规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查（通用7篇）

篇1：规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

安徽省猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

目的 了解安徽地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染状况.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自安徽省14个地(市)的468份血清样品进行PCV2抗体检测,并运用PCR技术同步进行PCV2核酸检测.结果 PCV2抗体检测的平均阳性率为74.36%,且阳性率随猪的日龄增长而升高,皖南地区的阳性检出率明显高于淮北和江淮两个地区,PCR与ELISA检测结果的`符合率为99.37%.结论 安徽省猪群中普遍存在PCV2的感染,病毒血症与抗体共存现象显著.

作 者：李超 魏建忠 R英济 谢倩 孙裴 李郁  作者单位：李超,魏建忠,孙裴,李郁(安徽农业大学动物科技学院,合肥,230036)

R英济(安徽巢湖畜牧兽医局,巢湖,238000)

谢倩(安徽省产品质量监督检验研究院,合肥,230051)

刊 名：中国微生态学杂志  ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF MICROECOLOGY 年，卷(期)： 22(4) 分类号：S852.65 关键词：猪圆环病毒2型   流行病学   ELISA   PCR  

篇2：规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

圆环病毒病会引起断奶后仔猪多系统衰弱综合征（PMWS）及猪皮炎肾病综合征，同时还能引起母猪繁殖障碍、新生仔猪先天性震颤、增生性坏死性肺炎和肠炎等疾病，同时也是猪呼吸道病综合征的原发病原之一。

近年越来越被猪病专家重视的免疫抑制病中，圆环病毒病和猪瘟、蓝耳病相提并论。杨汉春老师2009年在学术年会上指出目前国内PVC2呈高感染率，在病死猪组织样本中检出率几乎达100%。

在实际生产中，PCV2单独感染的情况较为少见，通常为混合感染。Eng等对美国101个猪场中PMWS相关因素进行研究发现，PMWS阳性样本中最普遍的混合感染为蓝耳病病毒（72%）、猪肺炎支原体（69%）、猪链球菌（69%）和猪流感病毒（55%）。

我国学者陈义祥等调查显示，圆环病毒2型与蓝耳病病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流感病毒混合感染的病料占57.73%，其中与蓝耳病病毒混合感染比例最高，约51.85%。近年我国有关PCV2混合感染的调查多限于病毒病，本文主要针对病毒病的混合感染情况做了统计，结果发现PCV2与蓝耳病毒的二重感染最为严重，约50.27%，该结果与国内外报道趋势相一致。截至目前，流行病学和试验数据表明，单独的PCV2感染并不能足以引起疾病的临床表现，但并发或继发细菌或病毒感染却可使死亡率大大增加。

混合感染的普遍性可能与PCV2感染导致免疫抑制有关，感染猪血液中单核细胞增加，T细胞（主要是CD4+）和B细胞数量减少，并出现低密度的未成熟粒细胞，导致免疫抑制。由于圆环病毒发病猪细胞免疫功能显著降低，缺乏有效的免疫应答能力，必然出现严重的继发感染，如副猪嗜血杆菌、链球菌、巴氏杆菌等的侵袭。

需要说明的是，目前可导致猪群发生免疫抑制的病原主要包括猪瘟病毒、蓝耳病病毒、圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒及猪肺炎支原体等。最近研究表明，PCV2常见于肺炎支原体感染的支气管周围淋巴组织区域，且肺炎支原体可促进圆环病毒的感染。

篇3：规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

近年来欧美各国的防制经验表明,对PCV2感染的特异性防制措施很难奏效,至今没有有效的疫苗可以用来预防PCV2感染[4]。因此,加强对该病的监测尤为重要。笔者所在实验室成功建立了检测PCV2抗体的间接ELISA方法[5,6],这对淘汰抗体阳性猪特别是阳性种猪具有重要意义。为了解吉林省部分地区PCV2的流行情况,笔者于2010年3月对吉林省5个地区万头以上猪场的300份血清样本进行了PCV2抗体的血清学检测。

