分化能力（精选十篇）
分化能力 篇1
关键词：自我分化,焦虑,自主学习,学业自我概念
美国心理学家Bowen的家庭系统理论为研究个体的成长和发展开拓了新的视角。自我分化能力作为Bowen的家庭系统理论中的一个核心概念, 是指个体区分理智思维与情绪反应的能力, 即在重要关系中平衡亲密与自主的能力。自我分化水平高的个体其心理更健康, 社会适应能力更强。[1]
国外研究表明, 自我分化与社会焦虑、人际关系、心理社会发展、自我认同感的发展以及心理适应、心理健康都密切相关, 主要研究结论如下:[2]
1.自我分化与焦虑呈负相关。Bowen的研究结果表明, 一个人的自我分化水平与他体验到的焦虑呈显著负相关。Nancy则发现自我分化不良的个体在面对外界压力时更能体验到内心的痛苦和焦虑。Skowron认为, 自我分化水平高的个体拥有良好的心理调整和社会问题解决技巧。
2.自我分化与自主能力呈正相关。一些自我分化与自主性的研究结果指出:青少年若和父母的情感是隔离的, 他们的独立自主能力越低, 自我分化水平和适应能力也越低 (Williams&Small, 1986) 。
Bowen自我分化理论也是近年来研究较多的一个课题。但国外的研究大都集中在家庭治疗和心理咨询方面, 而国内有关自我分化的研究才刚刚起步。目前国内的研究只在介绍Bowen的家庭系统理论时提及自我分化的概念, 还未见实证性研究。本文将自我分化能力引入教学中, 通过提高学生的自我分化能力, 有助于降低其学习中的焦虑情绪, 增强学习信心, 激发学习兴趣, 培养自主学习能力, 进而影响其学业成绩。
学习者的自我分化力
Bowen的家庭系统理论 (family systems theory) 家庭是一个情感系统。系统中的成员在情感上是互相影响, 互相制约的。在学校生活中, 学校是一个小社会, 班级是一个大家庭, 老师似家长, 同学似兄弟姐妹。在班级中, 班级成员之间不可避免地在思想和行为上会相互影响, 人际关系的好坏、自我分化能力的高低以及学习者的情感状态都会影响其学习行为和学习结果。由此可见, 学生学习成绩的好坏与个人和师生之间的关系、与学生的自我分化能力有很大联系。
根据鲍恩的家庭系统理论, 分化能力高的人一般具有独立的思想, 能坚持自己的观点、态度和目标, 能够理性地看待事物, 不易受他人的影响, 而分化能力低的人要么没有主见, 摇摆不定, 要么完全忽视别人的想法和意见。同样, 在学校生活中, 自我分化能力高的学生一般有着明确的学习目标, 勤于思考, 不会人云亦云, 而且他们一旦认准目标不会轻易放弃, 最后的成功往往属于他们。
本文从“自我分化力”的角度入手, 结合内外因等不同因素分析学生的学习情况, 研究造成学习者学习成绩巨大差异的原因, 为提高学生学习成绩, 提高教学水平提供借鉴。
自我分化能力对学习成绩的影响
1. 自我分化能力对学生学业自我概念影响
学业自我概念指个体对自己学业能力的一种自我知觉, 是个体对自我学习能力的比较稳定的看法, 是学生对于自己完成某些任务的自我评价和判断。[3]
学业自我概念会对学生选择何种学习任务、遇到困难的坚持性及在学习上所付出的努力产生影响。以学习不太好的学生为例, 由于他们在学习上不断经历失败, 从而对自己的学习能力产生怀疑, 丧失信心, 最终产生强烈的习得性无助感。为了避免失败, 他们逃避学习、学习动机逐步降低, 学习成绩自然就会越来越差。由此可见自我概念的形成会受到学业成绩的影响, 而已形成的消极自我概念又反过来压制他们学习的积极性, 两者相互影响, 形成恶性循环。
2. 自我分化能力对学生学习动机的影响
尼克洛斯 (Nicholls) 等人认为, 学生对学习任务的投入有两种方式, 一种叫任务卷入 (task involvement) , 另一种叫自我卷入 (ego involvement) 。任务卷入是指个人希望通过自主地完成任务来发展自己的能力, 任务卷入者不会把成败看作是对自己自尊的威胁, 它可以增强个体完成任务的内部动机;自我卷入是指个人通过与别人比较, 以成功或挫折来肯定或否定自己的能力, 它往往与自尊相联系, 削弱个体完成学习任务的内部动机[4]。目前大部分学生的学习属于自我卷入, 他们常常根据老师、同学对自己的评价以及态度, 形成相应的自我概念, 这正是学生自我分化能力偏低的表现。我国的教育教学通常是更多地强调认知因素, 而忽略情感认知方面的因素, 显然这样会加剧自我概念偏差的那些学生的挫败感, 因此这类学生就会将失败的结果归因于自己能力的不足, 久而久之就会丧失学习动机, 产生厌学情绪。
3.自我分化能力对学生学习策略的影响
学习策略是指学习者在学习活动中有效学习的程序、规则、方法、技巧及调控方式。[3]良好的学习策略有利于提高学生的学习成绩, 达到事半功倍的效果, 但是好的学习策略不一定会适应所有的学生, 因为不同个体之间会存在巨大的差异, 这就要求学生能够根据自己的实际情况探索适合自己的有效的学习策略。
自我分化能力低、自我概念偏差的学生通常会把自己学习的失败归因于能力差、思维迟钝、记忆力差或任务难度太大等因素。这些学生常常是在外力强制下学习, 他们不愿意主动地学习, 认为自己不是学习的料, 索性破罐子破摔。他们更不会积极主动地探索合理、有效的学习策略。在认知策略方面表现为没有明确的学习目标, 没有科学的学习计划;在记忆策略方面表现为不能有效地使用记忆策略, 如借助语境和联想来记忆单词, 达到举一反三, 不会将新旧知识进行联系和归类。
提高学生自我分化能力的策略
1.引导学生对学业成败进行正确的归因, 形成正确的自我概念
心理学家在研究中发现, 成就水平高的人在失败时往往把原因归于努力不够, 即使失败也不灰心, 相信努力与结果之间具有依随性, 不产生无力感, 表现出积极的行为。成就动机水平低的人在失败时往往把原因归于能力不足, 容易灰心丧气, 认为努力也不能带来相应的结果, 容易产生无力感。[3]
习得性无力感会对学生产生严重的负面影响, 因此在教学中, 教师应针对学生的实际学习能力, 提供难度适宜的学习任务和成就标准, 在学生遇到困难时给予及时帮助和鼓励, 使他们能够从成功的学习开始, 体验学习成功的喜悦, 获得自我效能感, 形成正确的自我概念。
2. 改善学生学业自我概念, 培养学习成就动机
正确的自我概念的标志是具有自尊心 (self-esteem) 。罗杰斯认为, 自尊心是经由自我评价之后自我接纳 (self-acceptance) 时的自我价值感 (self-worth) 。[4]成就动机是一种以高标准要求自己, 以力求取得学习活动成功为目标的动机, 成就动机是在通过胜任某些活动获得尊敬的需要基础上产生的。[5]
学业自我概念呈现出多维度的结构, 与具体学科具有很强的对应性与各科学习成绩高低相关。但是学业自我概念并非完全是由学习成绩决定的, 因此, 单从提高学习成绩, 期望显著改善学生的学业自我概念, 其效果可能并不理想。这是因为教师和家长在评价学生的学业自我概念时都是以成绩比较为基础的, 往往忽视了学生自身的成就动机在学业自我概念形成过程中的作用。
成功是自我激励、增强自信心的最有效的途径。学生在学习过程中, 由于多次学习的成功, 体验到需要满足的乐趣, 逐渐巩固了最初的求知欲, 才会形成一种比较稳固的学习动机。因而教师在课堂教学中应有意识地培养学生的成就动机。在学校里, 一方面可以采取适当的方法如可以通过改变课题的难度使课题对学生的意义 (即诱因值) 发生变化;另一方面根据学生的实际情况培养成就动机, 尽可能创造条件使学生在学习中获得成功的体验, 要善于发现这些学生的优点, 为孩子们提供尽可能多的发挥特长和展示才华的机会, 让他们在实践中感受到自己是“有出息”的、是有所作为的, 从而使他们培养起积极的自我概念。
3. 设置恰当的学习目标, 培养学生的自我效能感
自我效能感是指个人对自己是否能够成功进行某一成就行为的主观判断, 他与个体的自我概念有密切的关系。[3]例如, 一个自我概念过高的学生, 其自我效能感也会偏高, 由于其自我认知失真, 确立的学习目标不合实际, 造成学习的挫败。因此要培养学生的自我效能感应从培养学生正确的自我概念入手。教师应根据最近发展区理论, 帮助学生设置切实的目标, 让他们意识到只要投入适当的努力, 就有可能获得成功, 实现目标, 从而体验成功的喜悦。
学生在学业上的成就感是形成正确自我概念的关键, 正确的自我概念有助于提高自我分化能力。教师可以通过帮助学生设立适当的预期, 设置挑战性的任务来实现。教师在设置任务时应注意, 任务应既具有挑战性的, 也是通过努力能达到的, 只有在学生能力范围之内, 又具有一定挑战性的目标, 才能有最佳的动机激发作用。在学生开始任务之前, 教师应对完成任务的需要的策略加以训练。任务执行过程中当学生出现错误时, 应给予指导, 修正错误, 使学生相信他们正在一步步地走向成功。同样表扬学生时应关注的是他们自身的进步, 而不是拿他们与其他人比, 让学生尽可能多地获得成功的体验。教师应注意到这些学生的每一点进步, 将其固定强化, 使学生相信只要他们付出努力最终是可以成功的, 激励学生不断地进步, 逐渐培养起学生的自我效能感。
总之, 提高学生的自我分化能力, 帮助他们形成正确的自我概念, 有助于学生对自己的学业成败进行正确归因, 有助于消除习得无助感, 相信自己经过努力会取得成功, 形成较强的内在驱动力, 有了明确的学习目标和坚定的信念, 学习成绩自然会提高。
教育建议
既然自我分化力的高低在很大程度上影响着学生的学习成绩, 因此我们应设法地提高学习者的自我分化力。
在家庭教育方面, 家长对子女的态度应有所改变。由于中国的传统文化十分强调集体主义, 亲子关系往往关注的是彼此的关系和归属而不注重个体的独立发展。由于家长处于权威地位, 他们往往认为孩子永远长不大, 因此事事替孩子做主, 这样就容易导致孩子依赖和顺从父母, 从而没有自己的主见, 一旦孩子将来离开家庭就容易导致各种心理问题。因此, 家长应改变观念, 凡事多听听孩子的意见, 鼓励他们自己做主。其次:在学校教育方面, 老师应积极地宣传心理健康知识, 加强心理健康教育, 对有问题的学生可以开展心理讲座, 并辅以团体心理辅导。最后:在自身发展方面, 自己要学会独立思考, 学会理智地分析事情, 既能够和他人保持亲密的人际关系又能够独立行事, 可以建设性地吸取他人建议的同时, 也能够提出自己的见解。
参考文献
[1]Bowen, M.Family therapy in clinical practice[R].Northvale, NJ:Jason Aronson.[1]Bowen, M.Family therapy in clinical practice[R].Northvale, NJ:Jason Aronson.
