肾阴虚型糖尿病

肾阴虚型糖尿病（精选四篇）

肾阴虚型糖尿病 篇1

1 中医病因病机

本病以肾虚为主, 《素问·上古天真论》[3]中指出“……七七任脉虚, 太冲脉衰少, 天癸竭。地道不通, 故形坏而无子也。”此文也明确指出了女性在七七之年, 肾气渐衰, 冲任气血衰少, 天癸将竭, 加之受内外环境影响, 若素体阴虚血少, 或房事不节, 肾阴更亏, 脏腑失养, 故可出现如急躁易怒、手足心热、耳鸣等一系列绝经前后诸证。一般多数妇女在此期可无不适, 但仍有妇女由于内外界环境的影响, 出现一系列绝经前后症状。

2 临床表现及方药

临床表现:绝经前后, 月经周期提前或推后, 量或多或少, 色鲜红, 伴有头晕目眩, 耳鸣, 腰酸, 头面烘热, 伴有汗出, 心烦, 手足心热, 失眠多梦, 尿少色黄, 大便干结, 舌红少苔, 脉细数。

治则:滋肾益阴, 育阴潜阳。

方药:左归丸合二至丸加减。

3 名家经验用方

孟安琪教授[4]指出, 妇女接近七七之年, 冲任气血衰少, 天癸渐竭, 脏腑失于濡养, 且“肾为先天之本”, 肾的阴阳平衡失调, 常可累及到他脏, 尤以心、肝、脾为主。孟安琪教授擅于滋肾时阴阳同补, 同时配合补脾疏肝之法。临床上常用左归丸为基本方加减, 达到滋肾补阴之效。

陈霞教授[5]认为, 肾阴不足是绝经前后诸证的基本病机。绝经前后肾气逐渐亏损, 水火共济失调, 不能滋养心阴而使心火上亢, 临床上可出现失眠、手足心热、心悸、怔忡等症状;肾阴不足, 水不涵木, 容易导致肝肾阴虚或肝阳上亢, 可出现眩晕耳鸣, 头目胀痛、急躁易怒等症状。由于内外环境的影响, 可累及它脏, 同时也可导致病理产物产生。治则上主要以补肾滋阴为主。自拟益坤饮, 方药组成为:熟地黄、白芍、枸杞子、钩藤、生牡蛎、淫羊藿。诸药合用不仅达到补水降火, 调和阴阳之功, 而且标本同治。

吴克明教授[6]认为妇女绝经前后阶段女性生理病理特点为“血常不足, 气非有余”。由于女性经断前后的生理特点, 加之本病以肾虚为本, 故早期临床上多见肾阴虚型绝经前后诸证。由于各种复杂因素, 也可出现为偏肾阳虚临床症状, 或肾阴阳两虚的临床症状。对于肾阴虚型经断前后诸证, 吴教授在临床上擅用滋水清肝饮加减治疗本病。治则为滋阴养血, 清热疏肝。

陈潮祖先生[7]认为, 所谓妇女“更年期”是指妇女从生育期向老年期过渡的一段时间。中医辨证常根据潮热盗汗、易怒焦虑诊断为阴虚内热, 每用六味地黄丸为基础治疗, 甚至有的患者一进入更年期阶段即将六味地黄丸作为预防保健药物服用。虽潮热汗出阴虚者众, 但亦不能因此而一见该证就以阴虚论治, 任何疾病、任何证象都不可盲目依据所谓常规, 湿热阻滞, 营卫郁遏, 亦可导致潮热汗出。陈潮祖先生于近年临床中发现, 水湿壅堵, 三焦疏机不利, 亦是更年期诸证的常见病机, 故近年自拟柴桂五苓汤 (即小柴胡汤合桂枝汤合五苓散化裁) 治之颇有良效。