1 材料与方法

1.1 血清样本

样品采自吉林省长春市双阳区、榆树市、吉林市、辽源市、白城市的万头以上规模化猪场,共300份血清样品。采样猪包括种公猪、繁殖母猪、仔猪,通过耳静脉或前腔静脉无菌采血,分离血清,置-20℃冰柜保存备用。

1.2 检测试剂

PCV2 ORF2重组蛋白抗原由笔者所在的吉林农业大学动物科技学院预防兽医学实验室制备并保存;辣根过氧化物酶标记兔抗猪IgG,新生犊牛血清等均购自北京鼎国生物有限公司。

1.3 间接ELISA检测方法

采用笔者所在的吉林农业大学动物科技学院预防兽医学实验室建立的间接ELISA方法检测PCV2抗体。基本方法如下:(1)抗原包被。(2)洗涤4次。(3)封闭:用0.5%新生犊牛血清PBST封闭液,37℃封闭2 h。(4)加待检血清:用血清稀释液将待检血清1∶40稀释,加入酶标板,100 L/孔,设阴、阳性血清对照孔各1个,置37℃温育60 min,洗涤4次。(5)加HRP-兔抗猪IgG(1∶1 000稀释)100 L,洗涤4次。(6)每孔加新配制的底物溶液100 L,显色15 min。(7)终止反应:每孔加50 L终止液,用酶联仪测定OD490值。(8)结果判定:OD490≥0.39时为阳性,否则为阴性。

2 调查结果

检测结果见表1,300份血清共检出阳性结果为155份,总阳性率为51.67%,5个地区猪场均检测出阳性猪。其中30日龄内仔猪血清共47份,检出总阳性率为12.77%;种公猪血清共194份,检出总阳性率为56.19%;经产母猪血清共59份,检出总阳性率为67.80%。

3 讨论

3.1 本试验样品来自吉林省5个地区的大型养殖场,具有一定的代表性。从检测结果分析,被检猪场均有不同程度的PCV2感染,总抗体阳性率为51.67%,其中种公猪总阳性率为55.2%;经产母猪总阳性率为69.5%。初生仔猪感染率较低约为12.77%,可能是由于孕猪感染PCV2后通过胎盘垂直感染给仔猪,种公猪与经产母猪的感染率偏高,可见PCV2感染率随猪只年龄增长呈升高趋势。郎洪武等[7]应用ELISA方法对我国七个省市不同猪场的559份血清样品进行PCV2检测,总阳性率达42.9%。笔者于2007年采集179份血清样品来自吉林省不同猪场,不同品种,检测结果总阳性率为42.5%[6]。由此可见,本试验检测结果高于郎洪武等及笔者报道的检测结果。说明,PCV2在吉林地区猪群中的感染是普遍存在的,而且逐年增多,流行趋势加大,应该及时采取有效措施进行防治。

3.2 本试验仅为PCV2血清学检测,对吉林地区该病的诊断应与临床症状、病理剖检、实验室病原学诊断相结合,最终得出准确结论。

3.3 猪圆环病毒对机体最主要的损害是使机体免疫功能受损,从而造成免疫抑制,进而引发其他病原的并发、继发感染[8,9],例如支原体病、猪繁殖与呼吸综合症、伪狂犬病等。目前,尚无控制和消灭PCV2感染的有效措施,也无切实可行的商品疫苗和药物来防止PMWS的发生。因此,对猪场开展流行病学调查,加强对该病的监测,对血清阳性猪进行病原学定性诊断,及时淘汰阳性种猪,从根本上建立清净健康猪群具有重要意义。同时,加强科学的饲养管理、建立健全防疫体系、定期驱虫、提高猪群的免疫抗病力[10],防止疫病的发生和发展有一定的现实意义。

