气相色谱法测定人血清中三种邻苯二甲酸酯类物质含量

气相色谱法测定人血清中三种邻苯二甲酸酯类物质含量（通用3篇）

篇1：气相色谱法测定人血清中三种邻苯二甲酸酯类物质含量

鞋底材料中16种邻苯二甲酸酯类化合物的气相色谱-质谱法测定

建立了超声震荡提取、硅胶小柱净化、气相色谱-质谱法测定鞋底材料(聚氯乙烯、热塑性橡胶、橡胶、聚氨酯、热塑性聚氨酯、飞龙和乙烯-醋酸乙烯共聚物)样品中16种邻苯二甲酸酯的方法.比较了索氏萃取与超声萃取的提取效果.以及硅胶、氧化铝、硅胶-氧化铝混合小柱的`净化效果,本实验选择的萃取及净化条件为:常温下用二氯甲烷超声提取目标物40 min(功率180 w),经硅胶小柱净化分离后,用25.0 mL 乙酸乙酯/正己烷混合液(8:2,v/v)淋洗,淋洗液用氮气吹扫浓缩后进行GC-MS法测定.该方法的标准加入回收率为61.3%(DMP)～85.5%(DIDP,DDcP),相对标准偏差为1.3%～9.6%(n=6,O.50mg/L),检出限为4.3(DBP)～30.O(DIJP)μg/g(3d).

作 者：林芳 温裕云 洪小燕 弓振斌 Lin Fang Wen Yuyun Hong Xiaoyan Gong Zhenbin 作者单位：林芳,Lin Fang(厦门大学,海洋与环境学院,厦门,361005;福建远东技术服务有限公司,泉州,36)

温裕云,洪小燕,弓振斌,Wen Yuyun,Hong Xiaoyan,Gong Zhenbin(厦门大学,海洋与环境学院,厦门,361005)

刊 名：分析仪器 ISTIC英文刊名：ANALYTICAL INSTRUMENTATION年，卷(期)：“”(2)分类号：O6关键词：邻苯二甲酸酯 鞋底材料 超声提取 硅胶小柱 气相色谱-质谱法

篇2：气相色谱法测定人血清中三种邻苯二甲酸酯类物质含量

1实验部分

1.1主要仪器与试剂

D ionex U ltim ate 3000-Q Exative超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱仪(美国Therm o Fisher公司);M A R S 5微波萃取仪(美国C EM公司);R etch SM 2000织物研磨仪(德国R etch公司);氮吹仪(青岛海科仪器有限公司);中性氧化铝固相萃取柱(A gilent公司,规格为0.5 g/3 m L);H eidolph 4003旋转蒸发仪(德国H eidolph公司);0.22μm滤膜(美国A npel公司);固相萃取装置(美国Supelco公司)。

标准品均由美国百灵威公司提供,相关信息见表1,各组分的标准储备液和混合标准储备液均用甲醇配制。乙酸铵(纯度99.9%)和色谱纯甲醇均由美国Fisher公司提供,甲酸(纯度98.0%)由日本TC L公司提供,分析纯试剂均由广州化学试剂厂提供,实验用水为经M illi-Q纯水系统处理的去离子水。

1.2样品前处理

样品前处理按文献[7,8,9]进行,将皮革样品剪碎成小块后,用织物研磨仪磨成粉末,称取1.0 g样品,置于微波萃取管中,进入15 m L乙腈,100℃下微波萃取30 m in,冷却至室温,用鸡心瓶收集萃取液,残渣用15 m L乙腈再次微波萃取,合并萃取液,将其旋转蒸发至近干。转移鸡心瓶至氮吹仪中,用干燥氮气缓慢吹干。用10 m L甲醇溶解残留物,转移至中性氧化铝固相萃取柱中(用5 m L甲醇进行预活化),使液体缓慢流下,再用10 m L甲醇分3次淋洗萃取柱,收集洗脱液。将洗脱液旋转蒸发至近干后,转移至氮吹仪中,用干燥氮气缓慢吹干。残留物用1 m L甲醇溶解,所得溶液经0.22μm滤膜过滤后进行U PLC/O rbitrap H R M S分析。必要时,可先进行适当稀释。

1.3分析条件

1.3.1色谱条件

色谱柱:H ypersil G O LD(100 m m(2.1 m m(1.9μm);流动相:0.1%甲酸(含5 m m ol/L乙酸铵)(A)/甲醇(B),洗脱梯度见表2;柱温:40℃;样品室温度:7℃;进样量:1.0μL;流速:0.3 m L/m in。

