2022-2023生化分离复习题

2022-2023生化分离复习题（精选2篇）

篇1：2022-2023生化分离复习题

名词解释

分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个相互相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度比为一常数叫分配系数。

絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。

萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的。

离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，根据其电荷差异，依靠库伦力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱机将吸附物从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤。

色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构还有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配，达到分离的目的。

等电点沉淀：调节体系PH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液之各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作称为反渗透。

膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。

超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。

生化分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产物中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。

离心分离技术：是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。

盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，是原溶液的物质沉淀析出的分离技术。

洗脱：利用适当的溶剂，将树脂吸附的物质释放出来，重新转入溶液的过程。

树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。

层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，是各组分以不同的程度分布在两个相中。

流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体和租临界体等，都称为流动相。

正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。

反相色谱：是指固定相的极性地狱流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。

吸附层析：是以吸附剂为固定相，根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。

分配层析：是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。

凝胶过滤：凝胶过滤是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子打小进行分离的一种层析技术。

离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。

高效液相色谱：是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相，借助高压泵来输送流动相，并配有实时在线检测器，实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。

亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。

选择

1． HPLC是哪种色谱的简称（C高效液相色谱）

2． 针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（C亲和层析）

3． 用于蛋白质分离过程中的脱盐更换缓冲液的色谱是（C凝胶过滤色谱）

4． 适合小量细胞破碎的方法是（B超声破碎法）

5． 蛋白质分子量的测定可采用（C凝胶层析）方法

6． 基因工程药物分离纯化过程中，细胞收集常采用的方法（膜过滤）

7． 离子交换剂不适用于提取（D蛋白质）物质

8． 血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质通电，清蛋白质分子向

（A正极移动）

9． 是蛋白质盐析可加入试剂（D硫酸铵）

10． 下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团（A磺酸基团—SO3H）

11． 在蛋白质初步提取的过程中，不能使用方法（C有机溶液萃取）

12． 离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A静电作用）将溶液中带相反电

荷的物质吸附在离子交换剂上。

13． 真空转鼓过滤机工作一个循环进过（A过滤器、缓冲区、再生区、卸渣区）

14． 阴离子交换剂（C可交换为阴离子）

15． 分配层析中的载体（C能吸附溶剂构成固定相）

16． 颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（A越小）

17． 发酵液的预处理方法不包括（C离心）

18． 其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（B过滤）

19． 哪种细胞破碎方法适用工业生产（A高压匀浆）

20． 关于萃取下列说法正确的是（C两性电解质在等电点时进行提取）

21． 液—液萃取时常发生乳化作用，如何避免（D加热）

22． 在葡萄糖与聚乙二醇的双水相体系中，目标蛋白质存在与（A上相）

23． 超临界流体萃取中，如何降低溶质的溶解度达到分离的目的（C升温）

24． 有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B介电常数小）

25． 若两性物质结合了较多阳离子，则等电点PH会（A升高）

26． 若两性物质结合了较多阴离子，则等电点PH会（B降低）

27． 生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后使用（C EDTA）去除金属

离子。

28． 哪一种膜孔径最小（C反渗透）

29． 超滤技术常被用作（C小分子物质的纯化）

30． 微孔膜过滤不能用来（D分离离子与小分子）

31． 吸附剂和吸附剂之间作用力是通过（A范德华力）产生的吸附称为物理吸附。

32． 哪一种活性碳的吸附容量最小（B棉纶活性碳）

33． 酚型离子交换树脂则应用在（B PH>9）的溶液中才能进行反应

34． 羧酸型离子交换树脂必须在（C PH>7）的溶液中才能进行反应

35． 离子交换树脂适用（B乙醇）进行溶胀

36． 通过改变PH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来，可使用（A 阳离

子交换剂一般是PH值从低到高洗脱）

37． 哪一种凝胶的孔径最小（A Sephadex G-25）

38． 哪一种凝胶的吸水量最大（D Sephadex G-200）

39． 在什么情况下得到粗大而有规则的晶体（A 晶体生长速度大大超过晶核生成速度）

40． 为加热过滤效果通常使用（C惰性助溶剂）

41． 不能用于固液分离的手段为（C 超滤）

42． 最常用的干燥方法有（D 以上都是）常压过滤减压过滤喷雾过滤

43． 下列哪个不属于高度纯化：（B吸附法）

44． 酶提取液中，除所需酶外，还还含有大量的杂蛋白、多酶、脂类和核酸等，为了进

一步纯化，可用（E 以上都可以）调PH值和加热沉淀法蛋白质表面变性法降解或沉淀核酸法利用结合底物发保护法除去杂蛋白

45． 适用于分离糖、苷等的SephadexG的分离原理是（C 分子大小）

46． 下列哪个不属于初步纯化（C L离子交换层析）

47． 下列那个不属于发酵液的预处理（D 层析）

48． 颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（A 越小）

49． 高效液相色谱仪的种类喝多，但是无论何种高效液相色谱仪，基本上是由（D 高

压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统和色谱工作站等五大部分）

50． 在凝胶过滤（分离范围是5000~400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来（B 肌

