]。作者回顾性分析了胚胎移植的难易程度、出血、移植管胚胎遗留对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。

1 资料与方法

1.1 对象

选择从2001年3月到2005年12月,在成都市计划生育技术指导所生殖医学中心进行体外受精-胚胎移植的595例患者,共620个周期,不包括冷冻胚胎移植周期。本研究经过成都市计划生育技术指导所医学伦理委员会讨论通过,参与的患者均签订了知情同意书。

1.2 控制性超促排卵和体外受精

患者用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a,)和尿促激素(HMG),采用长方案或短方案进行超促排卵。当发现3个或以上主导卵泡直径达16～18mm时,注射绒促性素。注射绒促性素 36～38小时后,阴道B超引导下穿刺卵泡采集卵母细胞。IVF和卵母细胞内单精子显微受精(ICSI)过程采用常规方法。

1.3 胚胎移植程序

根据Steer等[3]报道的评分标准进行胚胎分级,只有Ⅰ级或Ⅱ级胚胎才用于胚胎移植。在进入IVF-ET周期前,进行“预移植”了解有无宫颈炎症、宫颈狭窄、宫颈与宫体角度、宫腔深度以及进入宫腔的难易程度。如有宫颈狭窄则用3.5号扩宫棒扩张宫颈至移植管能顺利通过,宫颈柱状上皮异位触血阳性者予以阴道给药局部抗感染治疗。胚胎移植在取卵后48～72小时用KJET-3005(COOK,Australia)移植管进行。不超过3个胚胎移植入子宫内。胚胎移植时首先去除宫颈分泌物,培养液清洗宫颈表面,放置外管至宫颈内口处,胚胎装载在20 μl培养液的软管中,通过外管放置在距宫底1.0～1.5 cm处缓慢推注留管30秒,取出移植管送培养室检查有无胚胎遗留、移植管有无出血。移植困难者可采用腹部B超下放置外管、宫颈钳牵拉宫颈纠正宫体位置、用硬内芯引导,使胚胎顺利放置宫腔。出现胚胎遗留时,将胚胎转移至干净液滴放入培养箱复温,更换移植管,再进行胚胎移植。

根据移植的难易程度分为:容易移植即放置外、内管顺利或经轻微纠正宫体位置和引导下能顺利放置外、内管;困难移植即反复多次放置内、外管有阻力或在B超引导下才能放置移植管。根据移植后移植管血染情况分为:内、外管均无血染;内、外管均有明显血染。根据移植管胚胎遗留情况分为:内、外管无胚胎遗留;内、外管有胚胎遗留。

1.4 临床妊娠和胚胎种植率

胚胎移植后用孕激素、雌激素或绒促性素进行黄体支持。移植后2周检测β-hCG ,当连续两次(间隔2天)测定β-hCG 水平升高,则可以认为生化妊娠。胚胎移植后4周B超检查是否有孕囊和胎心确定是否临床妊娠。胚胎种植率是B超下所见胎囊数占移植胚胎数的比率。

1.5 统计分析

采用SPSS软件对数据进行处理,行t检验和χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 胚胎移植的难易程度对妊娠结果的影响

620个体外受精-胚胎移植周期中,其中容易移植555个周期,占89.52%;困难移植65个周期,占10.48%。两组患者平均年龄和一般临床资料比较无统计学意义(P>0.05)。容易移植组的临床妊娠率、胚胎种植率均高于困难移植组,两组比较有统计学意义(χ2=4.42;χ2=3.89,P均<0.05),(见表1)。

2.2 移植管出血情况对妊娠结局的影响

620个移植周期中,移植管无出血568个周期,占91.61%;有明显出血52个周期,占8.39%。两组患者平均年龄和一般临床资料比较无统计学意义(P>0.05)。移植管无出血组的临床妊娠率高于出血组的临床妊娠率,两组比较有统计学意义(χ2=3.93,P<0.05),但胚胎种植率两组间比较无统计学意义(χ2=2.07,P>0.05),(见表2)。

2.3 移植管胚胎遗留情况对妊娠结局的影响

620个移植周期中,移植管胚胎遗留25个周期,占4.03%;移植管无胚胎遗留595个周期,占95.97%。两组患者平均年龄和一般临床资料比较无统计学意义(P>0.05)。移植管胚胎遗留组与无遗留组临床妊娠率和胚胎种植率间比较无统计学意义(χ2=0.14;χ2=0.03,P>0.05),(见表3)。

3 讨 论

胚胎移植是IVF-ET的关键技术,因此对临床医师有很高的要求,不仅应具备丰富的宫腔操作经验,还应做到轻柔、准确、快速、细致。胚胎移植是在非直视下通过宫颈的过程,因此存在一些潜在的负面影响,包括刺激性子宫收缩引起胚胎即刻或迟缓排出;宫颈粘液阻塞移植管尖端或粘住胚胎,导致胚胎在移植管中遗留;移植管不能插入宫颈内口,胚胎不能被放置到宫腔内;移植管损伤子宫内膜,降低胚胎着床率。因此在胚胎移植时,要尽量减少对子宫内膜的损伤、移植到位、避免子宫收缩排出胚胎。近年来,移植管的改进、技术的熟练、B超的引导可以降低移植对子宫内膜的损伤,较准确地将胚胎移植到宫腔的正确位置。然而,胚胎移植困难、移植过程中出血、胚胎遗留于移植管等问题在实际胚胎移植操作中时有发生。

