尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

2024-04-12

尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测(共7篇)

篇1:尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

摘要:尿微量白蛋白是临床上检测肾损伤最可靠的诊断指标.为实现尿微量白蛋白快速无试剂检测,本文采用多光程方式得到207例尿液样品可见-近红外双波段的多光程光谱,基于多光程光谱的非线性特性,获得更多样品成分含量的信息.在首先进行PLS建模的.基础上,使用PLS-ANN建模方法引入非线性信息,对样本的可见-近红外波段多光程光谱与尿微最白蛋白实际含量建立回归模型.通过对比,使用PLS- ANN建模方法可得到更好地建模预测效果,提高定量分析精度,预测决定系数达0.951 1,预测标准误差为5.02mg・L-1.研究结果表明,可以在不需加入试剂的前提下,使用多光程可见-近红外光谱较准确预测尿液微量白蛋白的含量,为实现无试剂的方便、快捷检测尿液微量白蛋白含量以及其他成分含量奠定了基础. 作者: 李刚[1]赵[1]刘蕊[2]王慧泉[1]林凌[1]张宝菊[3]吴晓荣[3] Author: LI Gang[1]ZHAO Zhe[1]LIU Rui[2]WANG Hui-quan[1]LIN Ling[1]ZHANG Bao-ju[3]WU Xiao-rong[3] 作者单位: 天津大学精密测试技术及仪器国家重点实验室,天津,300072天津大学精密测试技术及仪器国家重点实验室,天津300072;天津市人民医院检验学部,天津300121天津师范大学物理与电子信息学院,天津,300387 期 刊: 光谱学与光谱分析 ISTICEISCIPKU Journal: Spectroscopy and Spectral Analysis 年,卷(期): 2011,31(9) 分类号: O657.3 关键词: 尿微量白蛋白 近红外光谱 偏最小二乘 人工神经网络 多光程 机标分类号: R72 R31 机标关键词: 尿微量白蛋白近红外光谱检测Infrared Spectroscopy尿液微量白蛋白成分含量准确预测建模方法试剂检测非线性特性定量分析精度近红外波段红外双波段PLS诊断指标预测效果信息实际含量尿液样品决定系数基础 基金项目: 国家自然科学基金

篇2:尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

基于可见/近红外光谱的鹅鸭混合绒定量检测研究

摘要:鹅绒和鸭绒的外观相似但在品质上鹅绒优于鸭绒,各国羽绒毛标准对鹅绒毛中的.鸭绒毛含量都有最高限定.传统检测方法为高倍显微镜目测法,该方法劳动强度大,且不适宜大批量样本的分析及现场快速检测.利用可见/近红外光谱结合连续投影算法(SPA)特征波长选择的建模方法对鹅绒中混有鸭绒含量进行了定量检测.在450~930 nm范围内,通过SPA选择的8个特征波长建立多元线性回归模型,取得了较好的预测结果,相关系数为0.983,校正均方根误差(RMSEC)为5.44%,预测均方根误差(RMSEP)为5.75%,有望用于羽绒毛品质的快速检测. 作者: 徐惠荣[1]宋保国[2]万旺军[2]周莹[1]应义斌[1] Author: XU Hui-rong[1]SONG Bao-guo[2]WAN Wang-jun[2]ZHOU Ying[1]YING Yi-bin[1] 作者单位: 浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江杭州,310058浙江出入境检验检疫局,国家级羽毛绒检测重点实验室,浙江杭州311208 期 刊: 光谱学与光谱分析 ISTICEISCIPKU Journal: Spectroscopy and Spectral Analysis 年,卷(期): ,32(4) 分类号: S123 关键词: 羽绒品质 定量分析 可见/近红外光谱 连续投影算法 波长选择 机标分类号: D9 TS9 机标关键词:近红外光谱混合检测研究Analysis均方根误差鸭绒特征波长羽绒毛现场快速检测鹅绒多元线性回归模型显微镜目测法建模方法预测结果相关系数投影算法绒毛品质劳动强度检测方法含量 基金项目: 国家自然科学基金项目,浙江省科技计划项目 基于可见/近红外光谱的鹅鸭混合绒定量检测研究[期刊论文]光谱学与光谱分析 --2012,32(4)徐惠荣宋保国万旺军周莹应义斌鹅绒和鸭绒的外观相似但在品质上鹅绒优于鸭绒,各国羽绒毛标准对鹅绒毛中的鸭绒毛含量都有最高限定.传统检测方法为高倍显微镜目测法,该方法劳动强度大,且不适宜大批量样本的分析及现场快速检测.利用可见/近红外光谱结合...