1.3.2质谱条件

可加热电喷雾离子源,喷雾电压3 500 V;辅助气加热温度350℃,毛细管温度320℃;正离子电离(ESI+)模式,辅助气流速10 L/m in,鞘气流速30 L/m in;全扫描方式,扫描范围m/z150~m/z 500,分辨率70 000;选择离子模式定量,选择离子提取窗口宽度5 ppm,精确质量数和保留时间定性,23种邻苯二甲酸酯类增塑剂的U PLC/O rbitrap H R M S分析参数见表3。

2结果与讨论

2.1萃取条件的优化

微波辅助萃取效率受萃取溶剂种类、萃取温度、萃取时间、萃取溶剂体积以及萃取方式影响,其中关键因素是萃取溶剂种类,经优化[7,8,9],微波辅助萃取条件最终确定如下:以乙腈为萃取溶剂,100℃下连续2次微波萃取30 m in。

2.2萃取液的净化

皮革基体复杂,大量杂质伴随目标分析物一起被萃取出来,严重干扰目标分析物的测定,因此必须先进行净化处理,固相萃取柱净化则是最常用的一种净化手段[21]。不同固相萃取柱的填料、净化原理及目标分析物的回收率各不相同,考察了中性氧化铝柱、H LB柱、LC-C 18柱、Sep-Pak柱、硅藻土柱等几种萃取柱的净化效果及对目标分析物的回收率,同时对淋洗方式进行了优化,实验结果表明,中性氧化铝柱的效果最好,用10 m L甲醇分3次淋洗时,目标分析物的回收率最高[4,5,6,7,8,9]。

2.3分析条件的优化

分别以甲醇/水、乙腈/水为流动相,在水相中还可添加一定量的甲酸,或同时添加一定量的乙酸铵,改变流动相的起始组成和洗脱梯度,观察各组分的保留时间、各组分之间的分离度及响应值的变化,实验结果表明,当流动相为乙腈/水时,各组分的响应值均明显小于流动相为甲醇/水时的响应值,并且D M P、D M O EP等组分的保留时间过小;即使在水相中添加甲酸或同时添加乙酸铵,这种情况亦无明显改善。因此,选择甲醇/水作为流动相,先改变流动相的起始组成和洗脱梯度,考察各组分分离度的变化,实验结果表明,在此流动相下,D N P与D IN P、D D P与D ID P、D B P与D IB P这3组同分异构体之间始终没法分开。在水相中添加不同浓度的甲酸,发现这3组同分异构体的分离情况得到明显改善,当甲酸添加量为0.1%时,分离效果最好,D N P与D IN P之间基本分开,D D P与D ID P、D B P与D IB P之间虽分离不完全,但已不影响定量。在此水相中继续添加不同浓度的乙酸铵,考察响应值的变化,结果发现,加入乙酸铵后响应值明显增大,且乙酸铵浓度为5 m m ol/L时各组分的响应值增加最多,此时各组分的分离度也几乎不受影响。因此,流动相最终确定为甲酸/0.1%甲酸(含5m m ol/L乙酸铵),具体洗脱梯度见表2。在此条件下对23种邻苯二甲酸酯类增塑剂混合标准溶液进行分析,得到各组分的提取离子色谱图(见图1),利用各组分的保留时间和提取离子的精确质量数可进行定性。

2.4方法的线性关系和检出限

用甲醇配制一系列的混合标准溶液工作液,按上述方法进行测定,用各组分的提取离子色谱峰面积对其质量浓度(ρ)作图,结果发现,对于每种邻苯二甲酸酯类增塑剂,其提取离子色谱峰面积与质量浓度(ρ)之间均存在良好的线性关系,线性相关系数均大于0.997,表4给出了各组分的保留时间(tR)和线性关系。在3倍信噪比(S/N=3)的条件下,确定各组分的检出限(LO D),也列于表4中。

2.5方法的回收率和精密度

以不含目标分析物的皮革样品为空白基质,在1.0 g空白样品中添加不同浓度的混合标准溶液,共制备3个不同浓度水平的加标样品,每个加标水平制备9个平行样,按上述方法进行分析,测定各组分的回收率,计算方法的平均加标回收率和精密度,结果见表5,方法的平均加标回收率为80.3%~95.6%,精密度(R SD,n=9)为3.2%~9.9%。

2.6实际样品测试

应用本文建立的方法对市售皮革样品进行测试,测试对象共47个,包括18个皮革样品和29个皮革制品,结果在2个样品中检出了不同含量水平的D B P、D IB P、D IN P和D EH P,表6给出了2个阳性样品的测试结果。