移植管类型的选择是否影响妊娠率,目前尚未有定论。Van Weering等[4]2002年的一项前瞻性大样本研究表明,硬管移植和软管移植的临床妊娠率分别为20.5%和27.1%,二者无统计学意义。然而,多数学者[2,5]报道软移植管较硬移植管妊娠率高。可能是因为硬管易损伤子宫内膜,导致胚胎着床障碍。胚胎移植过程中,移植管难以顺利地通过宫颈内口是常遇到的问题,研究者[2,6]报道,移植管容易通过宫颈内口,将获得理想的临床妊娠率和胚胎种植率,但困难移植即硬导管反复多次操作才能进入宫颈内口,明显降低临床妊娠率。本资料也显示,容易移植组临床妊娠率、胚胎种植率高于困难移植组。可能因为困难胚胎移植操作时间较长、对宫颈和子宫的刺激作用较强,刺激子宫内源性缩宫素的释放,增加了子宫收缩,排斥胚胎,引起临床妊娠率下降。但也有研究者报道,困难胚胎移植不影响IVF-ET的临床结局。

胚胎移植过程中常会出现移植管出血,可能因为存在宫颈炎、增生性宫颈管炎、困难胚胎移植、移植管损伤子宫内膜所致。移植时出血会导致血液污染宫腔,造成胚胎发育的内环境发生改变,影响胚胎着床。研究者[1]报道,胚胎移植后移植管带血是影响胚胎移植过程的重要因素,可能降低临床妊娠率,而且血越多妊娠机会越小。本资料分析表明,胚胎移植过程中,移植管出血组的临床妊娠率低于无出血组,但对胚胎种植率没有显著影响。

在胚胎移植过程中,常会发生胚胎遗留于移植管中,可能因为:宫颈粘液太多,使移植管粘上胚胎;推注胚胎时力量太轻,含胚胎的培养液没有完全推出;推注胚胎时力量太大,按注射器的手松动,造成负压使液体及胚胎回吸;移植管推出过快造成负压使液体及胚胎带出。研究者[2,6]报道,对遗留于移植管内的胚胎,立即进行补插管进行移植,结果胚胎遗留并未影响临床妊娠率。本资料分析表明,移植管胚胎遗留通过补插管后重新移植,对临床妊娠率和胚胎种植率均没有明显影响。

近年来,Pope等[7]报道在B超引导下进行胚胎移植,由于B超引导下对内膜无创伤,胚胎放置部位相对准确,能有效提高临床妊娠率,并可降低异位妊娠的发生,尤其对以前有困难移植史的患者有很大帮助。胚胎移植越来越受到广大临床医生和研究者的重视。但是无论移植技术和移植管类型如何改进,在胚胎移植过程中,仍然不可能完全避免移植困难、移植管出血和胚胎遗留于移植管等情况的发生。因此,在胚胎移植过程中,临床医生应熟悉患者的宫腔形态,最好在IVF周期中采用预移植,以了解宫颈、宫腔状态,减少困难移植的发生,对较困难插管的患者,采用宫颈扩张术或B超引导下移植;预移植时,若发现患者有宫颈炎症应给予抗感染治疗,减少胚胎移植时接触性出血的发生;移植时,若患者宫颈粘液较多,插管前用棉签将粘液轻轻擦净,减少粘液粘上胚胎和导致胚胎遗留的机会;另外,装载胚胎的液体不宜太多,推注胚胎时力量轻柔均衡,推完胚胎后,按压注射器尾段的手不要立即松开,以免造成回吸,导致胚胎遗留。总之,整个胚胎移植操作过程中,要尽量操作轻柔、熟练、快速,减少对宫颈和子宫的刺激,以增加妊娠的机会。

参考文献

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人的体外胚胎 篇5

1 资料与方法

1.1 研究对象

2009年1月至2009年12月, 在省妇幼体外受精—胚胎移植 (IVF-ET) 治疗的343个周期。患者平均年龄31.13+4.44岁, 平均不孕年限4.85+3.22年。原发不孕症213例, 占62.10%, 继发不孕症130例, 占37.90%。盆腔或输卵管因素229例, 排卵障碍19例, 子宫内膜异位症13例, 男方因素43例, 双方因素29例, 不明原因10例。

1.2 方法

1.2.1 促排卵方案

超排卵采用常规长方案或短方案[1], 注射HCG5000-10000 IU后约34~36h, 在B超引导下经阴道穿刺取卵, 卵子取出后预培养4~6h。

1.2.2 精液的准备

丈夫禁欲2~7 d。手淫法取精, 待完全液化后按世界卫生组织标准评估精液质量。用上游法或Pureception梯度法处理精液, 沉淀放入0.5ml培养液中预处理。

1.2.3 受精、胚胎发育及妊娠的评价

使用常规IVF方法进行授精, 授精后16~19 h (Day1) 观察受精情况。双原核及排出第二极体为受精, 授精后24~48 h (Day2~3) 左右查看卵裂情况。根据卵裂球大小、是否均匀及有无细胞碎片和发育速率进行胚胎质量评估。Day2选择4~6细胞或Day3选择7~10细胞, Ⅰ、Ⅱ级优质胚胎2~3个进行移植, 移植后14~16d尿和血, HCG阳性为生化妊娠, 35dB超观察到妊囊和胎心搏动确定临床妊娠。