篇3:尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

人体血红蛋白(Hb)是一种存在红细胞中负责运载氧的蛋白质,测定其浓度可用于判断贫血和体内铁的营养状况等,是重要的临床生化指标。利用可见-近红外(VIS-NIR)光谱建立快速测定Hb的方法是近年来重要研究方向[1,2,3,4]。由于血液是一种多组分的复杂体系,血液光谱分析需要消除噪音干扰,光谱测量方式和模型稳定性是需要改进的两个重要方向[5,6]。由于全血样品非常黏稠,光线透过全血时会产生散射,从而出现噪音干扰,降低光谱分析精度;并且Hb存在于血细胞的内部,检测Hb还需克服细胞膜的噪音。用蒸馏水稀释全血样品可以把血细胞破碎,得到溶血液样品;分析溶血液样品的光谱,将可望提高Hb的分析精度,但是还没有这方面的工作报道。本文采用偏最小二乘(PLS)方法结合波段优选和稳定性,建立人类溶血液样品Hb的可见—近红外分析模型。

PLS回归可以对光谱数据进行综合筛选,提取信息变量,是有效的光谱建模方法。但很多实验结果表明,波段选择对于PLS模型是必要的,因为在波段不适当的情况下(如噪音过多、信息过少),模型效果不佳。另一方面,模型客观性和稳定性在光谱分析中具有重要意义,许多实验结果表明光谱分析的定标集和预测集的不同划分会导致预测效果和模型参数的波动,因此会产生不稳定的结果,由于实验工作量大,既往的研究中很少涉及到模型稳定性的讨论。基于定标集和预测集的多个不同划分建立近红外分析模型,可以讨论模型的稳定性。此外,为了避免模型评价失真,在建模过程中还需要基于一定的相似性划分定标集和预测集。综上,本文基于随机性、相似性和稳定性,通过定标集、预测集、检验集的三个建模环节,得到客观、稳定的分析模型。

1实验与方法

1.1实验材料、仪器和测量方法

收集到170份人类全血样品,样品的Hb含量利用BC—3000Plus生化分析仪(深圳迈瑞)测定,作为光谱建模和检验的参考实测值。全体样品的Hb值范围为94—172 g·L-1,其平均值和标准偏差分别为130.0 g·L-1和16.1 g·L-1。用蒸馏水将每个全血样品稀释到原浓度的5%,得到的溶血液样品用于光谱测定。

实验仪器为丹麦FOSS公司的XDS Rapid ContentTM型近红外光栅光谱分析仪和透射样品附件。光谱扫描范围400—2 498 nm(包含全近红外区和大部分可见光区);波长间隔2 nm;400—1 100、1 100—2 498(nm)波段分别用Si、PbS探测器;透射附件使用光程2 mm的比色皿。每个样品测量三次,三次光谱的均值作为样品光谱数据。实验温度、湿度分别为(25±1) ℃、(46±1)%RH。

1.2样品集划分与模型优选框架

首先,从170个样品中随机筛选50个样品作为检验集,剩下120个样品作为建模集。建模集划分成相似的定标集(68个样品)和预测集(52个样品),总共进行50次划分。计算所有划分的(建模)预测均方根误差(M-SEP)和预测相关系数(M-RP)的平均值、标准偏差,分别记为M-SEPAve, M-RP,Ave, M-SEPStd和M-RP,Std,用于讨论预测精度和稳定性,其中公式(1)中的M-SEP+是预测精度和稳定性的一个综合性指标,M-SEP+越小,表明模型的预测精度越高且稳定。最优模型参数(如最优PLS因子数)根据最小M-SEPAve确定。最后,通过检验集对优选出的模型再检验,检验的预测均方根误差和预测相关系数分别记为V-SEP和V-RP。

