聚酮类化合物（精选三篇）
聚酮类化合物 篇1
1 金属手性试剂不对称还原酮
近年来前手性酮的不对称还原作为制备光学活性醇的方法得到了较大的发展, 其中, 许多还原反应都涉及到金属氢化物这类还原剂。由金属氢化物形成的手性试剂具有很高的立体选择性, 因为在这样的反应中, 使用很少的手性物质就可以制备出相当多的手性产品。
四氢铝锂 (LiAlH4) 具有很强的还原性, 和其他金属氢化物相比, 其化学选择性较低。但通过用烷氧基取代LiAlH4中的某些氢原子, 可将这个反应性极强的试剂改造成反应性较温和但选择性较高的试剂。为了达到这个目的, 可以使用手性配体如手性羰基、手性醇、手性胺、氨基醇修饰LiAlH4。用手性联萘酚改性的LiAlH4在还原芳香酮时个别的旋光度可达到95%[1]。刘湘等人[2]将 (1S-2R) -1-二丁氨基-1, 2-二氢-2-茚醇 (ROH) 与氢化铝锂形成的手性试剂首次用于苯乙酮的不对称还原研究, 苯乙酮还原后可分别给出对映体过量值达60%～76% 的不同主产物R- (+) -1-苯基乙醇和S- (-) -1-苯基乙醇。
硼氢化钠 (NaBH4) 是一种较温和的氢化试剂, Yoo等人发现用NaBH4-CuSO4 体系可以还原酮、脂肪酯、烯烃、腈和脂肪族以及芳香硝基基团, 而酰胺、脂肪族和芳香族羧酸则不被还原;不同的官能团反应的速度也不同, 因此可以进行选择性还原[3,4]。Sosale Chandrasekhar等人[5]用NaBH4/二甘醇二甲醚体系还原酮。
硼氢化锌[Zn (BH4) 2]是一种对含氧官能团具有较高立体选择性的不对称还原剂。其对α, β-环氧酮、β-酮酸酯、β-羟基酮、β-酮酰胺等化合物中的羰基还原具有高度的立体选择性。因为Zn原子具有空轨道, Zn可与含氧官能团具有的2个可提供电子对的配位氧原子配位形成环状过渡态, 这时即可从位阻较小的一侧攻击羰基, 出现选择性较高的产物。这就是该试剂对一般的酮没有选择性而只对含氧官能团酮的还原具有选择性的原因[6,7]。
2 手性
唑硼烷催化体系不对称还原酮
手性配体修饰的硼烷在羰基化合物的不对称还原中是极为成功的。Corey等[8]相继报道了一系列较好的催化剂 (1～8) 。催化剂 (1) 在催化反应中具有对映选择性高、反应速度快、产率高、催化剂能再生等优点, 但 (1) 在空气中极不稳定, 而 (2) 在空气中稳定。 (2) 对酮的催化还原反应所得的产物与 (1) 相比有更高的对映体选择性。 (1) 和 (2) 虽然有诸多优点, 但是仍存在不少缺点:对BH3敏感的官能团双键、酰氨基等会干扰反应, 并且在低温下反应的对映体选择性降低。 (3) 克服了以上缺点, 在与还原剂儿茶酚硼烷混合后可在低温下还原α, β-不饱和酮, 反应产率以及对映体选择性明显提高。 (4～8) 都具有很好的催化效率, 在上述反应条件下即可还原芳基甲基酮, 所得产物仲醇对映体过量e.e.值大于95%。利用■唑硼烷不对称催化还原羰基化合物是同类反应中最有效的手段之一, 近年来国内外有很多类似的研究报道, 出现了许多新的手性氨基醇配体。程青芳[9]首次以天然D-樟脑的衍生物为原料, 合成了2个新型龙脑基氨基醇配体, 研究了它们与硼烷原位制备成手性■唑硼烷后, 在不对称催化氢化还原前手性芳酮中的性能, 得到的手性仲醇的对映体过量 (e.e.) 值最高可达96% (图1) 。
周忠强等人[10]用天然 (+) -樟脑合成了一种新手性氨基醇 (1S, 2R) -1-氨基甲基-2-羟基-7, 7-二甲基双环[2.2.1]庚烷, 如图2:
3 生物酶催化不对称还原酮