参考文献

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篇4：规模化猪场圆环病毒病的防控

关键词：猪；圆环病毒病；危害；防控

中图分类号：S858.28 文献标识码：A文章编号：1674-0432（2012）-09-0242-2

1 猪圆环病毒病的危害

1.1 PCV2感染所致疾病

1.1.1 仔猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS） 主要影响6～10周龄的猪，很少影响哺乳的猪，一般于断奶后2～3d或l周开始发病。病死率约为8%～35%。由于细菌、病毒的二重感染，常常使PMWS的症状复杂化、严重化，造成保育仔猪群极大的经济损失。

1.1.2 猪皮炎与肾病综合征（PDNS） 主要发生于保育猪和生长育肥猪，可单独发病，也可与PMWS同时发生。PDNS的发生原因主要是由免疫反应介导的损害皮肤和肾脏的血管疾病。

1.1.3 呼吸道疾病 PCV2常与PRRSV、支原体、副猪嗜血秆菌、链球菌、传染性胸膜肺炎放线秆菌、附红细胞体等呼吸道病原体协同作用，造成严重的呼吸道疾病。一旦发病，药物的临床治疗效果均不佳。

1.1.4 肠炎 PCV2感染可以造成哺乳仔猪、仔培猪和育肥猪的腹泻，临床上此类病例很多，药物治疗往往效果不好。

1.1.5 母猪繁殖障碍 PCV2感染可导致母猪出现繁殖障碍，感染猪群的临床表现主要有流产、早产，产死胎、木乃伊胎，产弱仔和仔猪断奶前死亡率升高。同时，PCV2常与PRRSV混合感染引起母猪繁殖障碍，这种情况危害性更大，应引起重视。

1.1.6 先天性震颤 在仔猪出生后第1周，可因严重的震颤不能吃奶而死亡，活过1周的仔猪可以存活下来，多数在3周时间恢复。震颤为双侧，主要影响骨骼和肌肉，当卧下或睡觉时震颤消失，外界刺激可引发或加重震颤，如声音或温度刺激；有的在整个生长和发育期间都不断发生震颤。病因主要是母猪在怀孕阶段感染了病毒。

1.2 剖检病变

患猪消瘦，贫血，皮肤苍白，黄疽（有20%的病猪出现黄疸的现象）。部分猪全身弥补斑点状出血及坏死灶。解剖后，肺出现间质性肺炎，并有暗红色实变；淋巴结异常肿大，切面为均匀的灰白色；肝脏发暗，呈不同程度的花斑状外观，萎缩，肝小叶间结缔组织增生；胆囊表面有坏死灶；肾脏出现水肿，苍白，被膜下有白色米粒大小的坏死灶；脾脏轻度肿大，质地如肉；胰、小肠和结肠也常有肿大及坏死病变。另外，仔猪断奶后多系统衰竭综合征的特征病变：患猪全身淋巴结肿大。大体解剖可见肺斑点状出血、胃溃疡。猪皮炎与肾炎综合征（PDNS）的特征病变：特征性的显微损害为全身性坏死性脉管炎和纤维蛋白坏死性肾小球肾炎。大体解剖可见肾肿大、皮质苍白，有大量红色点状出血斑；脾脏肿大，出现梗死；腹股沟淋巴结肿大出血，关节及肠道出血。猪只在繁殖障碍的特征病变：病理损害为肝脏慢性淤血，心肌肥大，严重的非化脓性、纤维素性或坏死性心肌炎。

1.3 PCV2感染可导致猪群的免疫抑制

已有的研究表明，PCV2具有免疫抑制特性。PCV2感染猪的淋巴细胞可使循环B细胞和T细胞的数量下降，淋巴器官中的T、B淋巴细胞数量减少，淋巴组织中巨噬细胞浸润，外周血和淋巴组织中的巨噬细胞/单核细胞数量升高，因此PCV2感染猪群由于免疫功能下降，使猪群对其他病原体的抵抗能力大大降低。因此，PCV2感染的潜在危害很大。存在PCV2感染的猪群，可表现为猪群的健康水平下降，免疫功能受到抑制，对疾病的抵抗力下降，易继发或并发其他细菌性或病毒性疾病。