2 结果

共完成343个周期体外受精-胚胎移植, 移植324个周期, 取卵339个周期, 平均每周期获卵10.96±6.11个, 受精率78.06%, 卵裂率97.45%, 平均每周期移植胚胎2.15±0.55个, 获115例临床妊娠, 妊娠率35.49%, 其中单胎67例, 双胎20例, 三胎1例, 自然流产20例, 宫外孕7例。无卵巢过度刺激综合征 (OHSS) 发生。

3 结束语

体外受精-胚胎移植 (IVF-ET) 是目前常用的治疗不孕症的成熟技术之一, 自世界首例试管婴儿诞生至今已有20多年历史, 目前国内外报道IVF临床妊娠率为25%~50%左右[2], 中心2009年的妊娠率达到35.49%, 与文献报道相符。在实际工作中, 根据患者年龄、卵巢储备情况、子宫内膜等多方面因素综合考虑, 采用适宜的个体化的超促排卵方案以及改善体外培养条件, 提高操作熟练程度等可逐步提高IVF-ET的成功率。究其原因可能有: (1) 患者的年龄和卵巢功能与用药量、获卵数、卵子质量、胚胎质量、妊 (下转176页) (上接194页) 娠率有重要关系。随着年龄的增加, 卵泡数量减少, 卵子质量下降, 可供移植的胚胎减少, 从而使妊娠率, 种植率下降。反之, 年龄越轻, 卵子质量越好, 胚胎发育潜力越好, 妊娠率相应也会提高。 (2) 合理使用促排卵药物:由于IVF-ET技术水平的提高, 特别是GnRHa进行垂体降调节后再用促性腺激素刺激卵泡发育, 能有效防止卵泡过早黄素化, 改善卵子质量, 培育适宜的子宫内膜种植环境, 使妊娠率逐步提高。我们中心也在探索用不同剂量的GnRHa进行降调节, 效果比较令人满意。 (3) 制定严格的实验室操作流程:授精及胚胎培养的关键是培养条件及培养基系统, 尽量减少卵子和胚胎在空气中的暴露时间, 严格无菌操作, 我们用的培养系统为Quinn's HTF培养基, 得到的受精率与目前文献报道的受精率相似。 (4) 挑选了形态好、发育速度正常的胚胎进行移植, 移植最好在腹部B超引导下进行, 以保证胚胎着床的准确性。

参考文献

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[2]朝向阳, 王卓然, 韩燕燕, 等.体外受精与胚胎移植[J].实用妇产科杂志, 1998, 14:177.

[3]孙丽华, 项静英.国产人绝经期促性腺激素在控制性超排卵中的应用[J].生殖医学杂志, 2003, 12:234.

人的体外胚胎 篇6

1 资料与方法

1. 1 一般资料选取本院2012 年1 月~2013 年5 月进行体外受精- 胚胎移植的370 例患者作为本次研究活动的调查对象, 年龄最大34 岁, 最小25 岁, 平均年龄 (30.5±2.4) 岁, 所有患者取卵后卵子均实施体外受精 (IVF) 或卵胞浆内单精子显微注射 (ICSI) 使其受精, 并于受精后18~19 h观察受精情况, 25~26 h观察早期卵裂情况。其后依据胚胎有无观察到早期卵裂进行分组, 将观察到早期卵裂的作为实验组, 未观察到早期卵裂的作为对照组。

1. 2 方法所有患者主导卵泡直径均>15 mm, 数量≥ 3 个, 即可注射人绒毛膜促性腺激素, 剂量为10000 U, 待36 h后, 获取患者的卵子, 卵子在体外培养4 h后, 实施体外受精 (IVF) 或显微受精 (ICSI) 使其受精, 在卵裂液中进行胚胎培养, 其后采用微滴法设置培养基的环境, 温度为37℃ , CO2浓度为5%[2]。受精18~19 h后, 对受精的情况进行密切观察;受精25~26 h后, 对早期卵裂情况进行密切观察。移植时间为3 d后, 选取优质胚胎进行胚胎移植。优质胚胎的选取范围包括:实验组:出现早期卵裂, 第3 天卵裂球数量≥ 6 个, 第3 天胚胎评级达到Ⅱ级以上。对照组:第3 天卵裂球数量≥ 6 个, 第3 天胚胎评级达到Ⅱ级以上。对于第一次进入试管周期的患者移植2 枚胚胎, 对于2 次以上周期的患者移植3 个胚胎。胚胎移植15 d后, 检测患者血清 β- 人绒毛膜促性腺激素水平, 判断有无妊娠;待胚胎移植25 d后, 行B超检查后并判定宫内妊娠, 进行安胎, 直到妊娠周期达到13 周为止。

1. 3 观察指标观察两组移植后的着床率和妊娠率。第3天胚胎形态学评级标准依据卵裂球形态、数量以及胞质颗粒和碎片量[3]进行判定, 卵裂球数量≥ 6 个, 若卵裂球的形态标准, 大小对称匀称, 胞质清晰无异常, 无碎片, 视为Ⅰ级;若卵裂球的大小和形态对称或不对称, 胞质清晰无异常, 碎片<10%, 视为Ⅱ级;若卵裂球的大小和形态不具有规则性和匀称性, 可见胞质内颗粒, 碎片10%~50%, 视为Ⅲ级;若卵裂球的大小和形态不具有规则性和匀称性, 可见胞质内颗粒, 碎片>50%, 视为Ⅳ级。