羰基的生物还原是研究得最多的不对称生物催化领域之一。将前手性酮经不对称还原后得到手性醇, 在手性药物制备中得到了广泛的应用。不同菌种具有不同的还原活性和立体选择性, 所以利用自然界中微生物的多样性筛选出高效菌株, 可以提高反应产率和控制立体选择性, 这是一项很有意义的工作。曾嵘等人[11]综述了国内外利用生物催化羰基的不对称还原合成手性醇的研究情况, 介绍了生物催化各类潜手性羰基化合物不对称还原的原理、菌种的筛选, 以及生物催化不对称还原各类羰基化合物的实例。刘湘等人[12]把酵母应用于催化苯乙酮的不对称还原, 得到了较合适的生物转化条件, 使底物苯乙酮的转化率达到71%, 产物S-1-苯基乙醇的e.e.值达到88%。郭养浩等人[13]研究固定化面包酵母FD-12 对不同水/有机溶剂两相体系的耐受性及不对称合成 (S) -2-辛醇的还原反应。结果表明在水/正十二烷相体积比为20/5, 固定化细胞用量为15.0 g, 初始底物2-辛酮浓度为200 mmol·L-1 的条件下转化96 h, (S) -2-辛醇产物得率可达29.59%, e.e. (S) 值达98.81%。Francesco Molinari等人[14]用微生物在水或有机溶剂中生物转化来选择性还原芳香类β-and γ-Nitroketones (硝基酮) , 如在还原1-苯基-4-硝基-1-丁酮时, Pichiaminuta (CBS 1708) and Pichia etchellsii (CBS 2011) 2种菌株表现高活性, 其e.e.值达 85%和80%。
4 碱金属不对称还原酮
碱金属的应用范围非常广泛, 它与不同溶剂构成的体系, 可使多种有机官能团如CN、CO、CC、NO2等得以还原。碱金属具有反应温度易于控制, 反应条件比较温和, 反应产物收率较高等优点, 成为有机还原反应中的重要试剂。目前已应用的溶剂可以分为3类: (1) 极性溶剂:乙醇, 甲醇, 异丙醇, 四氢呋喃, N, N-二甲基甲酰胺, 液氨等; (2) 非极性溶剂:苯等; (3) 混合溶剂:液氨-苯, 液氨-甲醇等。碱金属对各种酮的还原均获得了非常好的结果[16], 并且已经应用到了工业生产中。John W. Huffman等人[17]用碱金属在液氨溶液中还原环酮, 实验可以高效地获得稳定的立体异构体醇。金属钠和叔醇构成的体系, 可使酮 (9) 还原成为醇 (10) (图3) 。该反应具有较高的立体选择性, 反应条件温和, 易于操作。
5 金属催化剂
5.1 过渡金属络合物
向进福等人[18]对手征性二茂铁膦的合成及其过渡金属配合物在催化不对称合成中的应用作了概述。利用手征性二茂铁膦铑阳离子配合物, 催化苯乙酮等酮类化合物的氢化反应, 光学产量高达83%。许多国外学者利用钌 (Ru) 的络合物还原酮[19,20,21,22,23], 如Ekkehard Lindner等人用钌的二价络合物, 其ee值高达99%。FrancescaMicoli等人研究了二价钌醋酸盐络合[Ru (CO) 2 (OAc) 2 (PnBu3) (PPh3) ] [PnBu3=P (p-XC6H4) 3]对α, β不饱和酮的不对称还原。
5.2 Ni不对称还原[24,25,26,27,28]
镍催化剂因其价格低, 工艺可控性强, 在加氢反应中活性较高, 因而有着广泛的应用。Raney镍催化剂因其具有制备简单、导热好、催化活性高及稳定性强等优越性, 被广泛推广应用到加氢、脱氢、脱卤、脱硫及许多其他化工转化领域。作为加氢催化剂, 雷尼镍成功地被应用到多种多样的化工过程中, 如不饱和化合物、芳香族化合物、杂环化合物的加氢;羰基、羧基、含硫、含卤化合物的加氢。纪红兵等人用氧化镍催化剂在液相中加氢还原羰基化合物, 产率很高, 且催化剂可反复使用9次而活性不变。Sergei Zinovyev等人在常压, 50°C时, 用雷尼镍在水-有机两相溶液中对氯苯乙酮加氢还原, 研究了其动力学和选择性 (图4) 。