4 病例分析

王某, 49岁, 女, 2016年12月10日初诊

1月前患者无明显诱因出现月经周期提前7~11天, 经期4~5天, 量较前明显减少, 色鲜红, 无血块, 无经期腹痛, 伴有腰酸, 双目干涩, 心烦失眠, 小便色黄, 大便干结, 2~3天1次, 舌红苔燥, 脉细数。辨证为肾阴虚证。治以滋肾益阴, 降火安神。选方为:左归丸合黄连阿胶汤加减。具体方药为:熟地、山药、枸杞、山茱萸、川牛膝、鹿角胶、龟板胶、菟丝子、杭菊花、甘草、黄连、黄芩、白芍、阿胶、鸡子黄。7剂, 上述诸药400 ml水煎服, 早晚服用。12月20日复诊, 自诉心烦失眠症状明显减轻, 其他症状已有所减轻, 继续服用上方, 待症状明显减轻后可服用丸剂治疗。

5 讨论

女性在临近绝经时所出现的如烦躁、耳鸣、五心烦热等一系列不适症候, 多数妇女可自行渡过, 但仍有部分女性持续时间长, 严重影响了其生活质量, 而这些症状常有时单独出现, 也可同时出现, 且出现的频率与时间长短不定, 少则数月, 多则可迁延数年, 甚至十年以上。中医药对本病的预防与治疗, 可从根本论治, 特别强调调整肾阴阳平衡而达到调冲任而消除绝经前后的一系列不适症状, 目前研究表明尚未发现其不良作用, 日渐为各位大家所重视。目前除药物治疗以外, 尚有电针、八段锦、音乐疗法等治疗本病, 当然, 除以上治疗外, 还应对患者采用心理疏导, 让其以乐观的心理面对此段时期。

摘要：绝经前后诸证是指女性在49岁前后出现月经紊乱, 伴有相关不适症状的疾病。本病以肾虚为本, 由于妇女在一生中需经过月经、胎产、哺乳等生理变化, 多次损伤精血, 容易处于阴亏的状态, 加之七七之年, 肾气渐衰, 天癸将竭, 故在临床上见到的绝经前后诸证以肾阴虚证较多。

关键词：肾阴虚,绝经前后诸证,中医药治疗

参考文献

[1]张玉珍.中医妇科学[M].第2版.北京:中国中医药出版社, 2007:169.

[2]谢幸, 苟文丽, 狄文, 等.妇产科学[M].第8版.北京:人民卫生出版社, 2013:364.

[3]张玉珍.中医妇科学[M].第2版.北京:中国中医药出版社, 2007:169.

[4]李明明.孟安琪教授运论治围绝经期综合征临床经验探析[D].辽宁:辽宁中医药大学.2012.

[5]周明镜, 陈霞.陈霞教授治疗肾阴虚型绝经前后诸证经验.[J].吉林中医药.2014.34 (6) :570

[6]李小梅, 潘耀军, 肖家玲, 等.吴克明教授运用滋水清肝饮化裁治疗围绝经期综合征的经验[J].西部中医药, 2011.24 (11) :42.

肾阴虚型糖尿病 篇2

【摘要】 目的:探讨尿微量白蛋白(Urine microalbumin UALB)、尿β2-微球蛋白(Urine β2-Microglobulin Uβ2-MG)、尿α1-微球蛋白(Urine α1-Microglobulin Uα1-MG) 尿转铁蛋白(Urine transferrin UTRF)和尿免疫球蛋白IGG(Urine immunoglobulin UIGG)的检测对2型糖尿病早期肾损害的临床意义。 方法 采用生化分析仪检测81例2型糖尿病早期肾损害组,94例2型糖尿病无合并肾损害组及60例正常对照组尿UALB、Uβ2-MG、Uα1-MG、UTRF和UIGG值，研究尿蛋白对2型糖尿病早期肾损害的临床意义。 结果 2型糖尿病早期肾损害患者UALB、Uβ2-MG、Uα1-MG、UTRF和UIGG值均异常。2型糖尿病早期肾损害组较2型糖尿病无合并肾损害组及正常对照组差异均有显著性(P<0.05)， 结论 尿蛋白联合检测可有效的判断2型糖尿病病情和早期肾损害程度和部位。