优质胚胎的选取范围包括: 实验组:出现早期卵裂, 卵裂球数量≥ 6 个, 第3 天胚胎评级达到Ⅱ级以上;对照组:卵裂球数量≥ 6 个, 第3 天胚胎评级达到Ⅱ级以上。

1. 4 统计学方法采用SPSS17.0 统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差 ( ±s) 表示, 采用t检验;计数资料以率 (%) 表示, 采用 χ2检验。P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

370 例患者中对照组有243 个周期, 对移植患者抽血化验妊娠了86 个周期, 妊娠率为35.39%, 共移植胚胎507 枚, 着床101 枚, 胚胎着床率为19.92%。实验组有127 个周期, 对移植患者抽血化验妊娠了79 个周期, 妊娠率为62.20%, 共移植胚胎279 枚, 着床117 枚, 胚胎着床率为41.94%。两组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 。

3 讨论

近年来, 在临床辅助生殖技术上, 主要以提高妊娠率为主, 与此同时, 降低多胎率也受到了医疗界的广泛关注, 久而久之, 向单胚胎移植方向发展。然而, 判定胚胎能否着床主要体现在两个方面:①胚胎的质量;②子宫内膜的容受性。据有关学者研究显示, 影响体外受精- 胚胎移植失败的主要原因为妇女高龄, 这与子宫内膜容受性存在相关性, 若妇女的子宫内膜容受性降低会提高体外受精- 胚胎移植的失败率[4]。但是, 卵子赠送可以实施后, 高龄妇女的胚胎种植率与年轻妇女等同, 这一研究充分说明胚胎质量的重要性, 同时也是影响体外受精妊娠结局的关键因素。因此, 选择质量较高的胚胎显得尤为重要, 同时也是实现单胚胎移植的主要因素。

在以往的胚胎评估标准中, 主要分为原核期评分和胚胎形态学评分[5]。有关学者指出, 该方法评估胚胎发育潜能和单胚胎移植存在局限性, 应与早期卵裂相结合。与此同时, 有关学者对这一问题进行研究, 对卵子进行体外受精, 并于26 h后观察有无出现早期卵裂取得了较为显著的效果。结合本次实验结果可以发现, 370 例患者中对照组有243 个周期, 对移植患者抽血化验妊娠了86 个周期, 妊娠率为35.39%, 共移植胚胎507 枚, 着床101 枚, 胚胎着床率为19.92%。实验组有127 个周期, 对移植患者抽血化验妊娠了79 个周期, 妊娠率为62.20%, 共移植胚胎279 枚, 着床117 枚, 胚胎着床率为41.94%, 两组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 。由此可见早期卵裂在体外受精- 胚胎移植中的重要性和优越性。

综上所述, 早期卵裂对胚胎移植的选择起着决定作用, 同时可以使妇女的妊娠率和着床率得到明显提高, 进而为辅助生殖技术奠定良好基础。

摘要：目的 探讨早期卵裂在体外受精-胚胎移植中对胚胎选择的临床价值。方法 370例进行体外受精-胚胎移植的患者, 将观察到早期卵裂的胚胎作为实验组, 将未观察到早期卵裂的胚胎作为对照组。比较两组的着床率以及妊娠率。结果 370例患者中对照组有243个周期, 对移植患者抽血化验妊娠了86个周期, 妊娠率为35.39%, 共移植胚胎507枚, 着床101枚, 胚胎着床率为19.92%。实验组有127个周期, 对移植患者抽血化验妊娠了79个周期, 妊娠率为62.20%, 共移植胚胎279枚, 着床117枚, 胚胎着床率为41.94%。两组比较差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 早期卵裂在体外受精-胚胎移植中对胚胎选择有着重要的临床价值, 不仅提高着床率, 其妊娠率也可以得到明显提高, 进而为辅助生殖技术奠定良好基础, 值得临床广泛推广。

关键词：早期卵裂,体外受精-胚胎移植,胚胎选择,临床价值

参考文献

[1]江莉, 李慕军, 翟丹梅, 等.观察胚胎早期卵裂预测体外受精-胚胎移植妊娠结局的价值.现代妇产科进展, 2012, 21 (1) :40-42.

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幼羔胚胎体外生产技术研究进展 篇7

关键词：幼羔,胚胎体外生产,激素

幼羔胚胎体外生产(JIVET)技术是集幼羔的超数排卵与采卵、卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎体外培养和胚胎移植等技术为一体的生物工程技术体系。目前，利用幼羔卵母细胞进行胚胎体外生产已成为家畜繁殖学领域中研究的热点之一。科学家们从上世纪50年代起就对开发幼龄母畜的繁殖潜力进行了大量研究，试图通过早期利用幼龄母畜达到缩短育种周期的目的，但一直未能取得成功。进入20世纪80年代以后，由于家畜卵子体外培养和体外受精技术的发展，利用幼畜生产胚胎成为可能。旭日干等利用羔羊卵子通过体外受精技术培育出了第一例试管山羊。JIVET充分挖掘了优良母畜的生殖潜力，迅速扩大了良种覆盖率，尤其是超声波等活体采卵技术的应用、幼畜卵母细胞体外培养体系的建立与完善更是推动了此项技术的迅猛发展。