M-SEP+=M-SEPAve+M-SEPStd (1)

采用Hb实测值来定义定标集和预测集的相似性,当定标集和预测集的Hb平均值、标准偏差都接近时,可以定义两个集合相似。所有建模样品被随机划分成定标集和预测集足够多次。定标集、预测集和全部样品的Hb平均值、标准偏差分别记为HbC,Ave,HbC,Std,HbP,Ave,HbP,Std,HbAve,和HbStd。样品集的相似度定义如下:

a0=max{|ΗbC,Ave-ΗbΡ,Ave|ΗbAve,|ΗbC,Std-ΗbΡ,Std|ΗbStd}(2)

式(2)中,a0越小相似度越高。本文选择满足a0<0.1的50个划分用于建模。

1.3PLS因子数的稳定性

PLS方法能够综合地筛选光谱数据和提取出信息变量,PLS因子数是一个重要的参数,它对应了代表样品信息的光谱综合变量的个数,适当的PLS因子数的选择是PLS方法的难点之一[7,8,9,10]。本文基于定标集、预测集的多次划分来优选PLS因子数,使得最佳因子数具有稳定性和实用性。

2结果与讨论

170个溶血液样品的可见—近红外光谱如图1所示。把全谱400—2 498 nm按照可见区、短波近红外区、长波近红外区及其组合划分如下:(1)可见光区400—780 nm、(2)短波近红外区780—1 100 nm、(3)长波近红外区1 100—2 498 nm、(4)可见-短波近红外区400—1 100 nm、(5)全近红外区780—2 498 nm,和全谱共有6种情形,分别建立PLS模型,建模预测效果汇总在表1中。结果表明,可见区和短波近红外区的模型效果明显优于长波近红外区,这是由于溶血血样品是深红色,靠近红光的区域有着更为显著的光谱信息。可见-短波近红外区400—1 100 nm的预测效果和稳定性优于其它所有模型。

下面利用检验集对可见-近红外区的模型进行检验。检验效果V-SEP和V-RP分别为4.42(g·L-1)和0.967(g·L-1)。50个检验样品的Hb预测值和实测值的比较如图2所示。结果表明,对于随机选取的检验样品,其Hb预测值与测定值的吻合较好,达到了令人满意的检验效果,因为模型优化过程已经考虑到了模型的稳定性。

3结论

基于随机性、相似性和稳定性,通过定标集、预测集、检验集三个环节,建立了人类溶血液Hb的VIS-NIR分析模型,将全谱扫描区分成可见区、短波近红外区、长波近红外区、可见-短波近红外区、全近红外区,连同全谱一起六个波段进行比较、检验,实验结果表明,可见-短波近红外波段400—1 100 nm可以作为人类溶血液Hb的信息波段,其检验效果V-SEP、V-RP分别为4.42(g·L-1)、0.967(g·L-1),样品的Hb预测值与临床实测值有很高的吻合精度,其方法可望应用于临床。由于在建模过程考虑了稳定性,因此,对于随机的检验集样品仍达到了理想的预测效果。本文建立的方法框架和计算机算法平台是通用的,可以应用到其他领域。

参考文献

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篇4:谈谈尿微量白蛋白检测的临床意义

[文献标识码]A

[文章编号]1005-0019(2009)7-0262-01

[摘要]尿微量白蛋白是预测糖尿病、高血压、心血管疾病血管损伤及肾脏疾病早期肾损伤的敏感指标。

[关键词]尿微量白蛋白;检测

1一般资料

选择2006年-2007年在我院接受检测人员95人,分为四个组。对照组:健康人25例,均除高血压、糖尿病及其他和肾脏有关的病史。高血压组:30例,血压范围160~190/95~120mmHg,病程2~30年,临床诊断Ⅰ期21例,Ⅱ期39例,其中Ⅱ期患者以眼底动脉硬化或心脏改变为诊断依据,尿常规分析蛋白定性均为阴性。肾病组:21例。心血管疾病组:19例。各组人员在性别、年龄等方面无显著差异。