【关键词】 尿微量白蛋白 尿β2-微球蛋白 尿α1-微球蛋白 尿转铁蛋白

【中图分类号】 Ｒ４４６

【文献标识码】 Ａ【文章编号】1044-5511(2011)09-0182-02

【Abstract】 Objective Discussing the clinical value of ALB、β2-Microglobulin、α1-Microglobulin、 transferring and immunoglobulin in urine of type 2 diabetic patients with early renal lesion complication. Methods urine levels of UALB、β2-Microglobulin、α1-Microglobulin、 transferring and immunoglobulin were detected by biochemical analysis in 81 cases type 2 diabetic patients with early renal lesion complication(A group) 、94 cases type 2 diabetic patients without early renal lesion complication (B group)and 60 cases normal controls(C group). To study the determinational value of urine proteins in type 2 diabetic patients with early renal lesion complication.. Results urine levels of UALB、β2-Microglobulin、α1-Microglobulin、 transferring and immunoglobulin in type 2 diabetic patients with early renal lesion complication were higher than in type 2 diabetic patients without early renal lesion complication and normal controls.it was significant (P<0.05). Conclusion Combined determination of UALB、Uβ2-MG 、Uα1-MG 、UTRF and immuno- globulin can improve the diagnosis of early renal lesion degree and position in type 2 diabetic patients.

【Key words】Urine microalbumin; Urine β2-Microglobulin; Urine α1-Microglobulin; Urine transferring; Urine immunoglobulin

尿微量蛋白检测主要用于了解肾小球滤过膜的通透性和肾小管分泌、重吸收

功能，有助于肾脏疾病的早期诊断。。正常情况下，血浆中分子量小于40 KD的蛋白质能较容易地通过肾小球滤过膜。当肾小球受损时，其滤过膜通透性增加，尿蛋白滤过就增加；长期患糖尿病会引起肾毛细血管基底膜增厚，内皮细胞增生，使肾小球发生病变，其滤过膜上电荷减少，静电排斥力下降导致蛋白滤出增加，从而使尿中蛋白含量增高，因此，糖尿病尿中微量蛋白的升高强烈地预示发展为糖尿病性肾病的可能性。对于早期肾损害的判断常用指标有尿微量白蛋白(Urine microalbumin UALB)、尿β2-微球蛋白(Urine β2-Microglobulin Uβ2-MG)、尿α1-微球蛋白(Urine α1-Microglobulin Uα1-MG) 尿转铁蛋白(Urine transferrin UTRF)和尿免疫球蛋白IGG(Urine immunoglobulin UIGG)等。

1 对象和方法

1．1 对象 2007-05～ 2011-05我院内科门诊及住院经确诊为2型糖尿病早期肾损害81例：男55例，女26例，平均(45士15)岁。2型糖尿病无合并肾损害组94例：男61例，女33例，平均(43士12)岁。对照组60例，均为门诊健康体检人群，男30例。女30例，平均(44士5)岁。

1．2 方法 2ml，采用美国Beckman公司 unicel DxC800型生化分析仪运用散射比浊法分别测定UALB、 Uβ2-MG 、Uα1-MG 、 UTRF和UIGG。：收集晨尿2ml 经3000r／min离心10min，在生化分析仪运用散射比浊法进行检测。

1．3 统计分析计量数据以平均数士标准差表示，多样本间比较采用F检验；两两比较采用q检验P <0.05为差异有显著性, 多因素分析采用多元逐步回归分析。

2 结果

2．1 三组间两两进行比较 2型糖尿病早期肾损害组UALB、Uβ2-MG、Uα1-MG、UTRF和UIGG值与2型糖尿病无合并肾损害组及正常对照组比较有显著差异(P<0.05)；2型糖尿病无合并肾损害组与正常对照组比较无显著差异(P＞0.05)。见表1。