球蛋白（400000））

51． “类似物容易吸附类似物”的原则，一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性

物质（B 非极性物质）

52． 能够出去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C离子交换）

53． 当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（C 先增大，后减小）

54． 洗脱体积是（C与该溶质保留时间相对应的流动相体积）

55． 超临界流体萃取法适用于提取（B 极性小的成分）

56． 活性碳在下列哪种溶剂中吸附能力最强（A 水）

57． 在超滤过程中，主要的推动力是（C 压力）

58． 在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A 粗且长的）

59． 盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（B 变性作用小）

60． 在萃取液用量相同的条件下，下列哪种萃取方式的理论收率最高（C 三级逆流萃取）

判断

1.助溶剂是一种可压缩的多孔微粒（X）

2.通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一（√）

3.极性溶剂与非极性溶剂互溶（X）

4.用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮（X）

5.要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进行提取（X）

6.应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进行（X）

7.生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥（√）

8.蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度

（X）

9.吸附剂氧化铝的活性与其含水量无关（X）

10.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸>中性

氨基酸>酸性氨基酸（X）

11.活性氧化铝可分为三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝（√）

12.板框压滤机可过滤所有菌体（X）

13.超声波破碎法的有效能量利用率极低，操作过程产生大量的热，因此操作须在冰水或有

外部冷却的容器中进行（√）

14.离心是基于固体颗粒和周围液体密度纯在差异而实现分离的（√）

15.超临界流体温度不变条件下，溶解度随密度（或压力）的增加而增加，而在压力不变时，温度增加情况下，溶解度有可能增加或下降（√）

16.硫酸铵在碱性环境中可以应用（X）

17.用64%氯化锌处理透析袋，使大分子也能通过膜孔（）

18.层析分离是一种化学的分离方法（X）

19.分离纯化极性大的分子（带电离子等）采用反相色谱（或正相色谱）（X）

20.而分离纯化极性小的有机分子（有机酸、醇、酚等）多采用正相色谱（或反相色谱）（X）

21.吸附力较弱的组分，有较低的Rf值（X）

22.任何情况都优先选择叫小空隙的交换剂（X）

23.凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定（√）

24.在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小（X）

25.色谱分离技术中固定相都是固体（X）

26.渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞

和革兰氏阳性菌（X）

27.等密度梯度离心中，梯度液的密度要包括所有被分离物质的密度（√）

28.盐析反应完全需要一段时间，一般硫酸铵加完后，应放置30min以上才可进行固液分离

（√）

29.层析点样时用一根毛细管，吸取样品溶液，在距薄层一端1.5-2cm的起始线上点样，样

品点直径小于3mm（√）

30.疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√）

31.发生乳化现象对萃取是有利的（X）

32.丙酮，介电常数较低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析时选用丙酮较好（X）

33.蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的（X）

34.离心操作时，对称放置的离心管要达到体积相同才能进行离心操作（X）

35.盐析一般可在室温下进行，当处理对温度敏感的蛋白质或酶时，盐析操作要爱低温下进

行（√）