2检测方法

2.1标本稀释:加入50μl尿液或质控品于装有稀释液R1的试管中,充分混匀。

2.2加樣:加入50μl稀释好的标本或质控品于反应孔中,等待标本渗入膜下。加入胶体金缀合物,在反应孔中加入50μl胶体金缀合物,等待其完全渗入。加入洗涤液50μl,5min以内用NycocardReaderⅡ进行读数。

2.3标本:接受检测人员均留取新鲜晨尿测定,以微量白蛋白(mg/L)报告。

3结果

正常情况下,尿微量白蛋白的排泄率为5~20mg/L,在20mg/L以内视为正常,尿微量白蛋白浓度为20~200mg/L为增高,尿中血红蛋白浓度大于0.5mg/L时,因血尿中的红细胞引起的人血清白蛋白增加将发生假阳性性质的结果升高。对照组,健康人25例其均在<20mg/L范围内。高血压组:Ⅰ期11例,其范围20~49mg/L,均值31mg/L,Ⅱ期19例,尿量白蛋白范围21~63mg/L,均值56mg/L,上述结果中,Ⅰ期高血压中4例超过正常值,Ⅱ期高血压中7例超过正常值,说明这些患者已有轻度肾损害。20例糖尿病患者按病程分组,2~10年13例,尿微量白蛋白21~52mg/L,平均39.5mg/L,大于正常值6例,11年以上6例,尿微量白蛋白29~8mg/L,平均45.2mg/L,大于正常值4例。肾病组21例肾脏疾病患者按疾病性质分组,急性肾炎9例,尿微量白蛋白25~48mg/L,平均37mg/L,其中5例超过正常,慢性肾炎12例,尿微量白蛋白26~81mg/L,均值63mg/L,其中超过正常7例。心血管疾病组19例心血管疾病按病程分组,1-5年内9例,尿微量白蛋白22~58mg/L,平均39mg/L,其中5例超过正常,5~10年内10例,尿微量白蛋白24~65mg/L,平均48.5mg/L,其中超过正常6例。

4讨论

代谢疾病如糖尿病改变了肾脏的微循环,代谢紊乱损伤肾小球基底膜和选择通透性使大分子的白蛋白渗出、持续的高血压引起肾小球的囊内压增高毛细血管内益出蛋白如白蛋白[1]。肾小球的损伤使其自动调节功能失调,造成其流体静压力增高,使尿白蛋白排泄率增高,形成微量白蛋白尿。微量白蛋白尿症的出现表示肾功能减退,是诊断早期肾脏损伤的重要临床指标。肾病是糖尿病、高血压糖最常见与最严重的并发症之一。早发现(诊断)早治疗可以终止或逆转肾病的进程。而血清肾功能检测出现异常时肾病已持续一定的进程;尿试带法(或尿蛋白定量法)远不及尿微量白蛋白检测敏感,当化学试带法出现尿蛋白阳性时患者已经是大量白蛋白尿症和临床肾病。尿微量白蛋白检测是一项筛选早期肾病的高危人群的诊断工具,而糖尿病(1型、2型)高血压糖都应作为主要的被检人群。此外微量白蛋白尿症还是进行性肾病和心血管疾病危险因子的可靠指标[2]。尿微量白蛋白的降低亦表示治疗有效。