表1 三组间五种检测指标水平的比较



2．2 2型糖尿病早期肾损害根据受损的部位分为肾小球受损和肾小管受损，81例肾损害中，45例主要是肾小球受损，36例肾小管受损，它们与正常对照组差异明显(P<0.05)，其中肾小球受损组UALB、UTRF和UIGG值明显高于肾小管受损组(P<0.05)，肾小管受损组Uβ2-MG和Uα1-MG值明显高于肾小球受损组(P<0.05)。见表2。

表2 2型糖尿病早期肾损害两种类型五种检测指标水平的比较



2．3 2型糖尿病早期肾损害尿中UALB、Uβ2-MG、Uα1-MG、UTRF和UIGG水平相关因素分析：多元回归分析显示UALB与Uβ2-MG、Uα1-MG、UTRF和UIGG之间有相关性,UALB与UTRF和UIGG之间有相关性（r=0.578, P<0.05;r=0.619, P<0.05）；Uβ2-MG与Uα1-MG之间有相关性（r=0.663, P<0.05）。见表3。

表3 2型糖尿病早期肾损害尿中五种检测指标性关性比较



3 讨论

长期患糖尿病会引起肾毛细血管基底膜增厚，内皮细胞增生，使肾小球发生病变，其滤过膜上电荷减少，静电排斥力下降导致尿蛋白滤出增加，从而使尿中微量蛋白含量增高，因此，糖尿病尿中微量蛋白的升高强烈地预示发展为糖尿病性肾病的可能性^[1]. 人尿中的蛋白很少，其中60%来自血浆蛋白。IgG 为大分子血浆蛋白，ALB与TRF为中分子，肾功能正常时，这三种蛋白不能通过肾小球基底膜，尿中不出现^[2-4]。α1-MG与β2-MG分别是由167和100个氨基酸残基组成的糖蛋白，分子量小能自由通过肾小球基底膜，99% 被肾小管重吸收，因此，α1-MG与β2-MG主要反映肾小管重吸收功能^[5-6]. 五种蛋白在肾功能异常时有如下改变：肾功能重度受损时ALB、TRF和 IgG蛋白均明显增高；中度受损时ALB明显增高，IgG轻度增高；肾功能轻度受损时ALB轻度增高，α1-MG与β2-MG轻度增高或正常，IgG不增高；单纯肾小管功能异常时α1-MG与β2-MG明显增高。五种蛋白与肾脏功能受损程度紧密相关，肾脏功能受损越重，检测值越高。同时，根据尿三蛋白代谢途径不同和肾功能受损时各自的变化，可以判断肾功能受损程度，对肾小球或肾小管损害定位诊断。

试验结果表明，2型糖尿病早期肾损害组UALB、Uβ2-MG、Uα1-MG、UTRF和UIGG值与2型糖尿病无合并肾损害组及正常对照组比较有显著差异(P<0.05)，2型糖尿病无合并肾损害组与正常对照组比较无显著差异(P＞0.05)。见表1。由此可见，尿中这五种蛋白水平的升高可反映肾脏受损的情况。肾脏病变尿蛋白升高主要取决肾小球和肾小管机能障碍， 肾小球病变时， 尿中ALB、TRF和 IgG 较正常对照升高明显(P<0.05)，α1-MG与β2-MG有不同程度升高(_P<0.05)；肾小管病变时α1-MG与β2-MG较正常对照升高显著(P<0.05)，ALB、TRF和 IgG不同程度升高(P

2型糖尿病除会引起肾毛细血管基底膜增厚，内皮细胞增生外，同时，2型糖尿病容易引起泌尿系感染，造成肾小管的损害。2型糖尿病对肾造成的损害是复杂和多方面因素造成的。因此，早期、及时提供各种疾病状态下肾功能改变及肾功能损害的客观指标，为临床早期诊断、早期治疗、判断疗效、观察预后提供重要依据。

参考文献

[1] Lijun Sun, Nabil Halaihel, Weiping Zhang, Thomas Rogers Role of Sterol Regulatory Element-binding Protein 1 in Regulation of Renal Lipid Metabolism and Glomerulosclerosis in Diabetes Mellitus J. Biol. Chem. 2002 277: 18919-18927.