6 其他手性还原剂
电化学不对称合成是在手性诱导剂、空间效应、物理场 (电场、磁场等) 等作用下, 将潜手性有机化合物通过电解过程转化为相应的有光学活性的化合物的一种合成方法。手性诱导剂包括手性反应物、手性支持电解质、手性氧化还原媒介 (在间接电化学合成中) 、手性修饰电极。近几十年来, 电化学不对称合成越来受到重视, 有关报导层出不穷, 新方法不断采用, 获得一批令人满意的成果[29,30,31,32,33], 在机理方面也有很大进展。电化学不对称合成有反应条件温和、易于控制、手性试剂用量小、产物较纯、易于分离等优点, 也存在产物光学纯度不高、手性电极寿命不长、重现性不佳等问题, 这都有待进一步研究。
此外还有硅氢化还原, 唑磷烷催化剂, 相转移不对称还原等方法。
7 总结
聚酮类化合物 篇2
摘 要 采用超声波辅助乙醇提取橙皮中黄酮类化合物，以硝酸铝显色法测定的黄酮类化合物总量为指标，探究平远慈橙皮黄酮类化合物的提取工艺。运用单因素实验研究溶剂pH、乙醇体积分数、提取温度、提取时间、料液比对黄酮类化合物提取率的影响，通过正交试验进一步优化提取工艺条件。结果表明：平远慈橙皮黄酮类化合物最佳提取工艺为乙醇体积分数50%，温度50 ℃，料液比1∶50，超声时间50 min。通过最佳工艺验证，此条件下平远慈橙皮黄酮类化合物提取率达到2.10%。该工艺简单可行，有较好的参考价值。
关键词 慈橙皮；黄酮类化合物；超声波；提取
中图分类号：TQ461 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2016）12--04
平远慈橙产于梅州市平远县，目前该县已有慈橙种植面积达6 667 hm2，挂果面积2 000 hm2，总产约2.6万t，是广东省最大的脐橙生产基地[1]。平远慈橙经检测，其中维生素C、维生素E、铁、锌、镁等5个指标远高于其他类脐橙，富含β-胡萝卜素、蛋白质、果胶以及黄酮类化合物等，享有“橙中之王”的美称。
黄酮类化合物（Flavonoids）又名生物类黄酮化合物（Bioflavoinoids），是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物，是许多中草药的有效成分。近年来，许多研究表明，黄酮类化合物具有消炎抗菌、清热解毒、镇静和利尿等作用，是活性氧的良好清除剂，尤其是抗自由基和抗癌防癌的作用[2-3]，使对黄酮类化合物的研究进入了一个新阶段。黄酮类化合物安全、无毒，在医药、食品加工等方面已被广泛应用[4]。橘类黄酮具有的消炎抗过敏性使其在日用化工领域的应用前景日益广阔。据报道，国外已经把柑橘类黄酮添加在牙膏中用于治疗过敏性牙龈炎，效果较好。国外正在研究以类黄酮代替咖啡因和奎宁的新工艺，而在我国，把柑橘类黄酮作为食品添加剂的应用研究工作几乎为空白。我国拥有丰富的柑橘资源，深度开发柑橘类黄酮资源，尤其是在医药、食品和保健品领域中的应用，具有重大的经济效益和社会效益。