[3]张大均.教育心理学[M].北京:人民教育出版社, 2004.[3]张大均.教育心理学[M].北京:人民教育出版社, 2004.
[4]雷雳.学习不良少年的自我概念与父母评价的特点及关系[J].心理科学, 1997 (4) .[4]雷雳.学习不良少年的自我概念与父母评价的特点及关系[J].心理科学, 1997 (4) .
农商行分化悬殊 盈利能力整体不济 篇2
但是多年来，农信社发展艰难，历史包袱的重压是改革前农村信用社举步维艰的重要原因。特别是受中西部地区农村经济发展滞后，以及前些年体制性因素导致经营不慎的影响，全国因历史包袱过重形成的监管评级6级及以下的机构还有一百多家。
获得一定发展且已经改制的农商行，近年来发展相对较快，《投资者报》对已发布2011年年报的9家农商行进行了甄选，最终评出北京农商行为2012“最佳农商行”。
“三巨头”规模破3000亿
由于地域局限性以及历史因素影响，农商行资产规模相对较小，总体水平排在城商行之后。
据《投资者报》统计，截至2011年末，9家农商行平均资产规模为1585亿元。其中有3家农商行资产规模在3000亿元以上，6家都不足千亿。
资产规模最大的是北京农商行，达3773亿，资产增长率为13.86%。这与该行的网点规模有很大关系，截至去年末该行营业网点全面覆盖全北京市182 个乡镇，有203家分支机构，根据该行“3110”渠道工程建设计划，报告期末，已建成财富管理中心5 家，贵宾理财网点85家，普通理财网点253家，单一功能网点50家，初步实现覆盖高、中、低端客户的渠道建设目标。
其次是重庆农商行，该行总资产规模3448亿元，增长率20.76%。该行目前是唯一一家在港上市的农商行。
上海农商行资产规模排列第三，为3089亿元，同比增长22.92%。
资产规模增速最快的是苏州银行，该行资产总额为831亿元，同比增幅达50.46%。该行最初于2004年12月成立，成立时名称为江苏东吴农村商业银行股份有限公司，2010年9月经银监会批复，更名为苏州银行，于2011年将其隶属关系由农村中小金融机构监管序列调整为中小商业银行监管序列。由于其刚刚更改隶属关系，所以暂时还将其列入农商行队列。
农商行由于改制不久，资本充足率还比较高，存贷比也离监管红线较远。
整体盈利能力偏弱
整体来看，农商行盈利能力偏弱。9家农商行去年平均净利润为16亿元，事实上，净利润在16亿元以上的只有资产规模上千亿的那3家。剩下的6家中，净利润最高的苏州银行也只有10亿元。
盈利能力强弱也并不与银行资产规模完全成正比，在净利润在16亿以上的3家农商行中，净利润最高的是重庆农商行，2011年净利润42亿元，增幅为38.77%。
其次是上海农商行，净利润为32亿元，增幅为43.36%；最后是北京农商行，获净利润22亿元，但增速是 9家农商行中最高的，达131.62%。
虽然净利润有所不及，但是北京农商行的营业收入高于上海农商行。
2011年末，北京农商行营业收入为102亿元，同比增长46.68%；而上海农商行营业收入为90亿元，增幅为41.56%。
为何最终净利润却是上海农商行更高？主要原因在于北京农商行业务管理费及其他业务支出增加。
北京农商行2011年业务管理费为45亿元，增长32.93%，其他业务支出也表现为增加；而上海农商行业务管理费为35亿元，其他业务支出则减少了两千多万。
9家农商行中净利润最低的是无锡农商行，为7.37亿元。净利润增速最低的是江苏江阴农商行，2011年净利润为8.97亿元，同比增幅仅为4.3%。
不过，从人均盈利能力角度看，资产规模大的银行并不一定占优。
人均盈利能力最强的是江苏江阴农商行，人均盈利114万元；其次是江苏张家港农商行，人均盈利105万元；位列第三的是常熟农商行，人均盈利100万元。
重庆农商行虽然净利润最高，但其人均盈利能力最弱，只有41万元，该行员工人数也最多，有13524名员工，而其他有数据的农商行员工人数均在1000人左右。
分化能力 篇3
1. 学生对数学概念掌握扎实程度不同
我国受应试教育长期影响,教师在教学过程中始终以传授知识的模式进行教学. 这种模式使学生大多数的学习都处于死记硬背的状态下,然而对于知识的内涵确没有能够真正的体会和消化理解. 尤其在高中的数学学习过程中,涉及到的数学知识概念深奥难懂,如果仅凭死记硬背解题方法,无法真正学会运用这一理论技巧. 同时,由于学生对知识点的理解不尽相同, 因此掌握的程度也就有所不同,甚至有些学生对知识点含义产生曲解,很容易造成分化现象的出现. 例如,有些学生直接将函数的极值点等同于f( xa) = 0,这是对数学概念的完全曲解. 这样对数学概念的理解不透彻使得学生在面对运算问题的过程中无法运用所学知识,导致运算能力下降[1].
2. 学生运算习惯的不同
在数学的学习过程中,需要认真的态度和严谨的思维,将所学知识、数学思维和实际问题进行综合才能得到解决问题的方法. 高中数学相对初中来讲在难度上有所增加,需要的知识含量也更多,在进行运算的过程中更要拥有综合运用知识的能力,要更加缜密的思维逻辑来进行解题,然而高中学生在遇到问题的过程中往往不能够完全做到细心,马虎的现象时有存在,将数学问题中的数字看错导致解题完全错误,或者对概念理解含糊,无法将其运用到实际问题中等现象,导致学生的解题能力下降. 思维缜密、基础知识牢固的学生往往数学运算能力较高一些[2].
二、普通高中数学运算能力提升的对策
1. 掌握牢固的基础知识并学会延伸
学生在进行高中数学的学习过程中要注意牢固的掌握基础知识,要深刻理解概念的内涵而不只停留在传统的对知识死记硬背的阶段. 这就要求教师在日常的教学过程中,首先要将基础概念和知识点进行深刻地讲解,不能只停留在字面的意思上,将概念的本质以精确的语言描述给学生; 其次,在课堂教学中采用多种教学方法,例如多媒体教学、实验及游戏等形式,将本节课程的知识点应用到实际问题当中,加强学生的理解程度,使学生的认识能够像更深层次延伸. 这样学生在运用概念进行运算的过程中才更能够得心应手[3].
2. 养成良好的解题习惯
这是针对学生由于思维不够缜密而引起的数学运算能力分化现象而提出的. 学生在运算过程中由于马虎造成的运算能力下降的现象十分常见. 因此,教师在日常的教学过程中要及时规范学生的运算过程,帮助学生养成良好的解题习惯,提高运算能力. 要帮助学生建立起正确的数学学习态度,数学学习要求具有缜密的思维和严谨的态度,在平时练习过程中对学生符号和数字的书写进行严格的规范,减少书写错误.