2 猪圆环病毒病的控制措施

本病无有效治疗方法，应尽做好防疫措施，避免感染此病毒。由PCV2感染引起的免疫抑制對养猪生产潜在的危害很大，控制猪圆环病毒病总的原则应采取综合性的预防和控制措施，最大限度地降低其造成的危害和经济损失。

2.1 加强营养

由于PCV2感染可以导致猪群的免疫功能下降，因此营养是影响PMWS、呼吸道疾病、繁殖障碍等疾病发生的一个重要因素。通过加强营养以提高猪群对其他病原微生物的抵抗力，从而降低继发感染的发生率和由此造成的损失。主要可采取如下措施：①适当添加免疫增强因子，如微生态制剂、特定功能性氨基酸、黄芪多糖原粉等；②把控好原料关，避免使用发霉、变质的原料；③注意营养平衡、氨基酸之间的平衡、蛋白质之间的平衡等。

2.2 控制好饲养环境

2.2.1 加强室内环境卫生与消毒工作 将消毒卫生工作贯穿于养猪生产的各个环节。最大限度地降低猪场内污染的病原微生物，减少或杜绝猪群细菌性和病毒性继发感染的机率。由于PCV2对一般的消毒剂抵抗力强，因此在消毒剂的选择上应考虑使用敏感的消毒药。

2.2.2 加强室内温湿度的控制 温湿度控制可参照1进行。

2.2.3 做好室内通风 作好猪舍的通风、换气，改善猪舍的空气质量，降气浓度；保持猪舍干燥，降低猪群的饲养密度。

2.3 加强管理

2.3.1 执行全进全出制度 规模化猪场应彻底实现养猪生产各阶段的全进全出至少要做到产房和保育舍的全进全出。避免将不同年龄的猪混群饲养，从而减少和降低猪群之间PCV2的接触感染机会，尽可能地降低猪群的感染率。

2.3.2 接种猪圆环病毒疫苗 发病猪场可用猪圆环病毒疫苗给后备母猪、生产母猪及仔猪进行接种。接种疫苗后通过ELISA试剂盒进行抗体检测，以调整免疫程序及对疫苗优劣进行选择。

2.3.3 作好其他疫病的免疫接种 在PCV2感染猪场应作好猪瘟、猪伪狂犬病和猪气喘病的控制，尤其是应尽最大努力把猪瘟控制好，否则会造成猪群的高死亡率。此外，由于PMWS最易发生于断奶后的仔培猪，因此建议猪场在保育阶段减少疫苗的使用，尽量做到在这一阶段不用疫苗，将其他疫苗提早在哺乳阶段或转群后使用。

2.4 做好药物防治工作

2.4.1 采用抗菌药物，减少继发感染 适当使用药物控制猪群的细菌性继发感染。PCV2感染的危害更多地体现在感染猪群的继发感染或合并感染。PCV2感染猪群由于免疫功能的损害，易引起一些细菌性的继发感染，因此建议断奶仔猪每吨饲料中添加阿莫西林150g、强力霉素150g，连续15天；母猪产前一周、产后一周，每顿饲料添加150g阿莫西林、2.5kg、15%金霉素、1.2kg利高霉素进行治疗，同时应用促进肾脏排泄和缓解类药物进行肾脏的回复治疗；采用黄芪多糖注射液并配合维生素B1+B12+Vc肌肉注射；选用新型的抗病毒剂如干扰素、白细胞介导素、免疫球蛋白、转移因子等进行治疗。

2.4.2 进行药物治疗 ①高热蓝毒康A+B配合黄芪多糖注射液，每天2次，连用5d；②青、链霉素+板蓝根注射液+地塞米松注射液，每天3次，连续5d。

2.4.3 肌注猪白细胞干扰素，每日1次，连用3～5d，同时配合中草药抗病毒制剂

猪圆环病毒病潜在危害很大，但只要采取合理的综合性防控措施，加强饲养管理，就可以最大限度地降低其危害。

网络出版时间：2012-11-12 13：26：52

篇5：某猪场猪2型圆环病毒感染的诊断

1 材料与方法

1.1 病料

解剖疑似PMWS病死猪, 采集肝脏、脾脏、肺脏、淋巴结等组织作为病料。

1.2 方法

1.2.1 引物设计与合成

根据已发表的PCV2的ORF2序列, 设计合成了一对检测引物, 产物长度为265 bp。

上游引物:5'-TAGGTTAGGGCTGTGGCCTT-3'