1 羔羊的卵巢发育与超排

在自然情况下，胎儿卵巢上的有腔卵泡大约出现在母羊妊娠期135 d，出生时有腔卵泡数量明显增加，之后继续增加，于羔羊出生后4～8周龄达到高峰，以后随着青春期的到来逐渐减少。由于出生后4～8周龄羔羊卵巢上的卵泡发育数量既不受出生季节和体重的影响，也没有成年羊卵巢上卵泡优势化的现象，因此对这个阶段的羔羊进行超排是一项高效率生产卵母细胞的新途径。然而，由于4～8周龄羔羊垂体机能尚未健全，不能分泌足够量的促性腺激素刺激卵巢活动，卵泡不能最终发育成熟而排卵，因此需要利用活体采卵技术采集卵母细胞。幼羔超排方法与成年羊超排类似，主要是利用外源促性腺激素(孕激素、促卵泡素和孕马血清等)刺激卵泡发育，进而获取性成熟前的羔羊卵母细胞。张锁链等以FSH或FSH-LH 4种不同处理方法对29只68～110日龄山羊羔进行处理，结果表明：采用FSH-LH(肌注)处理后得到的卵子在经体外受精后，其卵裂率明显高于其他方法得到的卵子的卵裂率。

2 卵母细胞的采集

目前，幼羔超排后对卵母细胞的采集主要是通过活体采集或屠宰后采集。由于活体采集卵母细胞后供体可以重复利用，因此，活体采卵已成为当今推广应用幼羔超排卵母细胞采集的一项关键技术。幼羔活体采卵方法主要有腹腔内窥镜采卵法及手术法。内窥镜法不需将卵巢及子宫暴露在体外，降低了生殖器官的粘连程度，可重复性高，减少对供体的刺激;手术法采卵对卵巢的观察比较直观，固定卵巢较容易，卵母细胞回收率稳定在90%以上，技术性要求较低。

3 羔羊体外胚胎发育能力

多数研究认为羔羊体外胚胎的发育能力较成年羊弱，有试验结果显示：羔羊卵母细胞在卵裂率和桑椹胚率方面都极显著低于成年羊的卵裂率和桑椹胚率。许多研究证实，超排羔羊作供体所生产的体外胚胎经胚胎移植后可以成功妊娠，并能够正常繁育后代，移植妊娠率为12.5%～60%，产羔率为16.7%～45.9%。最近有研究进一步证实，玻璃化冷冻保存羔羊卵母细胞也可以成功生产后代。

4 存在的问题与研究方向

通过幼畜激素处理获得大量的卵母细胞，然后在体外受精并经移植获得健康后代，现已成为一条新的快繁路线。但是，羔羊超排胚胎移植到母体子宫内后的发育力弱，胚胎丢失率偏高，移植妊娠率低于成年母畜。国内外学者从供体的选择、激素处理方案、激素处理后卵巢反应、重复超排、卵母细胞发育能力、胚胎冷冻等角度研究了卵母细胞的形态、超微结构、能量代谢、蛋白质合成及基因表达，结果表明，卵母细胞胞质发育不成熟直接导致了幼畜较低的胚胎发育能力。关于激素处理后个体反应差异和卵母细胞体外发育能力研究等将是本领域的重点方向。加强供体选择、优化激素处理方案及完善体外培养体系，并从形态、生理、生化及遗传角度筛选能够代表供体卵巢应答反应能力的标志因子将有助于问题的解决;同时在充分考虑幼畜体况、营养水平及环境条件等因素下，从基因组及表观遗传学方面揭示幼畜卵母细胞发育本质，也有助于优化和完善幼羔胚胎体外生产技术。

综上，JIVET在国内外研究比较广泛，而利用幼畜作供体生产体外胚胎效率较低是一个普遍问题，因此需要进一步研究卵母细胞的体外成熟、体外受精及胚胎体外培养，不断完善幼畜胚胎体外培养系统，从而提高体外胚胎的生产效率。尽管存在不少问题，但从4～8周龄羔羊卵巢中所得的卵母细胞在移植入受体后仍可发育成健康后代。此技术的应用近年来已经越来越商业化，这也促进了与其他成熟繁殖技术的结合，使JIVET的效率逐步提高，未来可能会产生可观的商业价值。

参考文献

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人的体外胚胎 篇8

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2012年1月—2013年12月接诊的拟接受IVF-ET治疗的34对夫妇, 纳入标准:因单纯输卵管致使不孕;不孕不育症年限超过1年;女性年龄均在40岁以下;经子宫输卵管造影检查发现, 双侧输卵管均堵塞, 但不存在输卵管积水现象;不存在内膜异常和宫腔畸形;内分泌正常;男性接受男科检查, 不存在器质性和明显功能上的异常情况;根据世界卫生组织《人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检查手册》所拟定的标准对精液进行常规检查[3], 未表现出异常情况;夫妇双方经染色体检查, 均无异常情况。34对夫妇中女性平均年龄为 (30.77±3.3) 岁, 男性平均年龄为 (32.12±3.9) 岁, 精液量为1.5~7.0 m L, 平均 (3.29±1.2) m L, 精液密度为24×106~255×106/m L, 平均密度为 (114.9±60.9) ×106/m L。

1.2 方法

1.2.1 超促排卵方法

给予本次研究的34例女性长期促排卵治疗, 对其卵泡进行检测, 当有一个主导卵泡直径超过18 mm, 经查血黄体生成素 (LH) 低于5 U/L, 孕酮 (P) 低于16 mmol/L, 且超声监测到的卵泡数量与血雌二醇 (E2) 值相符合, 此时即可停止促性腺激素 (Gn) , 肌注人绒毛膜促性腺激素 (h CG) 10 000 IU, 36 h后即可在阴道超声下进行穿刺取卵。