首先,认真审题. 在平时的练习中很多运算失误都是审题不认真导致的,因此要严格要求学生认真审题,正确理解题目含义,才能选择正确的解题思路进行解题. 其次,准确的叙述,在运算过程中要能够将运算过程清晰的呈现出来,无论是运用公式还是语言,都应该清晰精确,才能帮助学生顺利的找到答案.
3. 培养学生良好的学习习惯
在日常教学过程中,要培养学生养成良好的学习习惯,将一些经常出现和应用的知识和公式等通过总结和归纳,以一种容易记忆的方式传授给学生,使学生对这些知识牢固掌握和记忆,才能在运算中熟练使用. 如加强学生对一些固定搭配的记忆和训练: 勾股数( 3,4,5,6,8,10; 5,12,13) ,还有平方数的正确记忆、阶乘数等,这些知识的记忆能够使学生在遇到问题时第一时间进行反应,之后在针对下面的步骤进行旅顺,有助于学生解题思路更加清晰,提高运算准确率[4].
总之,传统的教学模式不利于高中数学课堂对学生数学能力的培养,要及时改变这种模式来适应现代社会发展对数学人才的需要. 然而在高中的数学教学中数学运算能力的培养和提高能有效促进学生数学能力的提高. 在对学生运算能力加强培养的过程中,要加强学生对基础数学知识的理解才能促进学生的应用,同时培养学生良好的数学学习习惯,养成良好的审题和解题思路,在进行解答过程中保持清醒的思路,逐渐提高运算能力.
摘要：学生数学运算能力的高低对于高中阶段的数学学习至关重要.良好的数学运算能力能够使高中阶段所学的数学知识更加牢固的掌握,有助于数学思维的建立和培养,更有助于学生增强对数学学习的积极性.然而高中阶段的数学学习过程中也是学生数学能力很容易产生分化的关键时期.数学能力的培养也是高中数学教学内容的重要组成部分,高中数学教学过程中不能够只注重知识的传授而更应该注重培养学生解决数学问题的思维和能力.现阶段我国很多高中数学教学出现了运算能力分化的现象,应及时找出主要原因并采取有效措施改善这种现象,促进学生的全面发展.
业绩分化 转型成风 篇4
从社会消费品零售总额服装类情况来看，8月、9月增速均在12%左右，预计四季度仍将保持10%以上的稳定增速。8月，全国百家和50家重点大型企业服装类商品零售额同比分别增长8.6%和8.8%，创年度新高。总体来看，在作为传统淡季的三季度，服装类上市公司零售终端开始复苏，触底回升态势明显。
根据三季度数据显示，行业整体呈现两大明显特征。其一，消费龙头业绩表现较好。例如，男装品牌海澜之家凭其“高性价比+类直营模式”保持50%以上的逆势高增长；主营休闲装和童装的森马服饰，童装业务保持20%以上的高增长，拉动了公司整体业绩的提升，休闲装业务已触底，预计下半年将开始正增长。其二，传统品牌服饰仍在探底。男装品牌订货会仍未转正，预计全年负增长的公司占多数，高端品牌比如朗姿股份和卡奴迪路业绩负增长压力依旧较大。
当前，服装行业正处在转型的阵痛期，亟待供应链和增长模式的深层次变革。在此背景下，2014年三季报业绩整体平淡，但消费龙头表现强势。传统男装和高端服饰仍需顶住压力，积极转变经营思路，以此提升业绩。
行业进入新常态，企业在稳定发展的同时，也需关注创新转型，以发挥自身内生动力。以际华集团、七匹狼、百圆裤业、九牧王等为代表的上市公司开启了转型动作。新兴际华集团是六家央企试点单位之一，转型进入体育产业方向明确。此外，七匹狼于近日与苏宁举行发布会，宣布旗下“狼图腾”品牌极致衬衫进驻苏宁双线渠道开启预售。百圆裤业因收购跨境出口零售电商环球易购而出现了连续涨停；九牧王上线“E商城”平台；休闲装品类的美邦服饰开始涉足金融；森马收购儿童早教机构，欲打造儿童综合一站式服务平台；而原本从事高端女装业务的朗姿股份也通过参股韩国阿卡邦公司拓展婴幼儿服装用品市场。（王赛）
NEWS I 快讯
七匹狼携手苏宁首发“狼图腾”衬衫
10月9日，苏宁与七匹狼在南京举行主题为“颠覆平凡发现极致”的发布会，七匹狼宣布旗下“狼图腾”品牌极致衬衫进驻苏宁双线渠道独家首发。
七匹狼电商总经理王咏表示，“狼图腾”是基于互联网特征打造的时尚资源整合品牌，通过预购、在线定制等模式打造极致单品，据此颠覆传统服装行业的营销模式。据王咏介绍，首款衬衫无论是选材、制作都堪称极致，使用了埃及长绒棉极品GIZA45，邀请英国皇家御用品牌THOMAS MASON制作面料，140纱支的极致工艺，使衬衫的手感柔滑如丝，光洁如瓷；香港手工制裁工艺确保每一片衣片都经过细致的裁剪、缝纫、熨烫，手工制作的步骤也增加了衬衫的合体性和舒适性。衬衫的版型设计则由拥有30年经验的意大利著名版型师Franco De Zuani担当，立体贴合裁剪，Zuani设计的“白金立领”专利技术，让每一件衬衫都不需要任何外力就能利索直挺。同时，澳大利亚深海白蝶贝壳经人工打磨后作为衬衫纽扣，英国150年高士缝纫线，德国200年骏马布衬，这些材料的运用使细节更加精致。
据悉，此次七匹狼推出“狼图腾”并选择苏宁渠道作为首发，此举甚为业界关注。王咏对此表示，与苏宁合作意在利用其双线优势，通过苏宁核心门店进行展示，丰富“狼图腾”的品牌推广方式，苏宁易购则将作为产品的主力销售渠道。（潘潘）
DFO举办国际设计师品牌订货会
10月16～23日，作为上海时装周的一部分，DFO举办了大型国际设计师品牌订货会，品牌数和展览面积均较4月的订货会扩大了数倍。
此次DFO Showroom带来了40多个顶尖时尚潮牌，包括Lady Gaga钟爱的前卫巴洛克风格女装Dora Abodi、高调诙谐女鞋Minna Parikka，与全球200家顶尖买手店合作的法国街头摇滚潮牌American Retro、英国名媛模特Poppy Delevingne常穿的波西米亚风格品牌Manoush、Burberry代言人Cara Delevingne偏爱的手绘T恤品牌G Kero，以及时装周街拍潮人Anna dello Russo鼎力支持的太阳眼镜Spektre等。本次订货会期间，来自全国各地的买手、代理商、经销商、商业地产商均前来洽谈咨询，取得了良好反响。
据悉，今年4月，来自欧洲的国际时尚品牌经纪DFO（杜纳联品）曾在上海新天地举办首次国际设计师品牌订货会，11个国外品牌向全国买手展示，获得了巨大反响和大量订单。这进一步加大了DFO进入中国的决心，并于今年5月在上海虹桥地区开设了常年Showroom。（文中伟）
报喜鸟启动C2B模式
温州服饰上市公司报喜鸟近日联合阿里巴巴在天猫商城推出全新商业模式——C2B（消费者对企业）个性化全品类量体定制服务。报喜鸟是目前国内少数几家能真正做到全品类定制的服装品牌，其能提供的定制品类涵盖西服、休闲裤、衬衣等。2015年，报喜鸟还将提供T恤的量体定制。
报喜鸟集团董事长吴志泽表示，“C2B模式将线上和线下的优势结合，消费者下单方便，又能充分体验到线下的服务和氛围，这是最符合未来电商消费的商业模式。”
他认为，报喜鸟的优势就是把定制做成流程工业化和服务个性化的结合，来实现定制业务服务价格的大众化。无论客户在天南海北，只要线上联系，可以就近到报喜鸟专卖店或者由店里量体师上门量体。
分化能力 篇5
1 材料
1.1 实验动物及试剂
2周龄雌性Wistar大鼠,购自军事医学科学院实验动物中心。α-MEM培养基、特级筛选胎牛血清(Hyclone),胰酶(Amresco),Percoll(Pharmacia,比重为1.073 g/L)。地塞米松、异丁基甲基黄嘌呤、消炎痛、ALP染色试剂盒、碱性磷酸酶活性组化试剂盒(86-C)(均购自Sigma);β-甘油磷酸钠盐和维生素C钠盐(Fluka公司);磷酸对硝基苯酚二钠盐(美国Amresco公司)。携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)由军事医学科学院吴斌老师馈赠,滴度为5×1010 pfu/m L。油红O染料购自北京化工厂。