近年来，平远县以打造“慈心农业”为出发点，依托农业龙头企业延伸慈橙产业链、浓缩汁、橙肉、香精油和百分百鲜果汁等深加工产品不断面世，取得了巨大的经济效益[5]。同时，每年因慈橙深加工而产生大量的橙皮并未得到充分利用，造成了资源浪费。橙皮中含有大量有益的天然化合物，黄酮类化合物就是最重要的一类。当前，虽然柑橘类黄酮化合物的研究工作已取得一定进展，但还需解决一些现实问题。如尚缺少适合工业化生产的提取工艺参数；缺少快速、高效、简单的检测分析方法；对柑橘类黄酮化合物某些生理功能及其作用机理研究不深入等。
目前，提取黄酮类化合物的方法很多，如水浸提取法、索氏提取法、有机溶剂法等[6]。本研究采用超声波辅助法从慈橙皮中提取黄酮类化合物，研究乙醇溶液体积分数、提取时间、提取温度、料液比对黄酮类化合物提取率的影响。在单因素试验的基础上采用正交试验优化提取条件，为柑橘类果皮的有效利用及黄酮类化合物的开发提供参考。
1 材料与方法
1.1 实验材料
平远慈橙，采自广东省梅州市平原县农业科技示范基地。芦丁标准品（纯度98%）中国食品药品检定研究院；无水乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等均为国产分析纯。
1.2 实验方法
1.2.1 样品采集和预处理
采集新鲜慈橙剥下外皮，洗净后切成小块，50 ℃烘干至恒质量，粉碎，过40目筛子，于磨口瓶中密封干燥贮存。
1.2.2 黄酮类化合物标准曲线的绘制
精确称取干燥至质量恒定的芦丁标准品0.020 g，乙醇溶解，制成0.1 mg/mL的芦丁标准溶液。取标准液 0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分别置于50 mL容量瓶中，依次编号；各加入1.4 mL的5%亚硝酸钠摇匀，静置5 min；再加入1.4 mL的10%硝酸铝摇匀，静置5 min；加入1 mol/L氢氧化钠溶液10 mL ，摇匀显色，最后用乙醇定容至刻度。波长510 nm处测定吸光度。根据所得数据，绘制标准曲线，得出线性回归方程。
1.2.3 黄酮类化合物提取工艺流程
工艺流程：慈橙皮-预处理-超声波辅助提取-抽滤-酸化沉淀-过滤取沉淀物-干燥得粗黄酮类化合物。
1.2.4 优化平远慈橙中黄酮类化合物的纯化工艺
以乙醇为提取剂，采用超声波法提取黄酮类化合物，考察pH值对黄酮类化合物提取率的影响。各称取样品于7个锥形瓶，分别加入pH值4、5、6、7、8、9、10、11的50%乙醇水溶液。50 ℃下超声辅助提取60 min。仅不加原料试剂作为空白对照液，计算pH值对黄酮类化合物提取率的影响。
1.2.5 单因素实验优化平远慈橙中黄酮类化合物的提取工艺
根据标准曲线分别研究乙醇体积分数、提取温度、料液比（原料质量∶溶剂体积，g/mL）、提取时间对黄酮类化合物提取率的影响，仅不加原料试剂作为空白对照。
乙醇体积分数单因素试验：样品分别加入30%、40%、50%、60%、70%乙醇水溶液。温度50 ℃，超声波辅助循环提取60 min，计算乙醇浓度对黄酮类化合物提取率的影响。
温度单因素试验：样品加入浓度50%乙醇水溶液100 mL，分别在30、40、50、60、70 ℃温度下超声波辅助提取60 min，计算提取温度对黄酮类化合物提取率的影响。
超声时间单因素试验：样品用浓度50%乙醇水溶液溶解，料液比1∶50，温度50 ℃，超声辅助提取20、30、40、50、60min，计算提取时间对黄酮类化合物的提取率的影响。
料液比单因素试验：样品按料液比1∶10、1∶30、1∶50、1∶70，在50 ℃下超声辅助取60 min，计算醇溶剂与橙皮质量比对黄酮类化合物提取率的影响。
在波长510 nm处测定吸光度。按照吸光度-浓度标准曲线计算黄酮类化合物提取率。
提取液中黄铜类化合物得率（%）