大量的临床研究与观察表明,尿微量白蛋白是高血压肾脏损害的指标,在以前的研究中发现原发性高血压患者尿微量白蛋白的明显增高,主要与收缩压相关,是中风的独立危险因素,目前认为尿微量白蛋白异常患者必须强化高血压治疗,其血压最好控制在130/80mmHg以下[3]。糖尿病患者的尿微量白蛋白均明显高于正常对照组。是随着病程延长,尿微量白蛋白明显升高,一般患糖尿病5~10年后可逐渐发生微血管、神经等病变,出现不同程度肾脏损害,病程越长,肾脏病越重。因此,早期测定可充分了解其病情程度,对糖尿病肾病的早期诊断有重要意义。蛋白尿是肾病的重要临床症状,微量白蛋白的控制对于判断疾病程度及预后有更大的临床参考价值,尿微量白蛋白分子中分子蛋白,正常情况下不被肾小球滤过,当肾小球滤过率增加时,尿微量白蛋白即升高,是反映早期肾小球损害的敏感指标,特别在慢性肾功能损伤疾病,如糖尿病肾病、高血压、系统性红斑狼疮等疾病中,检测更具有临床意义。通过研究糖尿病患者,发现尿微量白蛋白阳性患者心血管疾病发病率高。发病时间较早,且病变程度较严重,另据流行病学调查研究表明,心血管疾病的发生率、死亡率与尿微量白蛋白增高相关,临床上对阳性者,应给予足够重视,加强对原发病的治疗。尿微量白蛋白的存在代表糖尿病和原发性高血压等老年病自然发展过程中的重要变化,它反映人体内存在广泛的血管损伤,是肾脏早期损伤、心血管病发病率和死亡率的良好指标,及时的治疗干预可降低微量白蛋白水平,改善原发疾病的预后[4]。

5小结

篇5:尿微量白蛋白检测及临床应用体会

材料与方法

仪器与方法:尿微量白蛋白测定试剂盒,肌酐测定试剂盒均购于中生公司。仪器应用瑞士产Cobas MIRA plus全自动人工分析仪。尿白蛋白测定,取标本10ml,1500×g离心10分钟,取上清10μl,加缓冲液250μl,抗血清规戒律50μl测定波长340nm,反映温度37℃,测定时限300秒,5点定标,范围5~200mg/L。肌酐采用jaffe′s法,尿标本预先用生理盐水30倍稀释测定。

对象:对照组,健康人70例(男43例,女27例),平均年龄41.2岁(22~54岁),均排除高血压、糖尿病及其他和肾病有关病史。糖尿病组,42例(男28例,女14例),平均年龄51.2岁(34~72岁),病程2~20年。高血压组62例(男39例,女23例),平均年龄44.5岁(31~71岁),血压范围160~190/95~12OmmHg,病程2~27年。临床诊断Ⅰ期21例,Ⅱ期41例,其中Ⅱ期患者以眼底动脉硬化或心脏改变为诊断依据,尿常规分析蛋白定性均为阴性。

标本:对照组均分别留取24小时尿和随机尿,测定24小时白蛋白和每升白蛋白及白蛋白/肌酐比值,并以不同方法计算正常值,患者组均取随机尿测定白蛋白及肌酐,以白蛋白/肌酐比值报告,以上标本均当日测定。

结果与讨论

不同计算方法尿白蛋白正常值:以mg/L计算,范围2.2~41.7mg/L,均值12.7mg/L;以mg/gCr计算,范围2.7~26.1mg/gCr,均值8.1;以mg/24小时计算,范围2.4~34.3mg/24小时,均值11.4mg/24小时。因尿拆蛋白值呈非正态分布,低值无临床意义,在建立参考范围是面分位数法按单测值95%上限确定。从以上结果可见,不同计算方法的结果正常值范围有明显差异,尤以每升结果报告时,由于受尿影响较大,正常范围较宽,这亲易使部分异常标本落入正常范围而延误诊断。

高血压组:诊断Ⅰ期、诊断Ⅱ期高血压的标准是以是否累及血管、脏器为依据,我们测定的41例Ⅱ期患者中,常规尿蛋白定性均未发现肾脏损害,诊断是以眼底改变和心电图改变为主。我们将测定结果依据高血压病期、病程、舒张压水平分组进行统计。结果,Ⅰ期21例,范围4.6~38.2mg/gCr,均值17.8mg/gCr;Ⅱ期41例,范围5.1~62mg/gCr,均值29.7mg/gCr;舒张压95~105mmHg34例,范围4.6~43.4mg/gCr,均值16.4mg/gCr;舒张压106~120mmHg28例,范围5.0~62mg/gCr,均值31.2mg/gCr;病程2~10年19例,4.6~40.2mg/gCr,均值13.1mg/gCr,病程11~15年,28例,范圍4.6~54.2mg/gCr,均值19.3mg/gCr;病程16~27年,15例,范围5.1~62mg/gCr,均值37.2mg/gCr。上述结果中以正常值<mg/gCr为界,Ⅰ期高血压中有4例超过正常值,Ⅱ期高血压中有14例超过正常值,说明这些患者已有轻度肾损害。尤其Ⅰ期高血压中有1/5的患者出现尿白蛋白异常,尿白蛋白的值与病程及血压水平相关。