[2] M A Yurko and S Gluck Production and characterization of a monoclonal antibody to vacuolar H+ATPase of renal epithelia. J. Biol. Chem. 1987 262: 15770-15779.

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[4] B J Campbell, L J Forrester, W L Zahler, and M Burks Beta-lactamase activity of purified and partially characterized human renal dipeptidase. J. Biol. Chem. 1984 259: 14586-14590.

[5] A O Grubb, C López, L Tejler, and E Mendez.Isolation of human complex-forming glycoprotein, heterogeneous in charge (protein HC), and its IgA complex from plasma. Physiochemical and immunochemical properties, normal plasma concentration.. J. Biol. Chem. 1983 258: 14698-707.

肾阴虚型糖尿病 篇3

关键词：经间期出血,肾阴虚型,定经汤,治疗

经间期出血是指月经周期不长于7天, 基本正常[1], 在月经中期因雌激素水平短暂下降等原因使失去激素支持的部分子宫内膜脱落而引起阴道规律性出血。该病多发于青春期及育龄期女性, 因疾病发于排卵期, 极易导致不孕[2]。本次研究旨在探讨定经汤加减治疗肾阴虚型经间期出血的疗效, 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2013年1月~2014年12月收治的肾阴虚型经间期出血患者173例作为研究对象。所有患者均已根据相关诊断标准确诊, 且无影响本次研究药物治疗的其他疾病。采用随机抽取的方式将其分为研究组87例与对照组86例。研究组年龄21~36岁, 平均年龄 (27.9±1.2) 岁;其中已婚、未婚患者分别为46例、41例;病程3个月~5年, 平均病程 (3.1±0.8) 年。对照组年龄21~36岁, 平均年龄 (37.7±1.3) 岁;其中已婚、未婚患者分别为46例、41例;病程3个月~5年, 平均病程 (3.1±0.8) 年。两组患者的年龄、婚姻状况、病程等基线资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。

1.2 方法

研究组患者给予定经汤加减方进行治疗, 处方组成:白茯苓9 g、柴胡6 g、炒白芍30 g、山药15 g、当归10 g、小蓟10 g、生地10 g、熟地15 g、荆芥穗10 g、续断10 g、菟丝子30 g, 于月经干净后5天开始服用, 2次/d, 连续用药10天;对照组患者于月经周期第8天开始给予决雌醇进行治疗, 0.05 mg/d, 口服, 连续用药20天。比较两组患者的疗效、治疗前后中医症候评分、不良反应。

1.3 疗效判定标准

显效:患者腰腹疼痛等情况基本消失, 出血症状明显减少;有效:患者腰腹疼痛等情况有所好转, 出血症状有所减少;无效:患者腰腹疼痛等情况、出血症状无改善甚至恶化。总有效率=显效率+有效率。

1.4 统计学方法

研究所得数据均通过统计学软件SPSS 19.0进行处理, 计数资料以百分数 (%) 表示, 采用x2检验, 计量资料以表示, 采用t检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 疗效

研究组和对照组总有效率分别为96.6%、82.6%, 定经汤加减治疗肾阴虚型经间期出血的疗效较佳, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表1。

2.2 治疗前后中医症候评分

治疗前研究组和对照组患者中医症候评分分别为 (15.3±1.5) 分、 (15.1±1.4) 分, 差异无统计学意义 (P>0.05) ;治疗后, 研究组和对照组中医症候评分分别为 (4.2±0.8) 分、 (5.8±0.9) 分, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。

2.3 不良反应

对照组血压升高、食欲不振、恶心呕吐、精神抑郁等不良反应发生率为8.1% (7/86) , 研究组未发生不良反应, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。