式（1）中：V0为第一次定容后提取液的体积（mL）；V1为从母液中量取的提取液体积（mL）；V2为第二次定容后提取液的体积（mL）；C为提取液中总黄酮浓度（μg/mL）；M为称取橙皮质量（g）。
1.2.6 正交试验
为系统考察超声波辅助溶剂萃取法的工艺参数，根据单因素实验的结果，选用L9（34）正交试验，以测得的样品中总黄酮含量为考察指标，考察乙醇浓度%（A）、超声温度℃（B）、料液比（C）和超声时间min（D）对黄酮类化合物的提取率的影响[7]。正交试验因素与水平见表1。
1.2.7 最佳工艺验证实验
称取2.00 g橙皮样品5份，调节溶剂pH为10，在优选工艺条件下乙醇浓度为50%，温度50 ℃，料液比1∶50，超声时间50 min进行提取，按照黄酮类化合物的测定及得率的计算方法计算提取率及相对标准偏差[7]。
1.2.8 加标回收率实验
称取2.00 g橙皮样品5份，然后各加入含0.2 mg的芦丁标准溶液，在最佳提取工艺条件下进行提取实验，测量吸光度，并按下式计算加标回收率：
2 结果与分析
2.1 黄酮类化合物标准曲线
按1.2.2方法进行实验，将实验结果进行线性回归，实验结果见图1。得回归方程为C= 86.998A + 0.3881，R? = 0.9982说明在吸光度0.018～0.217，该方程的线性拟合程度较好。
2.2 平远慈橙黄酮类化合物的纯化工艺优化
黄酮类化合物分子结构中含有酚羟基，在碱性和中性条件下溶解度明显增大，而在酸性条件中则沉淀析出。随着溶液pH值的增加，溶解度增大，当pH10左右，提取率达到最大。见图2。
2.3 单因素试验对黄酮类化合物提取率的影响
2.3.1 乙醇浓度对黄酮类化合物的提取率的影响（见图3）
2.3.2 提取温度对黄酮类化合物的提取率的影响（见图4）
2.3.3 提取时间对黄酮类化合物的提取率的影响（见图5）
2.3.4 料液比对黄酮类化合物的提取率的影响（见图6）
上述单因素试验结果表明：最佳提取条件为乙醇浓度50%，温度50 ℃，料液比1∶50，超声时间50 min。
2.4 正交试验优选慈橙皮黄酮类化合物提取工艺
按极差R大小排列因素主次。由表可知，极差值反映的因子影响顺序：C（料液比）>B（温度）>A（乙醇浓度）>D（超声时间）。由正交实验得出最优水平实验方案为A2B1C3D3即乙醇浓度为50%，温度为50 ℃，料液比1∶50，超声时间70 min作为最佳工艺[8]。但由于提取时间对提取率的影响最小，且远远小于其他因素。故最佳实验方案为A2B1C3D1。
2.5 最佳工艺验证实验结果（见表3）
刘蓉、周正勇、罗南芳[9]等用超声波法提取塔罗科血橙皮黄酮类化合物，提取率为1.0213%。本实验进行各因素优化，按上述最佳工艺条件进行验证实验，通过检测计算得出平均提取率为2.10%，相对标准偏差RSD（Relative Standard Deviation）为0.58%。表明提取黄酮类化合物工艺稳定性好，适宜于生产应用。
2.6 加标回收率实验结果（见表4）
通过计算得出加标回收率平均值97.47%，RSD为1.31%（n=5），表明以芦丁为对照，经紫外分光光度法测定黄酮质量浓度的黄酮回收率高，说明本次实验所测数据准确、可靠。
3 结论
本实验采用超声波辅助溶剂法提取平远慈橙皮中黄酮类化合物，用硝酸铝显色法测定黄酮类化合物提取率。采用单因素实验验证，正交试验优化提取工艺条件。结果表明：平远慈橙皮中黄酮类化合物最佳提取工艺为乙醇浓度50%，温度50 ℃，料液比1∶50，超声时间50 min。通过最佳工艺验证，在此条件下平远慈橙皮中黄酮类化合物提取率为2.10%。