糖尿病组:42例糖尿病患者按子病程分组,2~10年28例,尿白蛋白为5.2~39.6mg/gCr,均值21.2mg/gCr,大于25mg/gCr13例,11年以上组14例,结果为10.4~68.1mg/gCr,均值29.4mg/gCr,大于25mg/gCr8例。通过了解病史并分析结果,坚持长期口服药物或注射胰岛素治疗者与不经常治疗两者结果间有明显差异(P≤0.01)。肾脏是糖尿病微血管病变最常受累的器官之一,糖尿病患者由于微血管基底膜增厚,肾小球滤过膜孔径增大以及血小板粘附等原因造成肾脏损害,这种肾脏病变在早期往往还可逆转,一旦出现临床蛋白尿则很易发展为慢性肾功能不全。糖尿病时,肾小球基底膜上硫酸肝素合成减少,使滤过膜上的两个屏障发生改变,形成了微量蛋白尿。

尿微量白蛋白是指尿液中白蛋白含量超过健康人参考范围,但常规尿蛋白试验为阴性的低浓度白蛋白尿(尿白蛋白排泄率为20~200μg/分),主要以尿白蛋白排泄率来表示。尿白蛋白测定敏感性明显优于尿总蛋白测定,可用于早期肾损伤和糖尿病肾病并发症的预测和观察具有重要的临床价值。

测定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24小时标本,随机尿测定是目前最常用、最易行的方法。但应同时测定肌酐,因每日肌酐排除量相对恒定,可避免尿量变化对结果的影响。

相当数量的高血压患者都有肾脏损害,而常规的实验检测仅有一部分尿分析异常。近几年的研究结果表明,mAlb的检测成为诊断肾脏早期损害的灵敏指标,微量白蛋白尿是指尿中白蛋白呈亚临床性升高,而尿常规检查蛋白为阴性的一种病理现象。尿mAlb的检出对高血压肾损害引起的肾小球的早期损伤有重要的诊断价值。尿mAlb的分子量为6.9万,带负电荷,正常情况下,绝大部分蛋白不能通过滤过膜,但EH引起的小动脉病变遍及全身,常累及肾血管,使肾小球滤过膜损害是造成尿mAlb排出量增加的重要原因。

高血压患者mAlb的发生率显著高于正常人。其主要机制为肾小球血流动力学异常所致,另外尚可能有弥漫性血管病变等其他机制作用参与,其发生率受多种因素影响,在不合并糖尿病的高血压患者,其发生率为5%~40%。

篇6:尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

【关键词】尿微量白蛋白;检测系统;质量控制

【中图分类号】R446.12+2【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)10-091-1

检测系统是指完成一个检验项目所涉及的仪器、试剂、校准品、质控品、检验程序、保养计划等的组合[1]。保证不同检测系统同一检验项目检测结果的一致性及准确性是临床实验室检验质量管理的最终目的,方法学比较是实现此目的的重要手段。mALb是检测血管损伤的重要指标,是糖尿病、高血压、心血管疾病、肾病血管损伤的指标,对判断疾病发生、发展、预后有重要的参考价值。在过去的研究中临床上重视糖尿病患者mALb的变化,但是近年的研究发现mALb对分析血管相关疾病的进展具有十分重要的意义。因此大大扩大mALb检查的应用范围, 已经作为心血管疾病、高血压等疾病的常规检查项目。通过这一检查可以发现潜在病变,为疾病的早期诊断,早期治疗提供有用的信息及实验室指标。

测定尿微量白蛋白的方法有多种,包括:放射免疫分析法、时间分辨荧光免疫分析法、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法等.其中以免疫透射比浊法较为实用。本文运用NCCLS EP9-A文件[2]对浙江伊利康生物技术有限公司生产的免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白试剂盒在日立7020全自动生化分析仪上进行了评估并建立了检测系统,并用患者新鲜血清与Roche检测系统进行了方法学比较,报道如下。