1.2 实验设备
光学倒置显微镜(Olympus);水平台式离心机(Jouan公司);2300型二氧化碳气体培养箱(Sheldon Manufacturing Inc.);洁净工作台(北京半导体设备一厂);FACS Calibur流式细胞仪以及CELL Quest分析软件(Becton-Dickinson公司)。
2 方法
2.1 大鼠MSC的分离和培养
取2周的雌性Wistar大鼠2只,断颈处死后75%乙醇中浸泡5 min,移入超净台,无菌条件下取出双侧股骨和胫骨,剪去骨骺端,用含10%血清的α-MEM培养基冲出骨髓,离心弃脂肪层。所获细胞重新用5 m L上述培养基制成细胞悬液,并小心加入含5 m L Percoll分离液(1.073 g/L)的离心管内,保持界面清晰,1 500 r/min离心20 min,吸取约1 m L界面细胞层于另一离心管中,用上述培养基重新制成细胞悬液,1 200 r/min离心8 min,反复2次,以便洗净细胞悬液中的Percoll,用含10%筛选胎牛血清的α-MEM培养基(含有100 u/mL青霉素和链霉素)重悬细胞,计数细胞,以每孔2×106个细胞接种在6孔板中,放在37℃、饱和湿度及5%二氧化碳的孵箱内培养。48 h后全量换液,弃未贴壁细胞,以后3 d换液1次,待细胞长至70%～80%融合时,0.05%的胰蛋白酶消化细胞,并按1∶3的比例传代。
2.2 Ad-GFP感染MSC
将处于对数生长期的第3～5代MSC按照合适密度接种于25 cm2培养瓶中,贴壁生长24 h后用Ad-GFP以MOI为150 pfu/细胞浓度感染MSC,过程如下:吸弃培养上清,加入含Ad-GFP病毒颗粒的无血清α-MEM培养基孵育2 h,然后换成含10%血清的完全培养基继续培养,每天用荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光蛋白的表达情况。在感染48h时消化细胞,用PBS洗细胞2次后,重悬于含1%多聚甲醛的PBS液中。用FACS Calibur流式细胞仪进行检测,CELL Quest软件分析GFP荧光蛋白表达率(即感染效率)。
2.3 成脂及成骨分化诱导及检测
取生长状态良好的第3代MSC,按5×103细胞/孔的密度接种至24孔培养板。贴壁培养24 h后,按2.2所述方法,用Ad-GFP以感染强度为150 pfu/细胞感染MSC。48 h后,非诱导组继续用完全培养基培养,诱导组应用脂肪诱导培养液(地塞米松1μmol/L+异丁基甲基黄嘌呤0.5 mmol/L+消炎痛100μmol/L)或成骨诱导培养液(地塞米松100nmol/L+β-甘油磷酸钠盐10 mmol/L+维生素C钠盐0.05 mmol/L)进行脂肪或成骨分化诱导。3 d换液1次,诱导14 d后通过Oil-Red O染色检测脂质沉积,应用BCIP/NBT染色试剂盒进行碱性磷酸酶(ALP)染色,用4-NPP法检测ALP活性。
ALP染色方法:按照试剂盒说明书进行。量取9mL去离子水,并调整温度至18～26℃;准备重氮盐溶液:吸取0.2 m L FBB-碱性溶液至Eppendorfy离心管,再吸取0.2 m L亚硝酸盐溶液轻轻混匀,静置2 min;将第二步骤所得的溶液加入到第一步骤准备的去离子水中;吸取0.2 m L萘酚AS-Bl碱性溶液加入到稀释的重氮盐溶液中,彻底混匀;弃去24孔板中的培养基,用PBS洗2～3次;在每个孔中加入0.4 m L第四步骤所得的溶液,室温下静置15min;弃去染色液,用去离子水洗2～3次,镜下观察并照相。
ALP的活性检测方法:吸出24孔培养板中的培养基,用Tyrode’s BBS 0.8 m L/孔洗涤细胞两次;加入ALP检测试剂工作液每孔0.4 m L,37℃放置5～20 min,以无细胞的空白孔作对照;其间,96孔培养板每孔预加25μL 3N Na OH终止液,从24孔板吸出100μL至96孔培养板中;405 nm酶联仪测定光吸收值。
Oil-Red O染色方法:弃旧培养基,用PBS洗2～3次;4%多聚甲醛固定30 min,用PBS洗2～3次;Oil-Red O染色4～5 h;去离子水洗2～3次,照相。
2.4 统计学分析
实验数据用均数±标准差表示,利用STATA7.0统计分析软件进行统计学显著性分析,P<0.05代表差异具有统计学意义。应用方差分析对成骨分化ALP活性检测结果进行统计学分析。
3 结果
3.1 大鼠骨髓MSC的形态学观察
原代分离的大鼠骨髓MSC光镜下呈圆形(图1-A);培养2 d后,光镜下可见散在分布的贴壁细胞,形态为成纤维细胞样,呈长梭形、三角形或多边形,大多为单个细胞散在生长(图1-B);3～7 d,细胞迅速增殖,出现形态均一、呈放射状排列的细胞集落,细胞形态更加清晰,细胞扁平,胞体狭长,核呈椭圆形,有长短不一、粗细不均的突起;7～10 d左右,细胞已基本贴满培养孔板底部,呈80%以上融合生长状态,螺旋状或网状排列,此时进行第一次传代培养(图1-C)。传代培养的MSC形态上更加趋于一致,为成纤维细胞样,生长旺盛,每隔2～3 d传代1次。
3.2 腺病毒载体感染MSC的效率
Ad-GFP以MOI=150 pfu/细胞感染MSC后48 h,普通光学显微镜下观察细胞形态与普通MSC无异(图2A),荧光显微镜下见绿色荧光蛋白阳性细胞(图2B)数在80%以上,流式细胞仪检测其感染效率可高达97.82%(图2C),说明腺病毒能够高效感染大鼠MSC。
3.3 腺病毒载体对MSC脂肪分化潜能的影响
MSC及MSC-GFP诱导组经脂肪分化诱导液诱导5 d后,在相差显微镜下可见细胞质内出现散在高折光性的小脂滴,随着诱导时间的延长,出现脂滴的细胞数目增多,细胞体积增大,由原长梭形变成圆形或多角形,细胞内脂滴也逐渐增多,小脂滴聚集成大脂滴,细胞核被大颗粒状的脂滴挤向一侧。诱导后14 d进行Oil-Red O染色,脂滴被染成桔红色,证实诱导成脂肪细胞(图3B,3D)。相反,MSC及MSC-GFP未诱导组没有脂肪滴形成,Oil-Red O染色阴性(图3A,3D),组间比较无明显差异,说明腺病毒载体不影响MSC向脂肪细胞的分化能力。
3.4 腺病毒载体对MSC成骨分化潜能的影响
MSC及MSC-GFP诱导组经成骨诱导分化液诱导14 d后,光镜下观察可见大量扁平状成骨细胞形成,ALP染色阳性(图4B,4D),而未诱导的MSC组几乎没有ALP着色(图4A,4C);ALP活性检测显示,MSC及MSC-GFP诱导组ALP活性显著高于未诱导MSC及MSC-GFP组(如图5,P<0.05),而两诱导组间比较无统计学差异(P>0.05)。说明腺病毒感染本身不影响MSC向成骨细胞的分化能力。
4 讨论
MSC具有多向分化性;以MSC为靶细胞,将基因治疗技术和细胞移植技术相结合,为组织创伤修复提供了新的思路和途径。这种Ex-Vivo是指在体外用携带目的基因的载体转染自体细胞,然后再将细胞移植到体内,利用目的基因在靶细胞内的表达产物,结合细胞的多向分化特性,从而达到基因和细胞治疗的双重目的[3]。
理论上,这种特殊功能性基因修饰后的干细胞,一方面通过基因工程可以控制干细胞功能、增殖及分化,从而克服干细胞的功能上的某些缺陷。另一方面,还可以克服基因治疗临床疗效短及基因编码安全性的问题,有望成为修复多种组织损伤,包括缺血性心脏病的有效途径。目前此类研究较多,载体的安全性、基因转移的高效性,对靶细胞的细胞生物学行为的影响等,一直是研究者关注的焦点。