下游引物:5'-CCGCACCTTCGGATATACTG-3'

引物由上海生工生物技术有限公司合成。使用前溶于超纯水中, 稀释至100μmol/L, 工作浓度为20 pmol/L, -20℃保存。

1.2.2 病毒DNA的提取

取1 g病料组织, 放入玻璃匀浆器中匀浆2～3次, 使细胞充分破碎, 制成悬浮液, 反复冻融3次。4℃6 000 r/min离心15 min取上清, 加入蛋白酶K至终浓度150 mg/L, SDS至终浓度0.5 g/L, 50℃水浴消化3 h。加入等体积酚∶氯仿∶异戊醇 (25∶24∶1) , 混匀, 4℃12 000 r/min离心10 min, 小心吸取上清, 再用等体积酚∶氯仿∶异戊醇提取液提取1次, 直至中间蛋白层清亮。吸取上层水相加入1/10体积3 mol/L NaAC及2倍体积的无水乙醇, -20℃沉淀过夜。4℃12 000 r/min离心10 min, 再用70%乙醇洗涤沉淀2次, 弃上清液, 超净台内吹干, 将沉淀溶解于pH 8.0 TE缓冲液中。

1.2.3 PCV2 ORF2基因片段的PCR扩增

建立25μl反应体系:10×PCR Buffer 2.5μl, dNTP Mixture 2μl, 上、下游引物各0.5μl, 上述提取的DNA模板4μl, Taq酶0.15μl, 加超纯水至25μl。PCR反应条件:94℃预变性5 min;94℃变性1 min;52℃退火1 min;72℃延伸1 min, 30个循环;72℃延伸7 min。PCR产物于1%的琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。

2 结果与分析

2.1 临床症状

患病猪临床表现为精神沉郁, 食欲减退, 体温40℃左右, 生长发育不良, 渐进性消瘦, 被毛粗糙, 肌肉萎缩, 皮肤与可视黏膜中度苍白。大部分病猪表现呼吸困难、咳嗽等呼吸症状, 有些有腹泻症状, 体表淋巴结特别是腹股沟淋巴结肿大。

2.2 病理变化

剖检可见全身淋巴结肿大出血, 切面硬度增加, 尤其是腹股沟浅淋巴结、肠系膜淋巴结、支气管淋巴结及颌下淋巴结。肺脏肿胀, 呈弥散性、间质性病变, 有的硬如橡皮, 严重出血病例整个肺呈紫褐色。肝脏有不同程度的萎缩, 严重病例肝小叶结缔组织增生明显, 有的可见肝硬化。脾脏肿大, 切面呈肉样变化。肾脏水肿, 呈灰白色, 有的肾表面有大小不等的出血点。回肠和结肠段肠壁变薄, 盲肠和结肠黏膜充血和出血。

2.3 PCR扩增结果

PCR扩增产物经1%的琼脂糖凝胶电泳鉴定片段大小。结果表明, 利用PCR方法扩增出了265 bp的目的片段, 与预期片段大小相符, 见图1。

3 小结

猪2型圆环病毒病是目前严重威胁养猪业发展的一种病毒性传染病, 发病仔猪以呼吸道症状为主, 由于PCV2感染所引起的各类疾病的临床症状和病理变化并不典型, 因此使该病的临床确诊十分困难, 所以最好借助实验室手段来进行最后的确诊。PCR是一种快速、简便、特异和易于操作的方法, 得到了广泛的应用, 在PCV2诊断方面也取得了巨大的进步。本次发病在临床初步确诊的基础上, 采用PCR方法进行了实验室诊断, 最终确诊为猪2型圆环病毒感染。