在优选的提取工艺条件下，验证实验RSD为0.58%。加标回收率实验RSD为1.31%、加标回收率平均值为97.47%。该工艺操作简便、成本低、收率高，具有良好的稳定性和重复性，可为平远慈橙皮黄酮类化合物的工业化生产提供参考。
参考文献
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黄酮类化合物的含量测定方法 篇3
关键词：黄酮类化合物,含量,测定,方法
黄酮类化合物是广泛分布于自然界中的一类化合物, 生活中常见的食品茶叶、豆类、蔬菜、蜂蜜等都含有大量的黄酮类化合物。黄酮类化合物具有C6-C3-C6的基本骨架, 是许多植物成分的活性化合物, 具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等药理作用。该文综述了近年黄酮类化合物分析中主要应用的方法, 为广大同行提供一些参考。
1 分光光度法
分光光度法主要适用于总黄酮的测定, 具有操作简便、快速、准确度及精密度较好的特点。目前黄酮类化合物测定法有直接测定法和比色法。直接测定法直接以黄酮类化合物为对照物测定样品中的此成分的含量, 比色法是将化合物加入显色剂后测定吸光度再进行换算测定, 其中常用的显色剂有Al (NO3) 3和Al Cl3。直接测定法和比色法的选择要综合考虑, 样品中成分是否会与显色剂发生沉淀反应、样品成分的复杂性等都会影响结果的准确性, 在Na NO2-Al (NO3) 3-Na OH体系中, 碱性条件经常会影响结果的准确性和稳定性, 只有物质中含有邻二酚羟基, 并且邻二酚羟基的邻位没有取代时, Al (NO3) 3比色法才在510 nm左右有最大吸收[1]。
王东升等[2]、李春红等[3]采用紫外分光光度法分别测定了淫羊藿、黄芪中总黄酮的含量。吕凛等[4]比较了直接测定法和Na NO2-Al (NO3) 3-Na OH显色法测定桔皮中总黄酮含量, 结果表明显色法检测, 会出现浑浊现象;直接法检测, 操作简便, 结果准确, 重现性好。时维静等[5]研究直接测定法和Na NO2-Al (NO3) 3-Na OH法测定中药复方总黄酮含量, 结果表明Na NO2-Al (NO3) 3-Na OH法测定中药复方总黄酮含量稳定可靠, 快速准确。徐灵源等[6]采用Al Cl3-HAc-Na Ac (p H 5.5) 为显色剂, 建立一种青天葵药材中总黄酮检测的方法, 并考察14批青天葵药材中总黄酮的含量。
2 薄层色谱法 (TLC)
薄层色谱法是一种进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法, 薄层色谱法主要用于黄酮类化合物的定性和半定量分析, 可同时测定多个样品, 跟高效液相色谱法相比, 薄层色谱法仪器设备简单, 操作方便, 但由于其影响因素较多, 灵敏度和精确度方面不如高效液相色谱法。
陈乃东等[7]采用薄层色谱法检测酸水解过的蕨菜黄酮苷元的组成, 发现其主要成分为山奈酚。徐颖等[8]建立一种薄层色谱分离鉴定、定量异黄酮的方法, 结果表明, 薄层色谱法具有操作简便, 取样量少, 检出灵敏度高等优点。刘德胜等[9]采用薄层色谱法定性检测了落地生根药材水解液中的槲皮素和山奈酚, 实验同时建立了紫外分光光度法测定水解液的总黄酮含量和高效液相色谱法测定水解液中槲皮素、山奈酚的含量, 这些定性定量方法简便、灵敏, 可作为落地生根药材的质量控制方法。
3 高效液相色谱法 (HPLC)