目前常用的载体主要有病毒载和非病毒载体两类。非病毒载体分为物理法和化学法。物理法包括裸质粒直接注射法、微粒轰击法、电击法及显微注射法等;化学法包括DEAE-葡聚糖法、脂质体介导法及磷酸钙共沉淀法。这类载体易于制备,相对安全,具有低毒性、低免疫反应的优点,但转染效率不高,表达时间短暂且靶器官局限[4,5,6]。付勤等[6]应用脂质体介导胰岛素样生长因子-1基因转染兔MSC的转染效率仅为30%左右。病毒类载体主要有逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体和腺相关病毒载体[7,8]。病毒载体克服了非病毒载体转染效率低的缺点,且具有良好的靶向性,使得病毒载体在基因治疗和实验研究中被广泛应用。相比较而言,腺相关病毒分子量小,结构稳定、无致病源性的缺陷病毒,但不能生成高浓度病毒液。复制缺陷型逆转录病毒载体感染效率高,但只能感染处于增殖期的细胞,使宿主细胞的范围受到限制,且整合至宿主基因组,有插入突变的风险。慢病毒载体与逆转录病毒相似,但宿主范围更大,亦与宿主基因组相整合。腺病毒具有基因载容量大,易制备高滴度病毒,感染效率高,宿主范围广,能感染增殖细胞和非增殖细胞在内的多种类型细胞,不整合到宿主染色体内、遗传毒性较低,在表达时间上具有自限性等优点,是心血管领域目前应用较多的一种基因治疗载体,目前已成功地应用于多项基因治疗临床试验中[9,10]。
本研究发现,腺病毒载体对MSC的感染效率较高。Ad-GFP以MOI=150 pfu/细胞感染对数生长期的MSC,感染效率高达97.82%;说明MSC是腺病毒基因载体的良好靶细胞。这与国外学者SUN[10]等的研究相似。此外还有较多的研究发现,除腺病毒载体外,逆转录病毒载体、慢病毒均可携带目的基因高效转染MSC,并且在体内长期有效地表达,而不影响其干细胞特性。HARINGTON[11]报道,MSC易于被逆转录病毒转染,其转染率可达50%～80%。CHAN等[12]研究,发现慢病毒和逆转录病毒载体都可以高效转染MSC,慢病毒转染效率为97.7%,而逆转录病毒转染效率为80.2%。以上研究均说明,MSC是将外源基因带入体内的理想工具细胞。
腺病毒载体可能诱发机体的免疫反应,产生中和抗体,具有生成免疫学或炎症反应的不利因素[13]。但也有学者认为,这种免疫排斥反应较弱,对机体造成损伤不大,且免疫排斥反应还可起到限制目的基因的过度表达,一定程度上避免了肿瘤的产生。这种基因表达的短效性也避免了长时间表达的副作用和突变危险,使基因治疗可控性增强。此外,用腺病毒携带目的基因先在体外感染MSC后再移植入体内的方法,也避免了病毒与机体免疫系统的直接接触,从而降低了免疫排斥反应,理论上较适合未来的临床应用。
广泛的分化潜能是MSC的特性之一。已有大量的实验证实,MSC在合适的分化条件下不仅可向中胚层来源的骨、软骨、心肌、脂肪和肌腱等细胞分化,还可跨胚层向内胚层和神经外胚层(如肝、胆管上皮、肺、肠、皮肤上皮和神经元及神经胶质细胞)分化[2]。这种多向分化潜能使MSC成为组织工程的种子细胞,广泛用于创伤性疾病和组织缺损的修复与重建。本研究发现,Ad-GFP感染对MSC的细胞形态及体外成骨和成脂分化潜能无明显影响,说明腺病毒载体用于外源基因导入MSC是安全、有效的。
分化能力 篇6
1 材料与方法
1.1 主要试剂和仪器
α- MEM培养基、青链霉素、L- 谷氨酰胺(Gibco,美国);胎牛血清FBS(浙江天杭生物科技有限公司,杭州);0.25%胰蛋白酶(Amresco,美国);维生素C、地塞米松、β- 甘油磷酸钠、抗坏血酸、LiCl、二甲基亚砜、茜素红、油红O (Sigma,美国);抗CD146、抗CD105、抗STRO- 1 抗体(R&D Systems,美国);ALP染色试剂盒(碧云天生物技术研究所,上海);ALP活性检测试剂盒(南京建成生物工程研究所);细胞总RNA提取试剂盒、一步法RT- PCR试剂盒(Takara,日本)。二氧化碳恒温培养箱(Thermo Forma,美国);离心机(Kubota2l00,日本);YJ- 875 型超净工作台(苏州净化设备厂);倒置相差显微镜及照相系统(OlympusIX70,日本);6孔培养板、平底96孔板(Falcon,美国);流式细胞仪(Beckman Coulter, Fullerton,美国);超声震荡仪(上海生源器械厂),酶联免疫检测仪(BIO- TEK, 美国);紫外线分光光度仪(Eppendorf,德国)。Real time PCR仪(Applied biosystems,美国)。
1.2 人OF- BMMSCs分离、纯化和鉴定
1.2.1 原代细胞培养及纯化
取正颌手术患者无病害的颌骨骨碎片和种植手术中取得的颌骨碎屑,分别来自3 名身体健康的正颌患者和3 名身体健康的种植患者(18～35 岁)。置于α- MEM中4 ℃保存,将骨碎片用1 mol/L PBS液冲洗3 次,每次5 min,离心得到细胞沉淀和骨碎片。用含有10%FBS的α- MEM培养基将细胞沉淀均匀吹散与骨碎片一并接种到六孔培养板中[7,8]。在37 ℃、5% CO2 和饱和湿度条件下培养3～7 d,直到有细胞从组织边缘爬出。细胞达80%汇合时,胰酶消化传代。有限稀释法进行克隆分离[9]。逐步扩增到107数量级。
1.2.2 流式细胞仪检测干细胞表型
取纯化培养的人OF- BMMSCs,PBS 冲洗2 次,0.25%胰酶消化,离心,用含 3%FBS的PBS重悬细胞,调整细胞浓度为 3×107个/ml,每个Ep管加 100 μl,室温避光下分别加入CD146- PE(phycoerythrin)、CD105- FITC、STRO- 1- Alexa Fluor 647、CD34- FITC小鼠抗人单克隆抗体2 μl, 4 ℃冰箱孵育1 h,用含3%FBS的PBS清洗细胞2～3 次,1 000 r/min 离心5 min,将细胞重悬于3%FBS 的PBS中。使用同型对照单克隆抗体确定背景标记;用流式细胞仪分析荧光细胞,专用配套软件计算细胞表面抗原阳性率,用%表示。
1.3 LiCl对人OF- BMMSCs增殖活性的影响
取生长状态良好的第3 代人OF- BMMSCs,调整细胞密度至每孔2×103 个,接种于96 孔培养板,每孔接种细胞悬液200 μl,细胞在标准环境下孵育24 h,弃去培养液及未贴壁的细胞。按照加入含不同浓度的LiCl培养基将细胞随机分为0、 5、 10、 20、 40 mmol/L LiCl组,每组设5 个复孔。同时平行设置不加细胞,只加正常培养基作为空白调零孔。在LiCl作用3 d后,每孔加入20 μl MTT 溶液,继续孵育4 h,随后吸弃孔内液体,每孔加入150 μl DMSO,振荡10 min,用酶联免疫测试仪,选择波长490 nm,以空白孔调零,测定其吸光度值。
1.4 LiCl对人OF- BMMSCs骨向分化的影响
取生长状态良好的第3 代人OF- BMMSCs,调整细胞密度至1×105 个/ml,接种于6 孔板,每孔接种细胞悬液3 ml,细胞在标准环境下孵育24 h,弃去培养液及未贴壁的细胞。按照1.3分组,加入含不同浓度的LiCl培养基(0、 5、 10、 20、 40 mmol/L LiCl)3 ml,每组3 个复孔,继续在标准环境下孵育3 d。常规消化、收集细胞,用微量移液器轻轻吹打,将所有液体吸出转入EP管,然后1 000 r/min 离心6 min,弃上清液,PBS 洗涤细胞1 次,1 000 r/min 离心10 min,弃上清液,留细胞沉淀待用。按照碱性磷酸酶试剂盒说明书进行碱性磷酸酶活性检测。采用考马氏亮兰微板法,定量测定样本中蛋白量,从而求得每毫克冻融蛋白中所含的碱性磷酸酶比活性。