目前, 还没有完全有效的疫苗可以预防PCV2的感染。PCV2损害患畜免疫器官, 使机体抵抗能力下降, 易继发附红细胞体、放线菌杆菌、支原体、链球菌等, 所以使用单一疫苗免疫很难奏效。及时有效的做好其他常见疫病的免疫接种, 如猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病等, 可以提高猪群的免疫水平, 增强机体对PCV2的抵抗力。

篇6：规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

1 材料与方法

1.1 血清样品

2008~2012年5年间, 从西昌市境内的规模场和散养户中随机采集2月龄以上未免疫过PCV2苗的健康猪血清1 078份, 其中规模场有267份, 散养户有811份。

1.2 诊断试剂

PCV2 ELISA抗体检测试剂盒购自武汉某动物生物制品有限公司, 批号分别为070907、090301、100301、110301、110906、120201。

1.3 试验方法及步骤

1.3.1 取抗原包被板, 每孔加入稀释好的洗涤液2 0 0 μL, 静置3 min倒掉液体, 并在吸水纸上拍干, 共洗涤2次。再分别将稀释好的待检血清和阴阳对照标准液各取100μL加入到抗原包被板孔中, 轻轻摇匀孔中样品 (勿溢出) , 然后置37℃温育30 min。

1.3.2 甩掉板孔中的溶液, 每孔加入稀释好的洗涤液200μL, 静置3 min倒掉, 再在吸水纸上拍干, 共洗涤5次。

1.3.3 每孔加羊抗猪酶标二抗100μL, 置37℃温育30 min。

1.3.4 洗涤5次, 方法同1. 3.2。

1.3.5 每孔先加底物液A 1滴 (50μL) , 再加底物液B 1滴 (50μL) , 混匀, 室温 (18~25℃) 下避光显色10 min。

1.3.6 每孔加终止液1滴 (50μL) , 10 min内测定结果。

1.3.7结果判定。在酶标仪上检测各孔OD630值, 阳性对照孔的平均OD630值≥0.70, 阴性对照孔的平均OD630值≤0.30。判定标准:样品OD630值>0.42判为阳性, 0.42≥样品OD630值≥0.38判为可疑, 样品OD630值<0.38判为阴性。

2 结果

2.1 PCV2抗体检测结果

从2008年到2012年5年间, 分别用PCV2 ELISA抗体试剂盒进行检测, 共检测血清样品1 078份, 检出阳性731份, 阳性率为67.81%。其中, 规模场样品有267份, 检出189份呈阳性, 阳性率为70.79%;散养户样品有811份, 检出阳性542份, 阳性率为66.83% (详见表1) 。从表中数据可推出, PCV2阳性率呈逐年上升趋势 (见图1) , 平均阳性率为67.81%。

3 结论与分析

2008~2012年, 猪血清样品中PCV2的阳性率分别为16.19%、53.98%、64.14%、76.78%、85.60%, 平均阳性率为67.81%, 比2007~2012年的阳性率 (分别为41.7%、52.0%、44.1%、37.0%、40.5%和33.3%) 高出许多, 与2008~2011年的阳性率 (分别为36.77%、55.85%、65.75%和72.32%) 基本一致。如此高的阳性率说明猪PCV2的感染率较高, 并且呈逐年上升的趋势, 提示当地养殖户应引起高度重视。另外, 规模养殖场的感染率比散养户的阳性率高:最低相差6.89个百分点, 最高相差27.08个百分点, 说明规模化养殖方式与散养户相比, 存在的问题更多、更严重。

%

针对西昌市猪群中PCV2感染日趋严重的现状, 笔者分析有以下几点因素:

3.1 管理不善

产地、屠宰及流通环节的消毒卫生管理不完善是造成疫病发生和蔓延的原因之一。与其他地区一样, 西昌市生猪疫病防控技术水平整体较低, 今后应加强对从业人员的技术培训, 帮助规模场建立健全生物安全措施, 同时加强饲养管理, 而降低饲养密度尤为重要。