3结论

以乙腈为萃取溶剂,100℃下微波萃取皮革及其制品中的邻苯二甲酸酯类增塑剂,萃取液经中性氧化铝固相萃取柱净化后,进行U PLC/O rbitrap H R M S分析,外标法定量,从而建立了一个同时测定皮革及其制品中23种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量的液质联用分析方法,该方法采用保留时间和准分子峰的精确质量数进行定性,采用提取离子色谱峰面积进行定量,定性可靠,定量准确,检出限低至0.1~2.0μg/kg,可完全满足皮革及其制品中邻苯二甲酸酯类增塑剂含量检测工作的需要。

摘要：建立了同时测定皮革及其制品中23种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量的超高效液相色谱/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC/Orbitrap HRMS)方法,该方法以乙腈为萃取溶剂,微波萃取皮革及其制品中的邻苯二甲酸酯类增塑剂,萃取液经中性氧化铝固相萃取柱净化后,进行UPLC/Orbitrap HRMS分析,外标法定量。目标分析物的分离在Hypersil GOLD色谱柱(100 mm×2.1 mm×1.9μm)上进行,流动相为甲醇/0.1%甲酸溶液(含5 mmol/L乙酸铵),电离模式为电喷雾正离子(ESI+),利用保留时间和准分子峰的精确质量数进行定性,利用提取色谱峰面积进行定量。23种邻苯二甲酸酯类增塑剂在其线性范围内均有良好的线性关系,线性相关系数均大于0.997,方法的加标平均回收率为80.3%~95.6%,相对标准偏差(RSD)均小于10%(n=9),检出限为0.1~2.0μg/kg。该方法简单快速,灵敏度高,检出限低,为开展皮革及其制品中邻苯二甲酸酯类增塑剂水平的调查与监测提供了技术支持。

篇3：气相色谱法测定人血清中三种邻苯二甲酸酯类物质含量

关键词：PU人造革 N，N-二甲基甲酰胺 气相色谱-质谱联用法

中图分类号：TS107 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2013）22-0020-03

PU是Polyurethane的缩写，中文名为聚氨基甲酸酯，简称聚氨酯。广泛用于汽车制造、冰箱制造、交通运输、土木建筑、鞋类、合成革、织物、机电、石油化工、矿石机械、航空、医疗、农业等许多领域[1]。N，N-二甲基甲酰胺，英文名称N，N-Dimethylformamide简称DMF，是一种无色有氨气味的液体，被称为万能有机溶剂，在聚氨酯生产行业中，主要用于湿法合成革生产，作为洗涤固化剂起着重要的作用[2]。但因其具有很强的毒性，对中毒者有如下症状：头痛、焦虑、恶心、呕吐、腹痛、甚至便秘等。严重者能损坏肝功能，可出现黄疸[3]。目前欧盟化学品的注册、评估、授权和限制的法规（REACH法规）已经将该物质列为高关注物质[4]。为了维护消费者的安全和健康，因此很有必要对PU人造革中DMF的残留量进行检测。目前文献尚无PU人造革中DMF含量的气相色谱-质谱联用测定法。仅有一篇报道检测纺织品中N，N-二甲基甲酰胺的含量测定本实验室通过对提取方法和色谱、质谱条件的改进，建立了PU人造革中DMF的测定方法，该法简单、快速、灵敏度高、准确性好，可广泛用于PU人造革中DMF的检测。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

气相色谱-质谱联用仪7890A-5975C MSD（美国安捷伦公司）

超声波清洗仪DL-820B（中国上海之信仪器有限公司）

索氏提取仪2050（丹麦福斯公司）

N，N-二甲基甲酰胺标准品（CAS No.68-12-2，纯度99.8%）（德国DR公司）

甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈等所用试剂均为色谱纯。

1.2 分析步骤

1.2.1 样品的制备和提取

取具有代表性PU试样，剪碎至5mm×5mm以下，混匀。称取1.00g（精确至0.02g）样品，置于50ml的玻璃试管中，加入20ml二氯甲烷，使所有试样浸没于液体中，混匀后，将反应容器密闭，置于超声波清洗仪中超声30min，过出滤液，再加入20ml二氯甲烷，重复超声1次，合并提取液于100ml浓缩瓶中，于30℃水浴中用旋转蒸发仪缓慢浓缩至约剩2.0ml，用二氯甲烷溶解并定溶至5.0ml，取上清液过0.2μm的滤膜，上机测定。