不同浓度LiCl作用3 d后,更换为成骨诱导液,诱导7 d,常规冲洗、固定,采用碱性磷酸酶染色试剂盒对各组进行ALP染色(阳性结果是胞质内出现蓝色沉淀)。28 d后各组细胞常规固定、冲洗,用0.5%茜素红pH(4.2),室温染 1 h,PBS清洗3 遍,弃上清,倒置显微镜下观察钙化结节。之后用十六烷基吡啶进行定量分析[10]。
1.5 Real Time PCR 检测ALP、Runx- 2、OCN mRNA 表达
按照1.4方法进行细胞处理,在成骨诱导7、 14 d后分别收集各浓度组细胞,用总RNA提取试剂盒一步法提取细胞总RNA,紫外分光光度计检测浓度,并用1%甲醛变性琼脂糖电泳检测其完整性。用反转录试剂盒合成cDNA,β- actin为内参照。参照GenBank数据库,采用Primer 5.0计算机软件设计引物,由Taraka公司合成,引物基因序列见表 1;采用RT- PCR进行检测,反应体系(premix 10 μl、dyE 0.4 μl、ddH2O 6.6 μl、上下游引物各0.5 μl、 样本模板2 μl)反应条件参照产品说明书,实验重复3 次。
1.6 统计学处理
结果均以undefined表示,采用 SPSS 16. 0 软件处理数据, 采用单因素方差分析和有重复测量的方差分析法进行数据统计。
2 结 果
2.1 人OF- BMMSCs分离、纯化与鉴定
用组织块法培养原代细胞, 7～10 d组织块周围有细胞爬出, 2～3 周左右达到80%汇集,克隆细胞大多呈长梭型,少数为椭圆形,胞体较小,胞质丰满(图 1)。纯化后人OF- BMMSCs均阳性表达干细胞标记物CD146、STRO- 1和CD105;阴性表达内皮细胞标记CD34(图 2)。
2.2 不同浓度LiCl对人OF- BMMSCs增殖活性的影响
不同浓度LiCl处理细胞3 d后,其中5 mmol/L LiCl组与0 mmol/L组相比促进细胞增殖(P<0.05)。但随着LiCl浓度的增大,表现为抑制作用,且随浓度增大抑制作用越明显(P<0.05)(图 3)。
A: 原代细胞培养; B: 细胞克隆形成
2.3 不同浓度LiCl对人OF- BMMSCs骨向分化的影响
不同浓度LiCl处理细胞3 d后,只有40 mmol/L组ALP活性明显增高,与其他组比较均有统计学差异(P<0.05);其余各组均无统计学差异(P>0.05)(图 4);不同浓度LiCl预处理细胞3 d后,成骨诱导7 d,ALP染色显示:随着LiCl浓度的增大,染色效果越深(图 5);成骨诱导28 d, 20 mmol/L组及40 mmol/L组可见形成大量矿化结节; 5 mmol/L组、 10 mmol/L组与0 mmol/L组比较无明显差异。RT- PCR结果显示:在成骨诱导7、14 d后,各实验组细胞骨相关基因ALP、Runx- 2、OCN mRNA表达水平均比0 mmol/L高,且呈浓度依赖性, 40 mmol/L组较0 mmol/L升高最为明显(P<0.05);并且随着诱导时间的延长,骨相关基因也表现为升高趋势(图 7)。
3 讨 论
组织工程及细胞和基因治疗的一大关键问题是寻找适宜的种子细胞,BMMSCs作为未分化干细胞,具有多向分化潜能[11]。因此, 将其作为种子细胞具有广阔的前景。然而骨髓中BMMSCs的比例非常小,(0.1×106)～(1.0×106)个骨髓有核细胞中约含有1 个BMSCs,并且随着年龄的增加或体质的衰弱,BMMSCs的数量逐渐减少[12],有研究发现在体外培养的 BMMSCs 在首次细胞融合后,其增殖率即有所下降,同时多向分化潜能亦有所丢失[13],这些都影响了BMMSCs 的应用。
研究表明BMMSCs的生物学特性受到多重信号通路的调控,如何寻找到关键信号通路来调节其增殖及骨向分化能力是解决骨组织工程中种子细胞利用率的一个重要前提。Wnt信号等多种信号通路与干细胞的未分化状态和多分化潜能的维持、自我更新、细胞增殖、分化以及胚胎发育等相关。而且近年来的报道称Wnt 经典途径对生理成骨是必需的。无论 Wnt 信号分子的表达增强还是Wnt 抑制因子的缺失都将导致骨形成的增强。但随着研究的深入,经典 Wnt信号通路对 BMMSCs成骨分化的促进、抑制作用均见有报道[14,15,16,17,18]。并且Wnt蛋白浓度的不同(Wnt信号通路水平的高低不同),其对同一种细胞表现出的效应也不同[19]。LiCl 是Wnt/β- catenin信号通路的特异性激活剂,生理条件下LiCl可以抑制GSK- 3β的活性,从而拮抗GSK- 3β对β- catenin的磷酸化和降解作用,使胞质内的β- catenin不断聚集并释放至核内,与核内转录因子TCF/LEF家族相连接,启动下游靶基因的转录和表达,从而激活Wnt/β- catenin[20]。Kato等[18]研究发现,口服给予GSK- 3β抑制物 LiCl 可促进小鼠骨形成,缓解LRP5- /- 小鼠骨量的减少。Davidson等[21]研究表明,抑制GSK- 3β能使β- catenin的降解立即被中断,与APC的亲和力降低,使游离β - catenin增多,进而使Wnt/β- catenin信号通路顺利进行。
本研究通过不同浓度LiCl作用颌骨来源骨髓间充质干细胞后观察其对细胞增殖与分化的影响。发现不同浓度LiCl作用细胞3d后,低浓度组(5 mmol/L组)提高了细胞的增殖活性,但随浓度的增加,LiCl表现出抑制作用,且呈浓度依赖性。与增殖作用相反,不同浓度LiCl作用细胞3 d后,只有40 mmol/L组提高了成骨细胞早期标志基因ALP的表达活性,且具有统计学差异。成骨诱导后,骨相关基因ALP、 Runx- 2、OCN随着LiCl浓度的增加及诱导时间的延长而逐渐增强,并且形成了钙化结节,茜素红染色阳性。该结果与Bain 等[22]在C3H10T1/2 细胞中的研究结果和De Boer[23]在骨髓间充质干细胞中的研究结果一致;该实验结果表明,低浓度LiCl可以促进颌骨来源骨髓间充质干细胞的增殖活性,而高浓度LiCl可以诱导向成骨细胞分化,且呈浓度依赖性。但在本次研究中Wnt信号通路相关因子的表达的变化以及不同浓度LiCl调控颌骨骨髓间充质干细胞的成骨分化的具体机制等,还有待于进一步研究。
摘要：目的:探讨氯化锂(LiCl)对颌骨来源的骨髓间充质干细胞(OF-BMMSCs)增殖及骨性分化的影响。方法:采用有限稀释法克隆化培养人颌骨来源的骨髓间充质干细胞;正常培养基中加入不同浓度LiCl(5、10、20、40 mmol/L),同时设立对照组(0 mmol/L);运用MTT法分析不同浓度LiCl对人OF-BMMSCs增殖活性的影响;采用组织化学染色法、RT-PCR法测定不同浓度LiCl处理人OF-BMMSCs后的ALP活性及相关骨向分化基因(ALP,Runx-2,OCN)的表达。结果:5 mmol/L LiCl促进OF-BMMSCs增殖,对ALP、Runx-2、OCN表达的影响作用不明显(P>0.05),20和40 mmol/L LiCl抑制细胞增殖(P<0.05),促进ALP、Runx-2、OCN基因表达(P<0.05)。结论:LiCl能够促进人OF-BMMSCs的骨向分化。
分化能力 篇7
一、小学英语造成两极分化的原因探究
面对当前的英语教学现状, 中高年级造成两极分化的原因大致可以归纳为以下几点:
(1) 思想认识存在偏差, 学校安排课时量不足。很多学校领导口头重视英语学科教学, 但现实课时安排量却不足, 课程地位不如语数突出。以我校英语学科课时安排为例, 每星期2~3课时教学, 且极少有课外作业, 课外朗读英语的时间更是甚少, 对于语言类学科, 需要大量时间的口语训练和笔头作业, 这是否造成了“三天打渔, 两天晒网”的尴尬教学境况?