3 讨论

经间期出血发生在排卵期, 因此常使患者错过最佳受孕时间而导致不孕, 现代医学将该病归为排卵型功能失调性子宫出血[3]。临床上尚未明确经间期出血的病因, 主要是依赖雌、孕激素的协同作用及正常的凝血功能止血, 但长期效果不理想[4], 不能达到治疗要求, 且常伴有激素依赖性。中医理论中并无“经间期出血”的概念, 认为该病病因病机为肾阴虚[5], 治疗应以调理脏腑机能、滋阴养阴为主。定经汤采用异病同治的原则, 炒芍药、当归养血柔肝、补血活血, 熟地、生地滋阴补阴, 续断滋补肝肾, 茯苓健脾利水, 柴胡、荆芥穗解郁疏肝, 诸药配伍使用, 具有补益脏气、调和气血、滋阴补肾的功效, 可有效治疗肾阴虚型经间期出血患者的临床症状。本次研究结果证实, 定经汤加减治疗肾阴虚型经间期出血可明显降低中医症候评分及提高治疗的总有效率, 且无明显不良反应发生。

综上所述, 定经汤加减治疗肾阴虚型经间期出血是一种安全、有效的方法, 值得临床推广使用。

参考文献

[1]魏安民.滋阴清热固冲汤治疗肾阴虚型经间期出血的疗效观察[J].中国误诊学杂志, 2013, 14 (3) :745-746.

[2]郭雨晴.清经颗粒辅助治疗肾阴虚型经间期出血的效果分析[J].内蒙古中医药, 2014, 15 (2) :802-804.

[3]陈美楠.滋阴养肾方治疗肾阴虚型经间期出血的临床效果研究[J].实用中医药杂志, 2012, 21 (5) :840-842.

[4]杨淑琴.自拟中药汤剂治疗经间期出血的疗效及安全性观察[J].中国保健营养, 2011, 18 (2) :394-395.

肾阴虚型糖尿病 篇4

关键词：糖尿病,非胰岛素依赖型,辨证规范化,人类

中医治疗糖尿病因其独具特色的辨证论治和个性化治疗的特点,已成为当前世界关注的热点。本研究观察糖尿病阴虚热盛证患者的基因表达谱及与糖化血红蛋白、胰岛素、体重指数、胰岛素敏感指数等的相关性,并与健康人对照组进行比较,以探讨2型糖尿病阴虚热盛证基因表达与基因组学的关系。

1 临床资料

1.1 研究对象选择

对浙江中医药大学附属第二医院糖尿病防治中心400例糖尿病患者进行中医辨证分型,随机选取6例阴虚热盛证患者,其中男性4例,女性2例,年龄30～65岁,平均年龄(57.6±7.7)岁。另选取年龄与性别相匹配的健康人6例作对照,平均年龄为(50.8±9.4)岁,健康对照组皆排除糖尿病及其它内分泌疾病和各系统器质性疾病。

1.2 诊断标准

根据1999年WHO专家咨询报告诊断标准,空腹血糖(FPG)≥7.0mmol/L(126mg/dl);或糖耐量试验(OGTT)中服糖后2小时血糖(2hPG)≥11.1mmol(200mg/dl);或随机血糖≥11.1mmol/L(200mg/dl)。

1.3 中医辨证标准

参照2002年版《中药新药临床研究指导原则(试行)》中“中药新药治疗糖尿病的临床研究指导原则”,由2位以上主治中医师进行中医辨证分型属阴虚热盛证(主症:咽干口燥、心烦畏热。次症:渴喜冷饮、多食易饥。舌脉:舌红苔黄,脉细滑数,或细弦数)。

1.4 病例纳入和排除标准

凡符合现代医学诊断标准和中医辨证标准者,可纳入实验病例。排除①有糖尿病急性并发症;②经确诊为1型糖尿病,其它类型糖尿病及妊娠糖尿病者;③年龄在30岁以下或70岁以上,妊娠或哺乳期妇女;④有严重心、肝、肾等并发症,或合并有其它严重原发性疾病,精神病患者。⑤中医辨证症状不典型或者两型三型并见,证型复杂者。

2 方法

2.1 一般情况

测量身高,体重。计算体重指数(BMI):BMI=体重(kg)/身高(m2)。

2.2 生化指标检测

所有受试对象均于上午8时前空腹抽取肘静脉血10ml,用于空腹血糖、血脂、糖化血红蛋白(HbAlc)、胰岛素抵抗指数(ISI=ln[1/(FBS×FINS)])、血钙、血钾等生化指标检测。