1.2.2 GC-MS分析条件

毛细管色谱柱：HP-INOWax（30m×0.25mm×0.25μm）；

进样口温度：200℃；

流速1.2mL/min；

程序升温：50℃保持3min，以10℃/min升到150℃继续以50℃/min升到230℃保持2min。

电离方式：电子轰击离子化（EI）；

电离能量：70eV；

测定方式：选择离子扫描；

进样方式：不分流进样；

质量扫描范围：35～100amu；

溶剂延迟：6min；

质谱接口温度：240℃；

四极杆温度150℃，质谱离子源温度270℃。

1.2.3 标准溶液

将N，N-二甲基甲酰胺标准品，用二氯甲烷配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液。然后用移液枪吸取适当体积的N，N-二甲基甲酰胺标准储备液，用二氯甲烷稀释至0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/mL标准溶液系列。

2 结果与讨论

2.1 提取溶剂及条件的选择

通过对阳性样品进行超声波萃取，然后通过上机检测目标物质浓度的办法，比较不同溶剂的提取效率，分别对实验室常用的有机溶剂：二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、乙腈、丙酮进行了比较。所得结果见表1。由表格中数据可见：二氯甲烷与乙腈提取效果相似，但在随后的处理过程中，由于乙腈的浓缩条件比二氯甲烷的要求高很多，所以本文选择用二氯甲烷作为本方法的提取溶剂。

2.2 选择不同的提取方式

目前前处理方法最常用的有：超声波萃取法、索氏提取法、机械振荡法等。本方法采用含有N，N-二甲基甲酰胺的阳性样品进行实验，实验结果发现超声波萃取法与索式提取法及机械振荡的萃取效果均没有太大区别。由于索式提取操作很繁琐，不仅耗时较长，而且耗用消耗品多；而超声波清洗仪在实验室普遍应用，所以选超声波提取法作为本实验的提取方式。表2为不同提取方式的结果比较。

2.3 提取时间的选择

选择了二氯甲烷作为提取溶剂，常温超声提取法作为提取方式，下面就提取时间做了一个比较。见表3。

从表3中的数据可以看出，提取结果没有多大的差别，提取1次后，样品也需要用二氯甲烷淋洗，所以本文选择用二氯甲烷超声波提取2次。

2.4 仪器条件的选择

2.4.1 色谱柱的选择

比较了DB-5MS、DB-35MS、HP-INNOWax 3种极性不同的色谱柱分析效果，结果发现使用DB-5MS和DB-35MS两种柱子时，峰形拖尾严重，不适合该方法的检测；而使用HP-INNOWax进行检测时，样品谱图基本无杂峰干扰，得到的峰形对称。所以选择HP-INNOWax毛细管色谱柱。

2.4.2 进样口温度的选择优化

通过对不同进样口温度进行试验，比较了150、180、200、220、240℃时的谱图，结果表明200℃下N，N-二甲基甲酰胺的灵敏度最高。因此进样口温度选择了200℃。

2.5 定性定量方式的选择

在实验过程中，首先通过全扫描方式（GC-MSD/SCAN）做出N，N-二甲基甲酰胺的TIC图，然后根据其质谱图中的碎片离子选择了丰度相对较高的碎片离子73、44、58作为定性和定量的特征目标监测离子。该化合物的色谱图见图1，DMF的响应时间为9.29min。

2.6 线性关系和测定低限

在方法所确定的实验条件下，对标准溶液在一定浓度范围内进行测定，样品中DMF的浓度范围在0.5～10μg/mL内浓度与峰面积有良好的线性系，相关系数r=0.9998。

采用实际样品加标方式进行实测得出方法检出限，本方法N，N-二甲基甲酰胺的检测低限为0.5mg/kg。

2.7 回收率试验及精密度试验

对回收率试验和精密度试验采用样品加标的方式进行，添加高水平为10mg/L低水平1mg/L，用外标法进行定量，回收率试验和精密度试验结果详见表4。

3 结语

本文建立了一种气相色谱-质谱联用方法，用于检测PU人造革中N，N-二甲基甲酰胺的含量，实验表明该前处理方法简单，提取效率高，仪器方法灵敏度高，精密度好，可用于作为鞋、手袋原材的PU革中N，N-二甲基甲酰胺残留的检测。

参考文献

[1]Kumar，A.，Singh，K.Isolation of high quality RNA from phyllanthus emblica and its evaluation by downstream applications.Molecular biotechnology[J].2012，52（3），269-275.

[2]辛晓乐，李宏光.DMF回收过程专家区域协调控制系统设计[J].化工学报，2008，59（7）：1854-1858.

[3]夏玉婷，陈晓东，王彩生，束长亮，汪旸，二甲基甲酰胺毒性的研究进展[J].环境与健康杂志，2011， 28（9）：707-709.