(2) 由于小学生生理、心理发展还不够健全, 加之每位学生能力发展各有差异, 对语言学科学习存在思维发展的障碍, 并处于比较典型的以情绪支配意识的年龄阶段, 面对学习上的小挫折, 造成对这门功课的厌学情绪, 久而久之, 他们会逐步放弃该学科学习。
(3) 很多英语教师对该学科的教学目标不够明确, 顾此失彼, 造成了学生综合能力得不到提升。到目前为止, 很多教师在平时的课堂教学中感到, 教学目标确定不甚清楚, 课堂教学活动设计操作性不强, 学生的主体地位得不到充分发挥, 课堂教学仍侧重于字母、语音等基本知识的训练, 对学生综合运用语言的能力发展尚欠缺必要的教学手段。
(4) 师资缺乏, 每位教师课时足、任教班级数众多等客观原因, 缺乏对学困生有效辅导, 造成了部分学生的基本 (四会) 单词、基本句子、基本日常交际用语没有很好地落实。
二、小学英语两极分化的缓解对策
1. 建立民主、平等、和谐的新型师生关系, 帮助学生建立学习自信心
古人说:“亲其师, 信其道。”小学英语教学中必须赢得学生的信任, 建立和谐的师生关系, 为学生的学习活动提供广阔的空间。英语学科有别于其他学科, 需要对学生进行大量的口语训练, 促进学生综合能力的发展。所以, 很多小学生胆小, 害怕出现表达错误, 有些学生怕张口, 这样势必造成学生学习上的心理负担, 他们课堂表现不够积极。作为教师, 突出学生的主体地位, 引导学生积极大胆发言, 为学生自由表达提供舞台, 充分尊重, 信任每位学生, 特别是学习上的后进生, 要与其交朋友, 了解研究他们心理状态, 缩小师生间的心理距离。课堂上, 要精心地设置有利于后进生参与的情境与活动, 让他们自由发挥, 自由组合。
2. 课堂教学要面向每位学生, 珍视个性差异, 因材施教。
课堂教学活动设计要面向全体, 关注每位学生的发展, 因材施教, 不放弃任何一名学生。教师要珍视个体差异, 承认每位学生吸收知识的能力有大有小, 课堂反应有快有慢, 理解与记忆总有强有弱, 表达能力总有高有低。教师要根据每位学生的能力差异, 采用多样化的教学方法, 针对每个学生的不同情况和特点, 给予不同的指导, 提出不同的要求, 分层辅导, 满足多样化需求。特别对于后进生, 可适当降低问题, 保护学生的自尊心, 帮助学生建立自信。如在牛津教材3B教学中, 在教学“swim”单词时, 对于优等生, 可以从词汇的应用角度出发, 通过句型训练“Do you like swimming?”“Let’s go swimming.”之类的句子, 提高学生的应用能力;对于中等生, 可以组成诸如“like swimming”“go swimming”的词组, 让学生以掌握词组为基础, 学会正确表达;而对于后进生, 可以从听、说、读、写基本技能训练为主, 逐步帮助学生学会组词、造句。这样要面向每位学生, 珍视个性差异, 因材施教, 让每位学生都能得到发展。
3. 采用多样化的课堂教学策略, 激发学生的学习热情
多样化的课堂教学策略, 能够激发学生的学习兴趣, 产生学习的动力, 提高学习效果。
(1) 创设课堂教学情境, 提高学生的语言表达能力。对于对话、阅读教学等, 教师可以根据教学内容创设课堂教学情境, 将学生置于直观、有趣的英语学习氛围中, 引导学生积极参与, 逐步提高学生的语言表达能力。在词汇教学时, 可以采用实物、卡片、玩具和简笔画教学, 建立抽象单词与直观实物间的联系, 便于学生更好记忆。在对话教学时, 可以将课堂教学演变为医务室、商场等, 通过情境对话, 让学生直观感受到情境中应该怎样使用词汇、句型, 让学生自觉、充满兴趣的进行英语交际活动。
(2) 灵活采用歌曲、歌谣、游戏教学法。在小学英语教材Fun house版块, 经常出现歌谣、游戏等, 教师可以将这些歌曲、游戏与教学内容有机整合, 激发学生学习兴趣, 让学生在玩中获得所学的知识, 提升语言表达能力。
抚平分化,深化课改 篇8
一、培养学习兴趣, 促其尽快适应新环境
刚进入初中学习生活, 学生对学习数学的情感的态度不明确。主要表现为学习意图不明确, 不思进取;对数学学习丧失了兴趣与信心, 注意力不集中, 上课经常开小差, 思维反应迟钝, 情绪状况不佳, 作业草草了事。学习效率不高, 学习成绩不尽如人意, 考试中想作弊。老师进行批评教育难以取得良好效果, 甚至使学生产生严重的逆反心理和抵触情绪, 妄自菲薄。究其原因, 造成数学学习分化的内在因素是缺乏兴趣及意志相对薄弱。学习的积极性主要取决于学习兴趣与勇于面对困难的毅力。学习意志是为了实现学习目标而尽力战胜困难的心理活动, 是学习积极性的重要体现。学习活动始终与不断战胜学习困难相关联, 与小学期间的学习比较, 初中数学难度进一步加大, 改变教学方法的难度随之加大, 教师辅导逐渐减少, 学生的独立性明显增强。于是, 在衔接过程中, 部分学生适应性较强, 部分学生适应性较差, 表现在学习中情感偏向脆弱、意志不坚, 无法抗拒一些网络游戏, 如果遇到难题和挫折就会退却, 甚至丧失信心, 最终学习成绩不断下降。
兴趣是学生学习的推助力, 能够促使学生尽早适应新环境。如果学生能够在数学学习中产生浓厚兴趣, 就可以形成相应的求知欲望, 就会积极主动地学习。新课程标准更注重培养学生学习数学的兴趣。可以这样说, 教学的最高层境界就是要能够让学生一直保持学习数学的兴趣, 这样的话, 教学上就能够无招胜有招。所以, 一旦教师能够做到这一点, 他所任教取得的教学成绩也将呈正态分布, 如果说还是会呈分化状态的话, 那么也会是往优秀方向呈现。怎样培养学生的数学学习兴趣? 创设问题情境, 促使学生积极参与教学活动;充分备学生, 特别是考虑数学学习后进生的刚性需要, 尽可能为他们准备一些营养食品, 即, 设计若干简单问题防止优秀生“哄而抢之”, 让其分享获得成功的愉悦;充分认识合作学习的良性作用, 营造良好的学习竞赛环境;发挥数学的趣味作用;提高教师的艺术魅力, 等等。
我校学生的来源分布较广, 家长不重视教育, 学生的自觉性差。这样就产生了一个比较奇怪的现象, 每到周一, 作业收交的情况很糟糕。查明原因, 在休息的这两天假期里, 部分学生根本不把学习放在心上, 乃至不做作业, 加之部分家长没有辅导能力, 关心不够, 或者不知从哪关心起。出现这样令人尴尬的局面。一直以来, 我坚持把班里的学生按相应的规则分成若干小组, 这样既有利于课堂讨论, 又有助于创造良好的竞争学习环境。同时, 我在周末经常做针对“双基”的测试, 并把每个小组的一周总成绩统计保留, 然后累加形成月总成绩, 以此类推, 最终汇成学年总成绩, 再进行表彰。我且把这个项目美其名曰“拉力赛”, 它涉及小组荣誉, 又因为学生本身具有较强的竞争意识, 如此, 大部分学生就能自觉完成, 即使有个别学生忘掉, 小组其他成员也会不失时机地提醒。这就无形中解决了交作业难题, 营造了小组合作学习的良好氛围。尤其是学生对这个方式很感兴趣, 取得了令人意想不到的效果。
二、理解数学特性, 为其充分巩固旧基础
就数学教材而言, 初中数学较之于小学, 其结构更富有逻辑性、系统性。首先体现在其衔接上, 前面所学的内容为往后的学习埋下伏笔;其次体现在数学技能技巧的掌握上, 已掌握的技能技巧是形成新的技能技巧的基础。如果学生对前面所学的知识的掌握不能达到相应要求, 不能及时掌握, 并形成技能, 将会造成连续性进程中的薄弱点, 不能够跟上集体学习的进程, 导致学习的分化。
教师在教学过程中要使学生了解数学严谨性、抽象性、应用性的特点。严谨性即数学的逻辑性, 如几何教学中的证明等 (如, 通过长期的实践活动、测算拼图等多种方法, 从理论上给以证明, 才得出了三角形的内角和为180度) ;抽象性表现为对空间形式与数量关系这一种特性, 它很少具有事物的形象特性, 而是将其过程符号化 (比如说, 加法的交换律以a+b=b+a的形式来体现) ;应用性指数学在学习生活中各行各业的应用。在理解数学特性的同时, 教师还应加强对学生的学习辅导, 一方面要有意识地培养学生正确的数学学习理念, 另一方面在教学过程中加强学法指导和学习心理辅导。
三、加强思维训练, 促其深入接触新领域
数学学习分化比较明显的分水岭是初中阶段。毕竟, 处在初中阶段, 数学课程的抽象思维能力要求比以往有了较大提高。针对生理期特点, 初中学生处于由形象思维迈向抽象逻辑思维的关键期, 还没有形成成熟的抽象思维方式, 而且学生个体之间差异相对比较大, 部分学生抽象思维能力的发展要快一些, 部分学生较之缓慢些, 其数学学习接受能力会因此表现出相应差异。年龄特征因素除外, 更重要的是教师未能够很好地依据学情及教学要求组织教学活动, 指导其掌握有效的学习方法, 促其抽象思维的发展, 提高学习能力及适应性。在初中数学教材中, 有许多复杂的概念、公理、公式等, 如果靠机械记忆则显然是难以完成的。学生感到中学课程的难度太大, 如果稍稍分心就如堕入五里烟云。
针对后进生难以适应初中数学学习的问题, 我认为应该从初一阶段就开始加强抽象的逻辑能力训练, 并尽可能促使学生在教师的指导下积极探求知识。如此, 学生不但学会了知识, 还在潜意识中理解了基本的数学思想及方法, 进而培养了逻辑思维能力, 为进一步学习埋下了伏笔。
楼市分化时代到来 篇9
为什么相隔千里不到的地方，一个像冬天一样寒风凛冽，另外一个却是艳阳高照？