36.蛋白质累的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加溶解度（X）

37.化学萃取及溶质根据相似相溶的原理在两相之间达到分配平和，萃取剂与溶质之间不发

生化学反应（X）

38.树脂使用后不可在回收（X）

39.多肽和蛋白质类药物的纯化包括两部分内容，一是蛋白质与非蛋白质分开，而是将不同

蛋白质分开（√）

40.细胞破碎技术是生物分离操作中必需的步骤（X）

41.冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质（√）

填空

1.发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等

2.常用的蛋白质沉淀方法有（等电点沉淀），（盐析）和（有机溶剂沉淀）

3.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法方法有（PH梯度）和（离子强度（盐）梯度）

4.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强碱型），（弱碱型）和（中度强度）；

其典型的活性基团分别有（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、（强弱基团都具备）

5.离子交换树脂由（载体）、（活性基团）和（可交换离子）组成6.DEAE Sepharose是（阴）离子交换树脂，其活性基团是（二乙基氨基乙基）

7.CM Sepharose是（阳）离子交换树脂，其活性基团是（羧甲基）

8.膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为（微滤膜）、（超滤膜）、（纳滤膜）和（反渗透膜）

9.工业上常用的超滤装置有（板式），（管式），（螺旋卷式）和（中空纤维式）

10.超临界流体的特点是与气体有相似的（粘度（扩散系统）），与液体偶相似的（密度）

11.离子交换树脂的合成方法有（共聚（加聚））和（均聚（缩聚））两大类

12.根据分离机理的不同，色谱法可分为（吸附色谱），（离子交换色谱），（凝胶色谱），（分配色谱）和（亲和色谱）

13.典型的工业过滤设备有（板框压滤机）和（真空转鼓过滤机）

14.影响有机溶液沉淀的因素有（温度），（PH），（样品浓度），（中性盐浓度）和（金属

离子）

15.大孔网状吸附剂有（非极性），（中等极性）和（极性）三种主要类型

16.影响离子交换速度的因素有（树脂粒度），（交联度），（溶液流速），（温度），（离子的大小），（离子的化合价）和（离子浓度）

17.分配色谱的基本构成要素有（载体），（固定相）和（流动相）

简答

1.试述凝胶色谱的原理

将混合原料加在柱上并用流动相洗脱，则无法进入孔隙内部的大分子直接被洗脱下来，小分子因为可以进入孔隙内部而受到很大阻遏，最晚被洗脱下来，而中等大小的分子，虽然可以进入孔隙内部但并不深入，受到的阻滞作用不强，因而在两者之间不被洗脱下来。

2.在离子交换色谱操作中，怎样选择离子交换树脂？

1）对阴阳离子交换树脂的选择：正电荷选择阳离子交换树脂，负电荷选择阴离子交换树脂。

2）对离子交换树脂强弱的选择：较强的酸性或碱性，选择选用弱酸性或弱碱性树脂

3）对离子交换树脂离子型的选择：根据分离的目的，弱酸性或弱碱性树脂不使用H或OH型

3.简述盐析的原理及产生的现象。

当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况：

1）“盐溶”现象—低盐浓度下，蛋白质溶解度增大

2）“盐析”现象—高盐浓度下，蛋白质溶解度随之下降，原因如下：a）无机离子与蛋白质表面电荷中和，形成离子对，部分中和了蛋白质的电性，是蛋白质分子之间的排斥力减弱，从而能够相互靠拢。b）中性盐的亲水性大，是蛋白质脱去水化膜，疏水区暴露，由于疏水区的相互作用导致沉淀。

4.怎样进行离子交换树脂的预处理及转型？

物理处理：水洗，过筛，去杂，以获得粒度均匀的树脂颗粒；化学处理：转型（氢型或钠型）阳离子树脂酸—碱—酸阴离子树脂碱—酸—碱最后以去离子水或缓冲液平衡。

5.何谓超临界流体萃取，并简述其分离原理。

超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度（溶解能力强）的特点，利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。其特点是安全、无毒、产品分离简单，但设备投资较大。

6.试比较凝聚和絮凝两过程的异同。

凝聚和絮凝——在电介质作用下，破坏溶质胶体颗粒表面的双电层，破坏胶体系统的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。凝聚：简单电解质降低胶体间的排斥力。从而范德华引力起主要作用，聚合成较大的胶粒，粒子的密度越大，越易分离。絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。