3.2 引种不当

外地引种和购入新猪时的引种处理措施不当可能是导致PCV2感染率不断攀升的主要原因。不到疫区引种, 严格进行引种检疫是应对这一问题的关键。

3.3 免疫接种工作不到位

研究证明, 接种PCV2疫苗有良好的效果, 但西昌地区的猪场基本没有免疫PCV2疫苗的习惯。实践证明, 制定科学的免疫程序, 定期开展血清学监测, 及时掌握疫情动态, 做好基础免疫与强制免疫是防控PCV2最有效的方法。

PCV主要侵害猪的免疫系统, 造成机体免疫机能低下, 从而更易感染其他病原, 这也是猪群多病原混合感染的重要原因之一。西昌市未免疫猪群中, PCV2抗体有着如此高的阳性率, 预示着猪群发生疫情的风险较高, 有关部门和从业者应当引起高度重视, 做好防范措施。

摘要：为了掌握西昌市猪圆环病毒2型的感染情况, 本试验从2008年到2012年5年间, 随机采集未免疫过猪圆环病毒2型 (PCV2) 苗的血清样品共1078头份, 用PCV2 ELISA抗体检测试剂盒进行检测。结果表明:PCV2血清抗体阳性率每年分别为16.19%、53.98%、64.14%、76.78%、85.60%, 总体呈逐年上升的趋势。该调查结果为制定西昌市猪群PCV2感染的防控措施奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒病,酶联免疫法,血清,流行病学

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篇7：规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查

1 材料与方法

1.1 待检血清

2007年7月份—2008年6月份, 采集云南省部分区县猪场不同时期和不同生长阶段的未经PCV-2疫苗免疫猪群的血样381份, 分离血清, 置于-20 ℃冰柜中保存, 备用。

1.2 主要试剂及仪器

猪圆环病毒IgG抗体快速检测试剂盒, 购自深圳市绿诗源生物技术有限公司;ELX800型酶标仪, 美国Biotek Instrument Inc公司产品。

1.3 PCV-2抗体的间接ELISA血清学检测

使用方法及检测结果观察按照试剂盒说明书进行。

1.4 结果判定

以空白孔调零, 在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于0.6, 阴性对照孔平均OD630值小于0.2。样品OD630值大于0.42判为阳性;样品OD630值在0.38～0.42之间判为可疑;样品OD630值小于0.38判为阴性。

2 结果 (见表1)

共检血清样本381份, 其中阳性血清158份, 总阳性率为 41.5 %。哺乳仔猪的PCV-2抗体阳性率在不同类型猪中最高, 为45.8 %, 所检测的9个地区中PCV-2抗体阳性率最高的为52.6%。用SAS进行统计分析, 结果表明, 不同地区之间猪群PCV-2抗体阳性率无显著差异 (P>0.05) ;以时期、地区、猪类型为3个因素, 分析其对PCV-2抗体阳性率的影响, 结果表明, 时期、地区2个因素对PCV-2抗体阳性率无显著影响, 而不同类型猪对阳性率有显著影响。泌乳仔猪和后备母猪的PCV-2抗体阳性率差异显著 (无互作三因素方差分析) 。

3 讨论

(1) PCV-2和与其相关的猪病已在全世界范围内发生和流行, 给养猪业造成了严重的影响。欧阳素贞等[3]报道在豫北地区4个城市的多个猪场不同日龄猪群中的总阳性率为40.6%。宋建国等[4]对甘肃省酒泉、张掖、武威、兰州、临夏、白银、定西七市 (州) 及青海省大同地区进行了PCV-2感染血清学调查, 发现PCV-2抗体阳性率为58.45%。本试验结果表明, 云南省各地区猪群PCV-2 的感染分布仍较广, 且抗体阳性率也处于较高水平。