1.2.2 精液处理及精子形态学分析

术前要求男方提前3 d~7 d禁欲, 并在取卵当日通过手淫法获取精液, 提前准备好无菌Falcon取精杯, 取精后迅速装入其中, 室温下充分液化, 运用密度梯度离心法、美国SAGE公司所生产的Pure Ception梯度液对精液进行处理, 对精子的浓度进行调节, 使其控制在1.7×106~2.1×106/m L范围内。从中取出100μL, 并运用矿物油 (M-8410) 将其覆盖, 然后将其放置到5%CO2、温度37℃的培养箱中, 以备体外受精所用[4]。另从调精后的精液中取100μL作为精液标本, 将取出的精液放置到玻片上涂片, 每例患者准备2张精液涂片, 采用400倍镜对制作好的玻片进行观察, 确保每个视野中最少有40条精子。待涂片风干后, 使用瑞典DB公司生产的Diff-Quick进行染色处理, 经显微镜油镜观察, 可以看到每张玻片至少有200个精子;运用Kruger's严格标准法对玻片进行判别, 并对畸形精子和正常形态精子进行记录。

1.2.3 体外受精-胚胎移植

将卵子进行4 h~6 h预培养, 即可用于受精, 每个卵子中加入10万~15万个精子, 放置到5.5%CO2、温度37℃的培养箱中进行培养。在16 h~18 h后即可对受精情况进行确认, 若卵细胞中出现2个原核, 则确定为正常受精;第2天或第3天即可安排患者接受胚胎移植。本次研究的优质胚胎评价标准为:卵裂球大小稍不均匀或均匀, 有碎片点低于25%或无碎片;优质胚胎率=优质胚胎/胚胎总数×100%;卵裂率=卵裂数/正常受精卵子数量×100%。

1.3 妊娠诊断标准[5]

在完成胚胎移植后, 4周后经超声诊断可观察到妊娠囊, 6周后可观察到胎心搏动, 此时即可确诊为临床妊娠。

1.4 精子形态标准轻度畸形:精子正常形态率为5%~14%;严重畸形:精子正常形态率低于5%。

1.5 统计学方法

运用统计学软件SPSS15.0对本次研究数据进行分析, 计量资料以均数±标准差表示, 采用t检验。非正态分布数据通过M (P25, P75) 表示, 采用秩和检验, P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 精子形态情况分析

本次研究的34例患者中, 29例表现为畸形精子, 其中25例为轻度畸形, 4例为严重畸形;5例精子形态正常。

2.2 精液处理前后相关指标对比

通过密度梯度离心法处理后, 精子的活动力有显著提升, 且对比活动力a、b, 其处理后有明显上升 (P<0.01) , 见表1。29例畸形精子患者中, 处理后其正常精子形态有一定的改善;经过处理后, 轻度精子畸形患者中9例患者精子正常率恢复到了正常水平, 而严重畸形组患者的精子正常形态率平均提升5%, 见表2。

2.3 不同形态精子处理前精液各项指标情况对比

正常组与异常组患者的精子密度和活动力均无明显差异 (P>0.05) ;而正常组精子正常形态率明显高于异常组 (P<0.05) 。见表3。

2.4 精子形态对IVF及胚胎发育的影响

除卵裂率正常组优于异常组 (P<0.05) , 其余指标均与异常组无明显差异 (P>0.05) , 见表4。处理后2组患者的各项指标均无明显差异 (P>0.05) , 见表5。

3 讨论

在对IVF治疗的判断中, 精子质量是非常重要的一项指标, 而静置的形态主要是对精子的功能、质量进行反映。有研究者通过观察发现[6], 头部异常的畸形精子经常因运动速度缓慢, 而导致无法迅速通过输卵管壶腹部, 与卵子实现有效受精。这主要是由于精子的头部存在着一种蛋白, 当该蛋白缺乏时, 就可能会引起顶体异常表现, 进而致使精子无法与卵子透明带进行有效的结合, 故无法有效受精。此外, 机体高水平的活性氧也会致使精子质膜出现过氧化反应, 这就会致使精子的活力和形态出现异常变化, 给受精带来影响。目前, 关于精子体外受精的作用以及其形态的评定标准, 仍然存在较大的争议性。有报道表示, 在IVF结局的预测中, 精子形态起到了非常关键的作用。另有报道却并不认同此观点, 其表示IVF的结局与精子的形态之间并无关联性[7]。鉴于此, 本次研究我们选取了34对接收IVF-ET治疗的夫妇, 重点是了解精子的形态是否会对IVF结局带来影响。

在《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》 (2010年, 第五版) 中, 就对正常精液提出了非常明确的参考值, 尤其是关于形态学的部分引起了学界的共同关注。有学者表示在该手册中, 其所明确的精子形态学、精子活动力等相关参考值评估标准, 并无相关医学研究的支持[8]。在该手册中指出, 正常的精子形态临界值应当为4%, 但有学者通过研究表示, 将正常形态的参考值设置为4%过低, 并不利于临床治疗和诊断。另还有学者也对上述观点提出了赞同, 并对手册中的正常形态精子的评估结果提出了质疑。鉴于此, 在本研究中, 我们仍然以世界卫生组织拟定的《人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检查手册》作为评估标准, 故本研究在临床中仍然具有一定的指导价值。