1材料与方法

1.1仪器与试剂日立7020全自动生化分析仪,Roche Modular DPP全自动生化分析仪。伊利康尿微量白蛋白试剂盒及配套校准品与质控品,Roche 蛋白校准品cfas protein、Roche 蛋白质质控品及原装试剂盒。

1.2样本临床患者当日新鲜血清,每天8份,连续5天共40份,其浓度尽可能覆盖临床患者检测范围及方法检测的线性范围。每份标本均反向重复检测。

1.3方法

1.3.1检测系统自建检测系统(Y):日立7020全自动生化分析仪、伊利康mALb试剂盒及配套校准品与质控品;参考检测系统(X):Roche mALb检测系统。

1.3.2测定程序严格按NCCLS EP9-A执行。

1.4统计学方法方法内及方法间离群点检验,判断限为配对资料小于4倍差值均值;X范围尽可能覆盖方法的线性范围,同时r≤0.975,或r2≥0.95;直线相关与回归分析;配对t检验。选用Excel2003严格按NCCLS EP9-A统计程序执行。

2结果

剔除离群点后,自建检测系统与参比系统比较,自建检测系统与标准参考系统结果均数及标准差分别为:1.17±0.63、1.15±0.72,差异无统计学意义(P>0.01),回归方程Y=1.0347X+0.0251,r=0.9941。

3讨论

标准化、系统化及溯源性对加强实验室质量管理及提高临床检验质量具有重要意义,但在目前国内检测系统不完善的状况下,对自行建立的检测系统应进行详细的论证与评估,以保障临床检测结果的准确性及各实验室间的可比性。EP9-A为临床实验室提供了方法学比较的标准化途径。Roche可溯源的参考检测系统血清mALb检测结果可溯源至CRM470。本研究结果表明,伊利康mALb免疫透射比浊试剂盒在日立702全自动生化分析仪上建立的自建检测系统与Roche mALb标准参考系统血清mALb检测结果具有较好的可比性,相关性良好,可用于临床常规血清mALb检测,也提示在目前高质量进口全自动生化仪检测技术非常成熟的前提下,试剂及校准品的配套在检测系统中的作用更加重要,特别是免疫比浊项目。值得注意的是,自建系统与参考系统结果可比性好,只能表明两种检测系统对患者检测结果可比性好,即达到检测目的,但不能证明其具有参考检测系统的溯源性[3]。

参考文献

[1] 冯仁丰.临床检验质量管理技术基础[M].上海:上海科学技术文献出版社,2003:5-8.

[2] The national committee for clinical laboratory standards. Method comparison and biasestimation using patients samples;Approved guidline[S].NCCLS, EP9-A,1995.

篇7:尿微量白蛋白的可见-近红外光谱检测

【关键词】β2-微球蛋白;微量白蛋白;糖尿病肾病

【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2015)05-0257-01

糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见并发症之一,如果不及时治疗会导致肾功能下降,肾功能衰竭,严重会致死[1]。大多数肾损害起病隐匿,进展缓慢。早期诊断较困难,依靠血肌酐、尿素氮、尿蛋白作诊断时往往预示肾脏病变已进展到相当程度,因此早期诊断、早期治疗尤为重要。我院于2015年5月~2015年8月对尿病患者及健康体检者联合检测β2-MG、尿MALB,具体结果分析如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 本组50例糖尿病患者,其中男25例,女25例。年龄40~60岁,平均年龄48.5岁。均符合WHO规定的糖尿病诊断标准;正常健康体检对照组50例,男25例,女25例。年龄40~60岁。所有研究对象均已排除有原发性肾脏病、继发性高血压、急性感染、创伤、肿瘤、妊娠、心肝疾病、恶性肿瘤等疾病。化验室检测血肌酐、尿素氮、尿常规蛋白定性为阴性。

1.2方法 所有患者晨起留取第1次中段尿,立即送检,加样前离心10min,在室温下1h内检测完毕。采用日本产奥林巴斯AU400全自动生化分析仪。MALB采用免疫比浊法。β2-MG采用终点法。MALB <20mg/L、β2-MG <0.4 mg/L为界限,结果超过参考值判断为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行分析,用χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