(2) Junghyun K等[5]对PCV-2感染的季节变化进行2年的回顾性研究发现, 每个月均有PMWS病病例的发生, 但高峰期出现在4— 6月份。而赵茂荣等[6]的研究表明, 冬、春、夏、秋四季PCV-2抗体的阳性率依次递减。本研究结果与之不完全相同, 不同时期感染调查结果显示:除断奶仔猪2007年下半年PCV-2 抗体阳性率比2008年上半年的略低外, 其他生长阶段猪群的2007年下半年PCV-2抗体阳性率均高于2008年上半年。这可能与云南省气候类型丰富多样和复杂的地理环境有关, 也可能与本次试验取样的猪场的饲养管理条件不同有关。

(3) 有研究表明, 在同一群体内, 猪的年龄越大, PCV-2抗体阳性率越高[7], 本次的调查结果与以上结论稍有不同。本试验结果显示, 哺乳仔猪的PCV-2抗体阳性率 (45.8%) 高于断奶仔猪的PCV-2抗体阳性率 (41.6%) , 而断奶仔猪的PCV-2抗体阳性率又高于育肥猪的抗体阳性率 (39.7%) 。这种差异可能与母源抗体的水平有关。Allan G M等[8]发现, PCV-2在猪群中既存在水平传播也存在垂直传播, 即哺乳仔猪可以从母体获得抗体。本次调查中各采样区县经产母猪的PCV-2抗体水平都较高 (44.0%) , 经过垂直传播后哺乳仔猪的血清抗体阳性率也较高;随着母源抗体的逐渐减少甚至消失, 育肥猪表现出较低的PCV-2抗体阳性率。本次试验所出现的这种猪年龄与PCV-2抗体阳性率的不同, 与垂直传播有关还是与取样个体及样本数量有关, 还需要进一步证实。

摘要：为了解云南省猪圆环病毒2型 (PCV-2) 的感染状况, 试验采用间接ELISA方法对从云南省部分规模化猪场采集的未经PCV-2疫苗免疫的猪只血样进行抗体阳性率检测。结果表明:所有被检猪场均存在PCV-2感染, PCV-2抗体总阳性率为41.5%。哺乳仔猪PCV-2抗体阳性率最高, 为45.8%;后备母猪最低, 为35.7%。表明云南省规模化猪群中存在较为严重的PCV-2感染和流行。

关键词：云南省,猪圆环病毒2型,流行病学调查,ELISA

参考文献

[1]MEEHANB M, MCNEILLY F, TODD D, et al.Characterization ofnovel circovirus DNAs associated with wasting syndromes in pigs[J].Journal of General Virology, 1998, 79:2171-2179.

[2]OPRIESSNIG T, THACKER E L, YUS, et al.Experimental repro-duction of postweaning multisystemic wasting syndrome in pigs bydual-infection withMycoplasma hyopneumoniaeand Porcine circo-virus type 2[J].Vet Pathol, 2004, 41:624-640.

[3]欧阳素贞, 张福良, 王双山.豫北地区猪圆环病毒2型感染的血清学调查[J].安徽农业科学, 2008, 36 (4) :1451-1452.

[4]宋建国, 高生智, 魏润生.规模化猪场猪圆环病毒2型 (PCV2) 的血清学调查[J].中国兽医科技, 2004, 34 (12) :26-28.

[5]JUNGHYUN K, HAN-KOOK C, TAEWON J, et al.Postweaningmultisystemic wasting syndrome of pigs in Korea:prevalence, micro-scopic lesions and coexisting microorganisms[J].J Vet Med Sci, 2002, 64 (1) :57-62.

[6]赵茂荣, 杨汉春, 郭鑫, 等.北京地区规模化猪场猪圆环病毒2型感染的血清学调查与分析[J].中国兽医杂志, 2007, 43 (12) :85-86.

[7]TISCHER I, BODE I, PETERS D, et al.Distribution of antibodies toPorcine circovirus in swine population of different breeding farms[J].Archives of Virology, 1995, 140 (4) :737-743.