高效液相色谱法适用于极性大、沸点高、分子量大、热稳定性差的化合物分析, 是黄酮类化合物分离检测中使用非常广泛的一种方法, 具有效率高、灵敏度高、分离效率高等优点。高效液相色谱法采用液体为流动相, 将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱, 在柱内各成分被分离后, 进入检测器进行检测, 从而实现对试样的分析。黄酮类化合物的分离中常用的色谱柱是C18柱, 对复杂化合物的分析经常采用梯度洗脱系统, 实现高效率的分离, 紫外检测器、二极管阵列检测器是黄酮类化合物分析中最常用的检测器, 具有灵敏度较高, 线性范围宽, 噪声低, 适用于梯度洗脱的特点。
Yang等[10]采用C18柱、梯度洗脱系统同时分离16个酚类化合物, 并将建立的分析方法成功应用于35批鱼腥草样品。张群林等[11]采用ODS色谱柱, 高效液相色谱-二极管阵列检测器法同时测定了罗布麻叶中的6种黄酮类化合物的含量。章弘扬等[12]采用高效液相色谱-质谱法鉴定了山楂中的绿原酸、原花青素B2、表儿茶素、金丝桃苷、异槲皮苷, 采用反相色谱-二极管阵列检测法同时定量测定了其含量。杨必成等[13]采用C18色谱柱高效液相色谱-紫外分光光度法测定了油菜花粉的渗滤液中的槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量, 为油菜花粉原料及其提取物的质量控制和评价提供了理论和数据支持。
4 毛细管电泳法 (CE)
毛细管电泳是以毛细管为分离通道, 以高压直流电场为驱动力的微分离分析技术, 有多种分离模式, 毛细管区带电泳, 胶束毛细管电泳, 毛细管等速电泳, 毛细管凝胶电泳等。黄酮类化合物分离中经常应用毛细管区带电泳和胶束毛细管电泳。分离中常用的缓冲溶液是硼砂, 常用的缓冲体系有硼砂-氢氧化钠, 硼砂-磷酸二氢钠, 硼砂-硼酸体系, 少量报道也采用过中性磷酸盐的体系。在碱性条件下, 黄酮类化合物中的顺式二羟基与硼酸形成带负电荷的硼酸类配合物, 在电场作用下发生移动。
海平等[14]采用0.25 mol/L硼砂30%乙腈缓冲溶液分离了三种黄酮, 用建立的方法比较了不同产地多叶棘豆中的此类化合物的含量。吴婷妮等[15]对电泳缓冲液的p H、浓度等条件进行优化, 建立测定野菊花中的9种黄酮类化合物的方法。Shi等[16]采用胶束毛细管电泳法测定了枳壳槐花中染料木苷、染料木素、山奈酚、槲皮素和芦丁的含量。叶静等[17]采用胶束毛细管电泳法测定豆粕及发酵豆粕中大豆异黄酮含量, 缓冲液是15 mmol/L十二烷基硫酸钠、5%甲醇的10 mmol/L硼砂溶液 (p H 9.4) 。周逸芝等[18]采用胶束毛细管电泳测定龙柴方及其组方药材黄芩中4种黄酮的含量, 缓冲液是40 mmol/L磷酸氢二钠-15 mmol/L硼砂-40 mmol/L十二烷基硫酸钠-15%乙腈-7.5%丙醇 (p H 8.6) 。
毛细管电泳法和高效液相色谱法均适用于单体黄酮类成分的分析, 与高效液相色谱法相比, 毛细管电泳法具有样品预处理简单、分析更快速的优点, 但在分析的准确度和灵敏度方便较高效液相色谱法稍差, 也是目前黄酮类化合物分析中应用非常广泛的一种方法。
5 其他方法
陈墨等[19]采用差分脉冲伏安法同时测定а-山竹黄酮和γ-山竹黄酮, 研究了p H和静置时间等因素对黄酮分离的影响。邹节明等[20]研究了舒血宁片中总黄酮的共振散射光谱分析方法, 结果表明该方法简便灵敏。孙仕萍等[21]采用单扫示波极谱法测定了保健食品中总黄酮的含量。黄倩倩等[22]采用近红外漫反射光谱法测定黄芩中总黄酮及黄芩苷的含量, 胡钢亮等[23]采用近红外漫反射光谱法直接测定银杏叶提取物粉末中总黄酮的含量。
6 结语