7.沉析溶剂选择主要应考虑一下因素。

1）是否与水互溶，在水中是否有很大的溶解度 2）介电常数小，沉析作用强 3）对生物分子的变性作用小 4）毒性小，挥发性适中

8.生物分离技术的基本涵义及内容

基本涵义：生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产物中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。主要内容包括：离心分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、沉淀（析）分离、膜分离、层析（色谱）分离、电泳分离技术以及产品的浓缩、结晶、干燥等技术。

9.液—液萃取时溶剂的选择要注意以下几点？

1）选用的溶剂必须具有较高的选择性，各种溶质在所选的溶剂中之分配系数差越大越好。

2）选用的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要容易分离与回收。

3）两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的分离，选用溶剂时应注意。

4）要选用无毒，不易燃烧的价廉易得的溶剂。

10.根据溶解度不用，蛋白质有几种分离纯化方法。

11.利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。影响蛋白质溶解度的主要

因素有溶液的PH值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。

12.1）等电点沉淀蛋白质在等电点是溶解度最小。单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。

13.2）盐析沉淀中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏

蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。有时不同的盐浓度可有效的使蛋白质分级沉淀。通常单价离子的中性盐（NaCl）比二价离子的中性盐【（NH4）SO4】对蛋白质溶解度的影响要小。

14.3）低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力

增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。一般在0~40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加，40~50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。

篇2：2022-2023生化分离复习题

XX年--2021学第二学期语文教学工作即将结束，为了做好期末复习工作，让学生巩固本学生期所学的语文学问，增加语文学习技能，特拟定本期语文复习方案。

一、时间支配

本期复习总课时数为14节。详细时间支配为：

基础学问部分：

3学时

课内外阅读部分：

3学时

综合实践活动：

2学时

口语交际训练：

2学时

写作：

4学时

二、复习内容及方法

本学期期末复习实行分类复习的方法进行。从教学目的来看，分为四个版板复习，即：基础学问与技能、课内外阅读、综合实践活动和作文写作。在每一个版板中依据教学内容的不同又分类进行复习。详细支配如下：

（一）、基础学问与技能

1、书写：要求学生写规范字，卷面干净。17周在本班进行一次书写展现。激发学生写规范字的热忱。

2、字音：将课本中的生字、常用字归类，要求学生注音或给生字注音。或每节课前要求学生给其中的字注音。加强训练。

3、生词：要求学生在本期内为生词归类、解释并造句。

4、文学学问：要求学生先归类，识记讲读课文的相关学问及的相关学问。

5、古诗词背诵：要求学生背诵教材中全部古诗词和现代诗词，以及美丽的时文、美文。加强积累。

6、课外名著阅读：检查学生本期对教材中所列的三部课外名著的阅读状况，指导学生把握学问要点。明确考查方向。

7、语文实践活动：将教材中六次语文实践活动的内容及要求重新整理，并检查学生把握状况。

（二）、口语交际

利用导学中口语交际材料对学生进行训练，要求学生对训练的要点须留意把握。明确力量。

（三）、课内外阅读

课内外阅读是学生在学习中的难点。在复习前先要求学生把握应把握的基本技能和相关要点。然后依据目标导学的语段对学生进行训练。

（四）综合实践活动

结合现在世界和国内的时事，有目的地对学生进行训练，要求学生从评价、联想等方面入手，拓展学生的学问面，增加学生对时事的评价的力量。从而达到复习的目的。

（五）、作文写作。

从命题、结构、语言等方面进行训练，强调学生首先要能说清一件事，然后，要求学生能对一件事了发表自己的看法，能言之有理。言从字顺。

三、复习中应留意的问题

复习中，由于复习较为单调，学生的激情不高，且部分学生长期以来都很不自觉，为了让学生能真正理顺学问要点，增加技能，复习中肯定要留意“严”和“感”。“严”，就是对学生在复习中消失的问题必需要求学生按时保质保量地完成。因为学问的识记只有在严格要求下才能完成。“感”，让学生感受到学到学问、养成技能的快感。从中感受到成就感。从而能较为自觉地学生。但学生的天性是嬉戏，自觉性原来就差，在复习工作中，又要避开因为自己心急而造成学生厌学或因为部分学生智力等方面的因素导致欲速而不达的后果。

四、复习的目标