2.3 基因芯片检测

2.3.1 白细胞的提取与RNA的纯化

随机选取其中3名阴虚热盛证糖尿病患者和3名健康人抽取静脉血5ml,用红细胞裂解液分离白细胞,采用Trizol一步法抽提总RNA,用分光光度计在260nm和280nm处分别测定吸光度,A260/A280比值在1.8～2.1为较纯的RNA,用于芯片检测。

2.3.2 芯片杂交

经检测合格后的总RNA可用于合成双链DNA进行纯化。然后进行化学发光检测的AmpoLabeling-LPR标记,变性的cDNA探针全部加入0.75ml预热的GEAprehyb中,混匀,放在60℃待用。弃去杂交管中的GEAprehyb溶液,加入含探针的GEAprehyb混合液至杂交管中,60℃下6rpm杂交。

2.3.3 化学发光检测

洗膜后加入链亲和素偶联的碱性磷酸酶(AP),再洗膜4次,加入CDP-Star化学发光底物至杂交管中,室温孵育2分钟。用滤纸去除多余的CDP-Star溶液,用X射线胶片曝光。

2.3.4 图像采集和数据分析

运行ScanAlyze软件,将灰度TIFF格式图片的点阵转化为数字型数据,使用芯片配套软件GEArray Analyzer对原始数据进行去背景计算以及比较运算。

2.4 部分差异表达基因验证

逆转录-聚合酶链反应方法(RT-PCR)。

2.5 IRS-2蛋白表达的检测

Western-blotting。

2.6 统计学分析

各级实验数据以undefined表示,采用SPSS Windows13.0软件处理,以One Way ANOVA方法进行方差分析,P<0.05为统计学意义显著性标准。

3 结果

3.1 一般情况及血液生化指标检测结果

见表1。

与健康对照组比较*P<0.05,**P<0.01

3.2 基因芯片检测结果

3.2.1 2型糖尿病阴虚热盛证患者的基因表达检测结果

糖尿病阴虚热盛证患者与健康对照组相比,共筛选出表达量改变比值大于2倍的基因58条,其中表达上调的基因有50条,包括受体、载体通道基因14条;核受体基因1条;分泌基因7条;信号转导基因6条;转录因子基因13条;代谢酶基因9条。表达下调的基因有8条,包括:代谢酶基因2条;信号转导基因3条;受体、载体通道基因2条;未知基因1条。见表2～3,图1。

3.2.2 部分差异基因的验证

根据基因芯片检测结果,选择部分差异表达大于2倍以上的差异基因,进行反向验证。RT-PCR结果提示:健康对照组的IRS-2mRNA表达显著高于糖尿病阴虚热盛证患者,阴虚热盛证FOXC2、RETN表达高于健康对照组。Western-blotting也证实糖尿病阴虚热盛证患者血液中存在低表达的IRS-2蛋白产物,差异有显著性,见表4。

与健康组比较*P<0.05

4 讨论

中医治疗糖尿病有其独特的优势,中医治疗的特色在于辨证论治,而准确的辨证需要操作者具有扎实的中医理论基础和大量的临床实践经验。由于辨证过程中主观成分较多,导致诊断结果准确性与操作者的理论水平和临床经验直接相关,若辨证失当则降低疗效,甚至使患者病情加重。由于其自身具备的潜在优势、加之中医现代化的迫切要求,中医治疗糖尿病辨证的客观化成为一个研究方向。阴虚热盛是糖尿病的常见辨证分型之一,禀赋不足,五脏柔弱;外感六淫之邪,入里化热伤阴;饮食肥甘,伤及脾胃,湿热内盛;情志不遂,气郁化热伤阴;房劳过度,伤及肝肾之阴等,皆可形成阴虚热盛。本研究结果显示,阴虚热盛属于糖尿病的初期阶段,多以多饮、多食、多尿、体重减轻为主要症状,体重指数与健康人无明显差别,但是阴虚热盛型一般伴有高血糖,糖化血红蛋白明显高于正常组。阴虚热盛证具有病程短,并发症较轻的特点,故此型糖尿病患者的脂代谢紊乱相对较轻。基因芯片结果显示:糖尿病阴虚热盛证患者与健康对照组共筛选出表达量改变比值大于2倍的基因58条,以上调趋势为主,包括:受体、载体通道基因、核受体基因、分泌基因、信号转导基因、转录因子基因、代谢酶基因等。