糖尿病组:尿微量白蛋白及β2-微球蛋白阳性例数分别为27例、24例。检测值范围分别为28-115 mg/L、0.8-5.6 mg/L;健康体检组:尿微量白蛋白及β2-微球蛋白阳性例数分别为1例(22 mg/L)、0例。糖尿病组的尿MALB和β2-MG均显著高于健康体检组,差异具有统计学意义(P<0.01)。

3 讨论

随着人们生活水平的提高,糖尿病患者逐年增加,DN是DM常见的微血管并发症之一,因其发病隐匿,常规的尿蛋白及肾功能检查难以发现早期肾损伤,故对糖尿病肾病的早期诊断愈来愈受到重视,因此探讨DM的病因、发展、早期诊断有着重要意义。糖尿病肾病(DN)的主要衡量指标为蛋白尿,是糖尿病患者能够生存下来并且减少其并发症发生的主要影响因素[2]。蛋白尿的发生机制是由于肾小球滤膜的通透性增大,致使血浆蛋白特别是白蛋白大量漏出,超过近端肾小管对蛋白的重吸收能力而形成的。持续和大量蛋白尿造成肾脏高灌注、高滤过状态,促进肾小球硬化或间质纤维化的发展,因而成为肾臟原有病理改变加重的因素。

微量白蛋白分子量中等,带负电荷,在正常情况下由于肾小球滤过膜电荷选择性屏障的静电同性相斥作用,绝大部分不能通过肾小球滤过膜。当肾小球受到炎症、毒素等的损害,引起肾小球毛细血管壁通透性增加,滤出较多的血浆蛋白,超过了肾小管重吸收能力,尿中含量增大,但又未达到临床蛋白尿的标准。研究显示当滤过膜通透性增加时, 血中的蛋白质可从肾小球滤过,主要为MALB[3],是肾小球损害早期诊断的指标,也称为肾小球性蛋白尿。尿微量白蛋白(mAlb)作为肾小球微血管病变最早期的客观指标,对糖尿病肾病的早期诊断有重要意义[4]。β2-MG广泛分布于体内所有细胞中,分子量11.8 KD ,主要由肝脏合成。正常人体内的 β2-M能自由通过肾小球滤过膜,原尿中的99. 9 %的β2-MG可被近端肾小管上皮细胞重吸收和降解,不再返回血循环,从而保证血液中β2-MG浓度恒定, 所以正常人尿中只有痕迹量。当肾近曲小管轻微受损时,对β2-MG的重吸收下降, 尿β2-MG含量就增加。所以当DN影响到肾小管重吸收功能时尿β2-MG升高[5]。β2-MG在尿中含量增大,是早期判断肾小管损伤的敏感指标,因此也被称为肾小管性蛋白尿。多次检测β2-MG超过正常,尤其是逐渐升高者,尽管尿素氮、肌酐和尿常规结果仍正常,多表示肾功能已有损害,所以测定有精确、灵敏、特异性强等优点[6]。

由此可见,尿液的微量白蛋白和β2-微球蛋白含量能较灵敏地反映出肾小球的滤过功能和肾近端小管的重吸收功能,有利于糖尿病肾病的早期诊断,预防控制DN并发症的发生。

参考文献:

[1]张日赤,薛峰.厄贝沙坦治疗糖尿病肾病的临床研究[J].中国当代医药,2013,20(1):8.

[2]朱建民,程秦娣.糖尿病肾病的研究与临床近况[J].中华内分泌代谢杂志,1994,10(1):41.

[3]程苏琴,朱美财.尿微量白蛋白在糖尿病肾损害早期诊断中的价值[J].中华检验医学杂志,2005,28(7):740-747.

[4]欧阳涓,姜镜.肾病的损伤性诊断[J].中华检验医学杂志,2005,28(8):877-880.

[5]康萍,马培龙,陆森,等.β2微球蛋白在糖尿病早期肾损害中的意义[J].中国医药研究,2005,3:186.

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