房地产市场存在一个长周期，根据美国的数据，二战以后，这个周期长达20年。当一个地方实体经济逐渐走强，你在此购买一处房产，房价会逐渐上涨，而人们也变得有钱了，这是一个长周期的发展模式。
楼市分化时代已经到来。核心城市、资金与人口导入的城市，房地产市场稳中有升；以往泡沫过高、目前仍未找到经济突破点的非核心城市，房价下跌；人口与资金流出的城市，房价大幅下降。
据高和资本《2012年民间资本与房地产研究报告》专刊指出，房地产区域分化明显，温州房价大幅下降，但成交量仍不理想；鄂尔多斯除房屋“抵债”式出售外，基本无市场成交。温州和鄂尔多斯为民间资金本地积累型地区，民间借贷资金链断裂后难以支撑虚高的房价；山西和陕北属于民间资金外流型地区，本地房地产投资需求相对较少，市场调整有限。依此推测，市场上升空间也有限。
而其他一些地区房地产市场依然保持平稳，如全国重点城市京沪等地，以及区域性核心城市郑州、太原、武汉等地。从房租价格看，在2010年实行严厉的房地产调控政策后，以住宅为主的房租价格大幅上升，尤其以北京等地的核心区域写字楼租金上涨速度最为迅猛，说明在通胀压力与资源集聚效应下，核心城市仍有房价稳中有升的内在动力。
这就不难理解一种现象，一旦北京的房价略有下跌，大批人就会看房、买房，而在鄂尔多斯，即使房价下跌了50%，依然没有人敢购置房产。同样的情况还发生在北欧与南欧、美国的西海岸与东海岸。
与鄂尔多斯和温州等地情况相反的是，由于人口与资金流入，中西部由轨道交通贯穿而成的核心城市房价在温和反弹。虽然存在去库存化难等矛盾，但人口大省的集聚效应使得郑州刚需上升，今年上半年80到90平方米的住宅供应量150.45万平方米，销量109.21万平方米，改善型需求保持平衡。
太原同样如此，虽然煤价下跌，但区域性大城市的集聚效应，使太原的房地产市场保持平稳。正如温州房价下跌未能影响杭州的房地产市场，城市群中大城市已经显示出明显的资源集聚优势。
当前，地区资源正在进行新一轮的配置——资金在从旧的富裕地区向新富地区重新配置，在中国如此，世界亦是如此。而当某一地区的资源、资金、人员开始集聚时，就是此地新一轮上涨周期的开始。
分化能力 篇10
关键词：全反式维甲酸,分化型甲状腺癌,再分化,放射性碘治疗
分化型甲状腺癌(DTC)包括乳头状癌和滤泡状癌,占甲状腺恶性肿瘤的90%以上,DTC恶性程度不高,其肿瘤细胞保留了甲状腺细胞的摄碘功能。目前常用“手术+131Ⅰ治疗+甲状腺素抑制”的综合疗法治疗DTC,提高了DTC患者的生存率。但在DTC病变发展过程中,肿瘤细胞有失分化的趋势,其摄取碘的功能降低甚至消失[1],因而无法有效地利用放射性碘治疗。研究发现,维甲酸(Retinoicacid,RA)对多种肿瘤细胞均具有一定的诱导分化作用。在维甲酸的作用下,肿瘤细胞有的出现类似正常的细胞表型,有的则恢复正常细胞的某些功能[2]。笔者已利用ATRA诱导体外培养的DTC细胞,发现维甲酸能诱导DTC细胞的分化,恢复或增强其摄碘功能。在此基础上选取22例DTC患者进行ATRA治疗,以进一步探讨全反式维甲酸诱导再分化在131I治疗分化型甲状腺癌中临床应用价值。
1 资料与方法
1.1 研究对象
2003年7月～2007年12月,在我院进行碘治疗的22例患者中男性l2例,女性10例,中位年龄58岁(17～72岁);乳头状癌l2例,滤泡癌8例,混合性癌2例;伴有肺转移l8例,骨转移6例,其中2例同时伴有肺和骨转移。肺转移经胸部X片及CT证实,骨转移经CT和骨扫描证实。所有患者均在甲状腺全或次全切除术后经过1次或多次 131I清除残留甲状腺组织治疗。
1.2 治疗方法
1.2.1 患者忌含碘食物及药物4周,停服甲状腺片4～6周或T32周,检测血清T3、T4、TSH、Tg和甲状腺吸131I率,并口服74～185MBq131I 48～72h后进行全身显像,并做CT、周围血象和肝肾功能检查。
1.2.2 口服ATRA 20mg/次,每日3次,疗程1.5～3个月,平均2个月。
1.2.3 测定ATRA诱导前后DTC复发灶或转移灶的动态摄碘变化(131I全身显像)及血清Tg值,并进行比较。
1.3 判断标准
通过半定量方法,勾画转移灶内ROI,扣除相同ROI本底计数(前臂),求出转移灶每像素的放射性计数(counts/pixel),比较ATRA诱导前后转移灶的放射性变化。肿瘤病灶放射性分布明显高于健侧部位者为阳性(即T/N>1.3),少许或无放射性分布者为阴性(即T/N≤1.3)。
1.4 疗效评价
将ATRA治疗后碘摄取较前增加的病例归为治疗有效组,而ATRA治疗后无碘摄取或同前相比碘摄取无变化的病例归为治疗无效组。血清Tg的测定采用电化学发光法,正常值为<50ng/ml,在服用ATRA前、后进行检测。应用配对t检验来比较ATRA治疗前后Tg的变化。
2 结果
2.1 ATRA治疗前后碘摄取的比较
22例患者中有9例(41%)在服用ATRA后碘摄取较前增加;13例(59%)RA治疗无效(7例在ATRA治疗后无碘摄取;6例ATRA治疗前有弱的碘摄取,而治疗后同前相比没有变化)。
2.2 ATRA治疗前后血清Tg值的比较
治疗有效组的中位Tg值(401～992ng/ml)较治疗无效组(176～616ng/ml)增高明显,但两组治疗前后Tg值比较无显著性差异(P>0.05)。
2.3 不良反应
7例患者(32%)服ATRA后有乏力、口干、头痛、双膝关节酸胀等不良反应,未见因副反应严重而中断131I治疗者。
3 讨论
甲状腺癌是内分泌系统最常见的一种恶性肿瘤,大约占人类全部肿瘤的1.4%,男女之比约为1∶2～3。其病理类型包括乳头状癌、滤泡状癌、髓样癌及未分化癌 。其中乳头状癌和滤泡状癌又称为分化型甲状腺癌(DTC) ,占甲状腺恶性肿瘤的90%以上,DTC恶性程度不高,其肿瘤细胞保留了甲状腺细胞的摄碘功能。“手术+131I治疗+甲状腺素抑制” 综合治疗模式是目前多数学者认为最佳的DTC治疗方案,这一方案可降低复发率或转移灶的发生率[3]。但是, 在DTC病程进展中,大约30%的DTC患者肿瘤细胞分化程度发生变异,形态和功能出现退行性变,因而降低或丧失正常甲状腺细胞的功能,这种现象称之“失分化”。如TSH受体表达障碍和浓集碘能力丧失,使放射性131I治疗和甲状腺激素抑制TSH治疗均无法进行[4]。另外,DTC细胞在多次131I治疗后,可能会丧失其分化特征,其摄碘率明显降低甚至不摄碘,致使这部分患者缺乏有效的治疗手段[4]。
钠/碘同向转运体(NIS)是存在于甲状腺滤泡细胞基底侧细胞膜上的一种糖化膜蛋白,即以前所谓的“碘泵”,它对碘的主动运输使甲状腺内碘浓度高于血浆20～40倍。体外研究发现ATRA可增加对DTC细胞NIS表达,诱导DTC细胞分化,提高碘的摄取率[5]。本研究用ATRA治疗失分化的DTC患者22例,ATRA诱导后病灶131I摄取明显增高者9例,其中滤泡状癌4例、乳头状癌4例,混合性癌1例,有效率为41%,与文献报道相似[6]。研究结果表明,ATRA治疗确实能使部分失分化的DTC患者发生再分化,恢复肿瘤细胞的摄碘能力,进而可行131I和甲状腺素抑制TSH治疗。本研究发现,滤泡状癌、乳头状癌和混合性癌的患者都分别存在于有效组和无效组,说明肿瘤的病理类型不是决定疗效的因素。ATRA治疗有效组的Tg水平明显高于无效组,说明ATRA诱导分化过程中DTC细胞合成Tg的功能恢复,对碘浓聚能力的增加说明DTC细胞对TSH的调节作用产生反应[4]。由此可见血清Tg水平及其动态变化可作为临床评价DTC复发、转移或活跃的指标。131I全身显像与Tg测定是DTC患者随访中应用最多的,也是决定患者进一步治疗方案的最主要的检查手段。
ATRA治疗的毒副反应较轻,大约30%～40%患者服用ATRA后出现乏力、口干、头痛、双膝关节酸胀等不良反应,较少出现贫血、白细胞或血小板减少及肝功能受损,未见因副反应严重而中断131I治疗者。应用ATRA治疗可以部分提高DTC的摄碘能力,有利于提高疗效,减少辐射剂量,使原来不摄碘的甲状腺癌得到治疗。因此,ATRA治疗失分化的DTC具有重要的实用价值和广阔的应用前景。
参考文献
[1] Schmutzler C,Kohrle J.Retinoic acid redifferentiation therapy forthyroid cancer(J).Thyroid,2000,10(5):393.
[2]刘卫,房殿春.维甲酸化合物诱导肿瘤细胞分化研究进展(J).国外医学.内科学分册,1996,23:160-164.
[3]余永利,罗全勇,陈立波,等.分化型甲状腺癌术后131I治疗对复发的影响(J).中华核医学杂志,2004,24(4):217-219.
[4] Grunwald F,Menzel C,Bender H,et al.Redifferentiation thera-py-induced radioiodine uptake in thyroid cancer(J).J Nucl Med,1998,39:1903-1906.
[5] Schmutzler C,Kohrle J.Implications of the molecular character-ization of the sodium iodide symporter(NIS)(J).Exp Clin Endo-crinol Diabetes,1998,106(Suppl 3):1-10.