水通道蛋白(AQP)是一系列具有高度同源性的内在膜蛋白家族成员,目前已从哺乳动物组织中分离克隆出10种AQP,它们广泛分布与多个组织器官,其基本功能是介导自由水分子的跨生物膜转运。AQP4在骨骼肌尤其是快收缩肌纤维中表达非常丰富[1],使骨骼肌在收缩时快速调节细胞体积与流体静力压的变化,防止细胞膜被破坏。本研究中发现AQP4在阴虚热盛证中表达较高,国内也有学者认为水通道蛋白与湿热证的病理生理息息相关。过氧化物酶增殖体激活受体(PPARs)属核激素受体超家族,共有3种亚型PPARα、PPARγ、PPARδ,PPARγ已被公认在调控脂肪细胞分化和调控多种代谢(糖、脂肪、能量代谢等)中起重要作用[2]。PPARs参与调节脂质代谢与糖代谢、脂肪细胞分化和能量平衡、炎症反应、动脉粥样硬化及肿瘤细胞的分化与凋亡等生理和病理过程,使胰岛素分泌减少,导致糖尿病发生[3]。本研究中PPARγ在糖尿病阴虚热盛证中表达高于健康对照组。由于PPARγ主要在肝脏中表达,故外周血白细胞中的表达与糖尿病的发生发展的关系尚须进一步的临床实验观察证实。国内有报道显示糖尿病患者的血抵抗素(Resisitin,RETN)水平升高[4,5],台湾的Tan等[6]研究了1102例糖尿病患者和743例非糖尿病者Rsistin基因3′端的非编码区-62G-A单核酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),发现SNPs是2型糖尿病和高血压的独立影响因素,提示抵抗素与2型糖尿病发病有关。通过观察2型糖尿病阴虚热盛证和健康对照组白细胞的差异表达基因,发现RETN在糖尿病阴虚热盛证患者血液中表达上调。

本项目研究发现有15条特异性上调表达基因,仅存在于阴虚热盛证中,而未见于其他证型中,它们分别是INS、ABCC8、IL4R、AQP2、HLA-DRB5、MAP2K6、TITF1、SREBF2、CTLA4、FOXG1B、NSF、PPARG、RETN、DUSP4、ACE,这些基因均已明确与2型糖尿病的发生发展存在密切的关系,本项目研究结果进一步证实它们与阴虚热盛证有内在的联系。

参考文献

[1]Mezzano S,Aros C,Droguett A,et al.NF-kappaBactivation and overex-pression of regulated genes in human diabetic nephropathy.Nephrol Dial Transplant,2004,19(10):2505.

[2] Mark Van De Casteele,Benjamin Ate Kefas,Zhidong Ling,et al.Specific expression of baxwin pancreatic β-cells is down-regulated by cytokines before the onset of apoptosis.Endocrinology,2002,143(1):320.

[3]Tanaka T,YanamotoJ,Iwasaki S,et al.Activation of peroxisome prolifer-atoractiated receptorδ-oxidationin skeletal muscle and attenuates meta-blic syndrome.Proc Natl Acad Sci USA,2003,100(26):15924.

[4] Fujita H,Fujishima H,Morii T, et al.Effect of metform on adipose tissue resistin expression in db/db mice.Biochem Biophys Res Commun ,2002,298(3):345.

[5]Zhang J,Qin Y,Zheng X,et al.The relationship between human serum resistinlevel and bodyfat content,plasma glucose as well as blood pres-sure.Zhonghua Yixue Za zhi,2002,82(23):1609.