有国外研究报道指出[9], 若正常形态精子百分率低于5%时, 其IVF受精率会低于30%, 致使受精受到影响。该项报道建议采用卵泡浆内单精子注射 (ICSI) 方案给予患者治疗, 为此, 本研究将精子正常形态率低于5%的视为严重畸形精子, 并安排其接受ICSI治疗。以往有报道发现[10], 精子的形态应当与其活力、密度等各项参数进行综合评估, 才能够更好地判断IVF治疗结局和男性生育能力。在本研究中, 受精的过程中, 使加精的最终密度保持在10万条a+b级精子/卵子, 这使得可能对精子形态造成影响的外界因素被排除。此外, 本次研究选取卵子受精率100%的患者, 尽可能地降低卵子自身所造成的受精变化。

根据本研究结果来看, 正常组精子正常形态率明显高于异常组, 对比差异有统计学意义 (P<0.05) , 2组密度、活动力对比差异无统计学意义 (P>0.05) ;正常组卵裂率显著优于异常组 (P<0.05) , 2组正常受精率、优胚率、妊娠率对比差异无意义 (P>0.05) 。由此可知, 在体外受精-胚胎移植治疗中, 精子形态不会对其结局造成任何影响。有文献指出[11], 精子的功能与其正常形态有着非常紧密的联系, 若精子为头部缺陷, 那么可能导致其速度下降;若为顶体异常, 则可能致使精子的受精能力受到影响。此外, 还有研究者提出精子正常形态与其密度也有较大联系。而本次研究中, 通过对比处理前后精子密度和活动力, 发现正常组与异常组无明显差异, 笔者认为这可能与在形态学分类上较为严格有较大关系, 同时还可能是由于本研究选取的样本量较小所致。

通过对比密度梯度法处理前后的结果, 可以看到处理后精子的正常形态率有明显改善, 与处理前对比差异有统计学意义 (P<0.01) ;而通过对畸形精子处理后进行分析, 结果显示, 轻度畸形组精子正常率均恢复到了正常水平, 严重畸形组精子正常形态率平均提升5%。表明通过密度梯度离心法处理可有效提高精子的正常形态率, 但是否会对IVF治疗结局造成影响还需要进一步深入研究。

根据本研究结果显示, 在体外受精-胚胎移植治疗中, 精子形态不会对治疗结果造成影响, 但若对畸形精子进行密度梯度离心法处理后, 可使其正常精子形态率得到提高。然而由于精子形态的分析结果可能会受到其他方面因素的影响, 并且评判标准、染色方法、技术人员主观判断等都可能致使结果出现偏差, 这方面的技术还需要我们进一步加强, 这也将是我们未来共同努力的主要方向。

摘要：目的 探讨精子形态对体外受精-胚胎移植 (IVF-ET) 治疗结局的影响。方法 选取我院2012年1月—2013年12月接诊拟接受IVF-ET治疗的34对夫妇, 采用密度梯度离心法对精液进行处理, 再运用Diff-Quick进行染色处理, 对精子形态及治疗结局进行分析。结果 29例为畸形精子, 其中25例为轻度畸形, 4例为严重畸形者, 5例正常精子形态。精液通过密度梯度离心法处理后, 精子的活动力显著提升, 且对比活动力a、b, 其处理后有明显上升。29例畸形精子患者中, 处理后其正常精子形态也有一定的改善, 轻度精子畸形患者中9例患者精子正常率恢复到了正常水平, 而严重畸形组患者的精子正常形态率平均提升5%。处理前, 正常组与异常组患者的精子密度和活动力均无明显差异, 正常组精子正常形态率明显高于异常组;处理前, 卵裂率正常组优于异常组, 处理后, 2组患者正常受精率、卵裂率、优胚率、妊娠率均无明显差异。结论在体外受精-胚胎移植治疗中, 精子形态不会对治疗结果造成影响, 但若对畸形精子进行密度梯度离心法处理后, 可使其正常精子形态率得到提高。

关键词：体外受精-胚胎移植,精子形态,治疗结局影响

参考文献

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人的体外胚胎 篇9

患者, 34岁, 再婚。因停经54天, 腹痛1天, 加重3小时, 于2010年11月3日急诊入院。患者平素月经规律, 经期3～4天, 周期30天, G6P1, 人工流产3次, 两次异位妊娠行双侧输卵管切除术。末次月经为2010年9月10日, 于2010年10月1日行体外受精-胚胎移植 (IVF-ET) , 移植后无异常。入院前1天, 无诱因突然左侧腹部持续性钝痛, 伴有左腰背部放射痛, 无恶心、呕吐。于入院前3小时腹痛加重, 伴头晕、心慌、乏力, 无肛门坠胀感, 无尿频、尿急、恶心、呕吐、腹泻等症状。体格检查:T 36.7℃, R 20/min, P 100/min, BP 90/60 mm Hg。意识清楚, 痛苦面容, 被动体位, 心肺正常。腹软, 左侧腹压痛明显, 无反跳痛, 无肌紧张, 无移动性浊音。肝脾肋下未扪及。左肾区叩击痛阳性。妇科查体:外阴正常, 阴道未见异常分泌物。宫颈光滑, 举痛, 宫体前位, 大小正常, 轻压痛, 活动。双侧附件区均可扪及6 cm×7 cm包块, 左侧附件区有压痛。血常规检查示:WBC 16.44×109/L, RBC 4.35×1012/L, Hb 135 g/L, HCT0.394。尿常规正常。血β-HCG>15000 U/L。盆腔超声检查:宫内可见约4.9 cm×1.8 cm胎囊样光环, 似蜕膜样回声, 未见明显胎芽及胎心闪动, 子宫左侧和右后方可见多个囊泡样回声, 最大4.4 cm×3.0 cm, 边界清楚, 盆腔少量积液。见图1。双肾超声检查:左肾下极、腰大肌前方可见9.7 cm×6.0 cm的不均质包块, 边界欠清, 形态不规整, 内可见不规则液性暗区, 包块位于肾固有筋膜外, 与肾下极关系较密切, 肾周围可见1.4 cm积液, 其内可见酷似胎囊的光环, 大小约2.5 cm×2.7cm, 内可见胚芽和卵黄囊, 胚芽长0.5 cm, 未见明显胎心, 见图2。强化CT检查:左肾区及腰大肌前方可见团状混杂密度影, 内可见不规则略高密度影及低密度区, 团块边界欠清, 下缘达盆腔水平, 内可见血管影及造影剂外漏, 见图3。子宫体积较大, 双侧附件区可见多发囊状影。阴道后穹隆穿刺抽出淡黄色液体2 ml。初步诊断:IVF-ET后;后腹腔异位妊娠;稽留流产?立即行剖腹探查术, 经左下腹进入后腹腔, 见左侧后腹腔腰大肌前方有20 cm×10 cm大小的积血块, 上界达左肾下极。清理积血块, 于左肾下极近腹主动脉旁见一完整胎囊及绒毛组织, 约2.5 cm×2.5 cm大小, 局部有活动性出血, 取出绒毛组织。见图4, 局部止血。探查:肾表面光滑、大小正常、无肿物和破裂口。超声监视下行吸宫术:探宫腔9 cm, 吸出蜕膜样组织, 未见绒毛。超声检查宫腔内无组织物残留。病理检查报告:吸宫组织物见蜕膜样组织, 灶性腺体分泌亢进;肾下极血块中散在绒毛组织;后腹腔取出物血块中见绒毛组织。术后监测血β-HCG逐渐下降, 11月19日测血β-HCG 51 U/L。出院诊断:后腹腔异位妊娠。

2讨论

异位妊娠是指受精卵在子宫体腔以外着床并发育, 是妇产科常见的急腹症, 发生率约为1%[1], 有逐年上升的趋势。随着辅助生殖技术 (ART) 的发展, 异位妊娠发生率更高[2]。最为常见的异位妊娠是输卵管妊娠, 占异位妊娠的95%, 还可见卵巢妊娠、腹腔妊娠、宫颈妊娠、子宫残角妊娠等[1]。发生在后腹腔的异位妊娠非常罕见, 国内外文献报道不足10例, 其中国内报道仅2例[3,4]。后腹腔异位妊娠发病的机制不清楚, 推断: (1) 可能是受精卵经输卵管脱落到腹腔并着床在后腹膜表面生长, 因腹腔肠袢挤压, 使孕卵向腹膜后生长, 当胚胎发育到一定程度时, 破裂出血形成后腹膜血肿[2];本例患者虽然已行双侧输卵管切除, 行IVF-ET, 但不排除受精卵可能经输卵管断端进入腹腔, 发生异位妊娠, 继而发生后腹腔妊娠的可能。因此, 建议在切除输卵管时, 输卵管断端要充分电凝, 减少受精卵的溢出, 避免异位妊娠的发生。 (2) 孕卵经血管、淋巴管转移到后腹腔, 在后腹腔种植生长而发生异位妊娠。此机制可能与妇科恶性肿瘤, 如滋养细胞肿瘤的血行转移, 宫颈癌、子宫内膜癌的淋巴转移类似[3]。国外曾报道1例双侧输卵管切除术后, 行IVF而发生后腹膜异位妊娠, 认为发病机制可能经淋巴管种植。本病例与国外报道的病例相似, 也不除外孕卵在移植过程中, 合体滋养细胞分泌蛋白溶解酶, 溶解子宫内膜细胞、间质及血管, 孕卵经血管或淋巴管转移到后腹腔, 而发生后腹腔妊娠的可能。本病例诊断明确: (1) IVF-ET后有闭经、腹痛、特别是腰背痛; (2) 有内出血体征; (3) 血β-HCG值升高; (4) 超声检查发现后腹腔包块, 包块内见到胎囊, 胎囊内见到胚芽; (5) 影像学检查证实后腹腔包块; (6) 术中证实后腹腔血肿并于血块中找到胚胎组织; (7) 病理检查证实。后腹腔异位妊娠的治疗以手术治疗为主, 剖腹探查既可明确诊断, 又可清除血肿达到彻底止血目的。临床上也有保守治疗成功的报道[3], 主要应用滋养细胞抑制剂, 如甲氨蝶呤、米非司酮等, 还可应用中药治疗。通过该病例的诊治提示我们对于IVF-ET后有腹痛、特别是腰背痛者要警惕后腹腔妊娠的可能, 可通过超声、CT等多项检查, 及时做出明确诊断, 减少误诊。

参考文献

[1]乐杰主编.妇产科学[M].7版.北京:人民卫生出版社.2008:105-110.

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